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大鼠腦外傷后自噬/溶酶體途徑相關(guān)蛋白表達的研究

發(fā)布時間:2020-12-12 12:58
  目的:研究自噬/溶酶體途徑在腦外傷后激活情況,并對其在神經(jīng)損傷修復(fù)中的作用進行探討。方法:采用自由落體法建立大鼠腦外傷(traumatic brain injury,TBI)模型,透射電鏡法觀測損傷區(qū)及其周邊區(qū)(皮層與海馬)神經(jīng)元中自噬體的形成情況,免疫組化及免疫印記法檢測損傷區(qū)及其周邊區(qū)(皮層與海馬)自噬/溶酶體途徑相關(guān)蛋白cathepsin-B、cathepsin-D、LC3以及Beclin1的表達。免疫熒光雙標及激光共聚焦法檢測損傷區(qū)及其周邊區(qū)(皮層與海馬)cathepsin-B、cathepsin-D、LC3以及Beclin1陽性細胞與caspase-3陽性細胞的共表達情況。結(jié)果:透射電鏡顯示大鼠腦外傷后1h即見到損傷及周邊區(qū)神經(jīng)元內(nèi)自噬體形成,4d-8d出現(xiàn)最為明顯,一直持續(xù)到32d。免疫印記及免疫組化結(jié)果顯示,腦外傷后1h cathepsin-B表達增加(P<0.05),8d達高峰,32d仍有較多表達(P<0.05);腦外傷后12h cathepsin-D表達增加(P<0.05),8d達高峰,32d仍有較多表達(P<0.05);腦外傷后1h LC3、Beclin1表達增加(... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:104 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 TBI大鼠損傷及周邊區(qū)(皮層、海馬)自噬體的檢測
    材料與方法
    結(jié)果
    小結(jié)
第二部分 TBI大鼠損傷及周邊區(qū)(皮層、海馬)溶酶體酶表達的研究
    第一節(jié) Cathepsin-B蛋白表達的時程變化
        一、免疫組織化學(xué)法檢測cathepsin-B蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
        二、Western blot法檢測cathepsin-B蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
    第二節(jié) Cathepsin-D蛋白表達的時程變化
        一、免疫組織化學(xué)法檢測cathepsin-D蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
        二、Western blot法檢測cathepsin-D蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
    第三節(jié) Cathepsin-B,cathepsin-D與caspase-3表達相關(guān)性的研究
        材料與方法
        結(jié)果
        小結(jié)
第三部分 TBI大鼠損傷及周邊區(qū)(皮層、海馬)自噬相關(guān)蛋白表達的研究
    第一節(jié) LC3蛋白表達的時程變化
        材料與方法
        結(jié)果
    第二節(jié) Beclin1蛋白表達的時程變化
        一、免疫組織化學(xué)法檢測Beclin1蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
        二、Western blot法檢測Beclin1蛋白表達
            材料與方法
            結(jié)果
    第三節(jié) LC3、Beclin1與caspase-3表達相關(guān)性的研究
        材料與方法
        結(jié)果
        小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄一 研究論文
附錄二 縮略詞
致謝
詳細摘要



本文編號:2912606

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