取代苯對花翅搖蚊解毒酶生化和分子毒理學(xué)機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2024-05-30 06:05
本文在中國優(yōu)先控制污染物“黑名單”及課題組前期研究的基礎(chǔ)上,篩選出10種取代苯,以花翅搖蚊(Chironomus kiiensis Tokunaga)4齡幼蟲為研究對象,測定了取代苯的單一毒性、二元聯(lián)合毒性,并用AI、TU、MTI和λ法對聯(lián)合毒性效應(yīng)進(jìn)行了綜合評價(jià)。研究結(jié)果表明:取代苯對搖蚊幼蟲表現(xiàn)為低毒性,10種取代苯對搖蚊蟲24 h的LC50范圍為40~450 mg/L;取代苯毒性的大小取決于取代基種類及位置,基團(tuán)毒性的貢獻(xiàn)為:-OH≈-NO2>-CH3>-H,同分異構(gòu)體毒性大小依次為:鄰甲苯>間甲苯>對甲苯,對苯二胺>間苯二胺。對8組等比毒性配比的二元取代苯混合物聯(lián)合毒性作用評價(jià)結(jié)果表明4種評價(jià)結(jié)果并不完全一致,但TU法與MTI法評價(jià)結(jié)果完全一致,AI與λ法完全一致;4種評價(jià)方法對于協(xié)同和簡單相加毒性效應(yīng)的評價(jià)結(jié)果一致,對于部分相加和拮抗作用的評價(jià)結(jié)果則有所不同;綜合4種評價(jià)方法結(jié)果表明部分相加、拮抗、協(xié)同作用和簡單相加作用均占總數(shù)的25%。4種評價(jià)方法對不同毒性單位配比(1:1,1:2,2:1)的對氯苯酚+硝基苯的聯(lián)合毒性效應(yīng)評價(jià)結(jié)果表明4種評價(jià)結(jié)...
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 取代苯類有機(jī)污染物對水環(huán)境的影響
1.2 聯(lián)合毒性
1.3 主要解毒酶對有機(jī)污染物脅迫響應(yīng)
1.3.1 乙酰膽堿酯酶
1.3.2 羧酸酯酶
1.3.3 谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶
1.4 水生指示生物搖蚊
1.5 研究目的與意義
2 取代苯對花翅搖蚊的急性毒性
2.1 材料與方法
2.1.1 供試取代苯
2.1.2 供試?yán)ハx
2.1.3 急性毒性生物測定
2.1.4 聯(lián)合毒性生物測定
2.1.5 聯(lián)合毒性效應(yīng)評價(jià)方法
2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 取代苯急性毒性
2.2.2 取代苯類聯(lián)合毒性
2.3 結(jié)果與討論
2.4 本章小結(jié)
3 花翅搖蚊主要解毒酶對取代苯類有機(jī)污染物脅迫響應(yīng)
3.1 材料與方法
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 蛋白質(zhì)含量測定
3.1.4 致毒處理
3.1.5 搖蚊乙酰膽堿酯酶(AChE)體內(nèi)活性測定
3.1.6 搖蚊羧酸酯酶(CarE)體內(nèi)活性測定
3.1.7 搖蚊谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)體內(nèi)活性測定
3.1.8 搖蚊解毒酶體外抑制測定
3.1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 取代苯對搖蚊體內(nèi)解毒酶活性影響
3.2.2 取代苯對搖蚊解毒酶體外抑制作用
3.3 結(jié)論與討論
3.4 本章小結(jié)
4 苯酚對花翅搖蚊谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶分子毒理學(xué)機(jī)制
4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.1.1 主要試劑
4.1.2 主要儀器設(shè)備
4.1.3 致毒處理
4.1.4 RNA提取
4.1.5 cDNA合成
4.1.6 GSTs基因克隆與分析
4.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR
4.1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 GSTs基因cDNA全長特性分析
4.2.2 系統(tǒng)進(jìn)化分析
4.2.3 搖蚊GSTs基因各發(fā)育階段特異性表達(dá)
4.2.4 苯酚脅迫下?lián)u蚊GSTs基因表達(dá)
4.3 結(jié)果與討論
4.4 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
本文編號:3984660
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
Abstract
1 緒論
1.1 取代苯類有機(jī)污染物對水環(huán)境的影響
1.2 聯(lián)合毒性
1.3 主要解毒酶對有機(jī)污染物脅迫響應(yīng)
1.3.1 乙酰膽堿酯酶
1.3.2 羧酸酯酶
1.3.3 谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶
1.4 水生指示生物搖蚊
1.5 研究目的與意義
2 取代苯對花翅搖蚊的急性毒性
2.1 材料與方法
2.1.1 供試取代苯
2.1.2 供試?yán)ハx
2.1.3 急性毒性生物測定
2.1.4 聯(lián)合毒性生物測定
2.1.5 聯(lián)合毒性效應(yīng)評價(jià)方法
2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 取代苯急性毒性
2.2.2 取代苯類聯(lián)合毒性
2.3 結(jié)果與討論
2.4 本章小結(jié)
3 花翅搖蚊主要解毒酶對取代苯類有機(jī)污染物脅迫響應(yīng)
3.1 材料與方法
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 蛋白質(zhì)含量測定
3.1.4 致毒處理
3.1.5 搖蚊乙酰膽堿酯酶(AChE)體內(nèi)活性測定
3.1.6 搖蚊羧酸酯酶(CarE)體內(nèi)活性測定
3.1.7 搖蚊谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)體內(nèi)活性測定
3.1.8 搖蚊解毒酶體外抑制測定
3.1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 取代苯對搖蚊體內(nèi)解毒酶活性影響
3.2.2 取代苯對搖蚊解毒酶體外抑制作用
3.3 結(jié)論與討論
3.4 本章小結(jié)
4 苯酚對花翅搖蚊谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶分子毒理學(xué)機(jī)制
4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.1.1 主要試劑
4.1.2 主要儀器設(shè)備
4.1.3 致毒處理
4.1.4 RNA提取
4.1.5 cDNA合成
4.1.6 GSTs基因克隆與分析
4.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR
4.1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 GSTs基因cDNA全長特性分析
4.2.2 系統(tǒng)進(jìn)化分析
4.2.3 搖蚊GSTs基因各發(fā)育階段特異性表達(dá)
4.2.4 苯酚脅迫下?lián)u蚊GSTs基因表達(dá)
4.3 結(jié)果與討論
4.4 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
本文編號:3984660
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