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棕色脂肪組織脂滴和線粒體相互作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 00:17
  棕色脂肪組織作為哺乳動(dòng)物體內(nèi)非顫抖性產(chǎn)熱的主要器官,主要存在于人類嬰兒和其他動(dòng)物體內(nèi)。近年來在成年人體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了棕色脂肪。長(zhǎng)時(shí)間暴露在寒冷環(huán)境中,也可以誘導(dǎo)白色脂肪組織出現(xiàn)米色脂肪細(xì)胞,使其獲得產(chǎn)熱功能。棕色脂肪和米色脂肪細(xì)胞能夠氧化分解儲(chǔ)存在甘油三酯里的脂肪酸,將能量以熱量的形式釋放出來,以維持機(jī)體的正常體溫。在棕色或者米色脂肪細(xì)胞中,與產(chǎn)熱功能相關(guān)的兩個(gè)細(xì)胞器是脂滴和線粒體。脂滴是一個(gè)膜性細(xì)胞器,包含一個(gè)中性脂核心和磷脂單分子層及嵌入單分子層表面的蛋白。幾乎所有生物的細(xì)胞都含有脂滴。動(dòng)物細(xì)胞的脂滴作為儲(chǔ)存甘油三酯的主要場(chǎng)所,在代謝穩(wěn)態(tài)中起著重要作用。脂滴來源的脂肪酸在線粒體中的β-氧化反應(yīng)是細(xì)胞合成ATP的主要能量來源。線粒體也可以將用于合成ATP的能量以熱量的形式釋放出去,以維持動(dòng)物體溫。其中,甘油三酯水解的產(chǎn)物脂肪酸需要被轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體中進(jìn)行β-氧化。因此,脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)效率對(duì)于產(chǎn)熱是至關(guān)重要的。而脂肪酸是親脂性分子,不易在胞漿的水相中轉(zhuǎn)運(yùn)。所以,脂肪酸在脂滴和線粒體這兩個(gè)細(xì)胞器之間的直接或間接運(yùn)輸機(jī)制,就是該領(lǐng)域的一個(gè)重要研究方向。近年來,組學(xué)研究為棕色脂肪組織中的脂滴如何應(yīng)對(duì)外界... 

【文章來源】:中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:140 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 脂滴和線粒體概述
    1.1 脂滴
        1.1.1 脂滴的起源
        1.1.2 脂滴的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 脂滴的形成及動(dòng)態(tài)變化
        1.1.4 脂滴與人類健康
        1.1.5 脂滴的功能
        1.1.6 脂滴研究的意義及應(yīng)用前景
    1.2 線粒體
        1.2.1 線粒體的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 線粒體的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 線粒體的動(dòng)態(tài)變化
        1.2.4 線粒體的功能
        1.2.5 線粒體與疾病
        1.2.6 線粒體與衰老
    1.3 棕色脂肪活性調(diào)控
        1.3.1 脂肪組織的分類
        1.3.2 脂肪組織的生理功能
    1.4 脂滴和線粒體的相互作用
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)常用儀器設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)常用試劑耗材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 小鼠棕色脂肪組織HE染色和免疫組化
        2.2.2 小鼠棕色脂肪組織電鏡樣品制備與觀察
        2.2.3 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體的純化
        2.2.4 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體電子顯微鏡樣品的制備
        2.2.5 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體的LipidTox和Hoechst染色
        2.2.6 小鼠棕色脂肪組織脂滴洗脫和胰酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 小鼠棕色脂肪組織脂滴和線粒體蛋白純度的鑒定
        2.2.8 小鼠棕色脂肪組織脂滴蛋白和線粒體蛋白的質(zhì)譜樣品制備
        2.2.9 白色脂肪前體細(xì)胞和棕色脂肪前體細(xì)胞的培養(yǎng)與分化及熒光觀察分析
        2.2.10 細(xì)胞脂滴和線粒體的純化
        2.2.11 組織或者細(xì)胞RNA的提取
        2.2.12 反轉(zhuǎn)錄PCR
        2.2.13 熒光定量PCR
第三章 棕色脂肪細(xì)胞脂滴和線粒體的緊密相互作用
    3.1 棕色脂肪組織中脂滴和線粒體的相互作用
        3.1.1 棕色脂肪組織的形態(tài)學(xué)分析
        3.1.2 不同溫度處理的小鼠棕色脂肪組織及其純化的脂滴和線粒體分析
        3.1.3 棕色脂肪組織中脂滴和線粒體的緊密相互作用
    3.2 脂滴結(jié)合的線粒體的特性
    3.3 棕色脂肪前體細(xì)胞分化刺激脂滴和線粒體的相互作用
        3.3.1 棕色脂肪前體細(xì)胞的誘導(dǎo)與分化
        3.3.2 棕色脂肪前體細(xì)胞中脂滴與線粒體的相互作用
    3.4 棕色脂肪前體細(xì)胞分化轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
    3.5 白色脂肪前體細(xì)胞分化及米色化
第四章 脂滴結(jié)合的線粒體和細(xì)胞質(zhì)中的線粒體
    4.1 脂滴結(jié)合的線粒體與細(xì)胞質(zhì)中的線粒體蛋白質(zhì)組學(xué)分析
    4.2 與脂滴相結(jié)合的線粒體的特性
    4.3 棕色脂肪組織細(xì)胞質(zhì)中的線粒體的特性
    4.4 短時(shí)間冷刺激應(yīng)激
第五章 討論與展望
    5.1 脂滴和線粒體可能形成細(xì)胞器復(fù)合物
    5.2 氧化型組織中細(xì)胞器復(fù)合物提高脂肪酸的運(yùn)輸效率
    5.3 細(xì)胞器復(fù)合物可能是由蛋白質(zhì)復(fù)合物介導(dǎo)的
    5.4 脂滴和線粒體識(shí)別及錨定的可能調(diào)控機(jī)制
參考文獻(xiàn)
附錄A
致謝
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本文編號(hào):2896699

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