發(fā)布時間：2025-01-15 16:24

　　 為了進一步挖掘擬南芥響應Cd脅迫的分子機制,從化學誘導型擬南芥突變體庫(約6 000株系)中篩選獲得Cd敏感突變體,通過測量經(jīng)Cd處理后擬南芥植株的根長變化獲得Cd響應突株系,然后單株收種并鑒定,最終獲得一株對Cd脅迫敏感的突變體。Thermal asymmetric interlaced-PCR(TAIL-PCR)發(fā)現(xiàn)這株突變體T-DNA的插入定位于基因At1g35820和At1g35830之間。進一步分析表明這個突變體也是FLC(Flowering locus C)依賴的晚花突變體,將這株突變體命名為fcr(flowering and cadmium related gene)。FLC在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡中起樞紐作用,并且是開花正調(diào)控基因Suppressor of overexpression of co 1 (SOCI)的抑制因子。在該突變體中FLC的表達明顯高于野生型植株,而FLC下游基因SOCI的表達明顯低于野生型植株,但FLC上游基因的表達變化不明顯。進一步實驗發(fā)現(xiàn),突變體fcr中調(diào)節(jié)環(huán)境因素和春化作用的基因High expression of osmotically re...

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【部分圖文】：

圖1 不同濃度CdCl2對擬南芥Col-0根長的影響

5′-GTGCGGTCCTTGTCAGTGTCT-3′2結(jié)果

圖2 fcr突變體的表型及其T-DNA插入位點

Cd脅迫可延緩根的生長并誘導葉的褪綠病(圖1B),根生長隨培養(yǎng)基中Cd濃度的增加而顯著減緩(圖1A)。在90μmol/LCdCl2下,植株生長部分受阻,但仍可觀察到生長。因此選擇含90μmol/LCdCl2作為Cd的處理濃度。2.2突變體篩選及fcr突變體的表型

圖3 相關(guān)基因在野生型和fcr突變體中表達量的比較

通過TAIL-PCR擴增T-DNA側(cè)翼序列,并在TAIR數(shù)據(jù)庫中進行BLAST發(fā)現(xiàn),突變體fcr的T-DNA插入在At1g35820和At1g35830之間(圖2E)。通過RT-PCR檢測T-DNA插入片段附近基因At1g35820,At1g35830和At1g35840的表達模....

圖4 fcr突變體中調(diào)節(jié)響應Cd脅迫和開花時間的可能機制

重金屬可能對動植物產(chǎn)生毒害。然而植物如何識別和抵御重金屬毒性的潛在分子機制尚未全部發(fā)掘[22]。通過對Cd敏感突變體的研究發(fā)現(xiàn),植物可通過多種分子機制來應對重金屬脅迫[23],但很少有Cd敏感的擬南芥突變體報道。本研究通過篩選對Cd響應的擬南芥突變體,獲得了一個突變體,表現(xiàn)出Cd....

本文編號：4027558