乳制品中卡那霉素殘留檢測用納米纖維基試劑盒的制備

發(fā)布時間：2020-11-13 16:04

　　卡那霉素,氨基糖苷類抗生素的一種,在預(yù)防和治療動物疾病方面發(fā)揮著不可或缺的作用。近年來,畜牧養(yǎng)殖過程中濫用卡那霉素已經(jīng)成為一個全球性問題,過量卡那霉素會在動物源食品中大量殘留,通過食物鏈在人體富集,對人體健康造成極大傷害,因此必須對食品中卡那霉素殘留量進(jìn)行嚴(yán)格把控。本文圍繞乳制品中卡那霉素殘留檢測開展課題研究,傳統(tǒng)檢測方法主要有高效液相色譜法、微生物抑制法、免疫分析法等,這些方法雖然準(zhǔn)確性高、靈敏度高,但是檢測過程復(fù)雜、耗時長、價格昂貴、需要專門檢測人員,限制了其推廣使用。膠體金層析免疫試紙條憑借操作簡單、價格低廉、選擇性好、無需大型儀器、檢測結(jié)果裸眼可辨等優(yōu)勢,成為卡那霉素現(xiàn)場快速檢測技術(shù)中最具發(fā)展?jié)摿Φ臋z測方法之一。目前已有不少研究人員對卡那霉素膠體金試紙條進(jìn)行了大量研究,但是制備的試紙條靈敏度、裸眼檢測限無法滿足實際應(yīng)用要求。本文依托靜電紡纖維膜高比表面積、高孔隙率、堆積密度可控等優(yōu)點,成功構(gòu)建了基于靜電紡納米纖維膜的試劑盒并用于市售乳制品中卡那霉素殘留檢測。主要研究內(nèi)容如下:通過靜電紡絲技術(shù)制備了聚已內(nèi)酯(PCL)纖維膜,探究了紡絲溶液濃度對纖維膜形貌結(jié)構(gòu)、直徑離散、成纖效率的影響,優(yōu)選12.5%的PCL纖維膜(n-PCL纖維膜),15%的PCL纖維膜(m-PCL纖維膜)進(jìn)行后續(xù)改性處理。通過乙醇、NaOH溶液改性處理,獲得親水性PCL靜電紡纖維膜。系統(tǒng)研究了乙醇溶液預(yù)處理、堿液濃度及堿減量處理時間對纖維膜表觀形態(tài)、機(jī)械性能、纖維形貌結(jié)構(gòu)、親疏水性、芯吸性能的影響。利用檸檬酸鈉還原法成功制備了分散均勻的納米金粒子,將納米金粒子與卡那霉素核酸適配體偶聯(lián)在一起形成金標(biāo)核酸適配體,紫外可見分光光度法、動態(tài)粒徑分析、Zeta電位測試結(jié)果表明納米金與核酸適配體通過共價鍵形成了穩(wěn)定的復(fù)合物。將不同改性處理的PCL纖維膜與其他部件組裝成試紙條,固載適量金標(biāo)核酸適配體、T線探針、C線探針到試紙條上組裝成卡那霉素試劑盒。對比各PCL纖維基試劑盒檢測效果,結(jié)果表明,4M的NaOH溶液處理1h的n-PCL纖維基試劑盒靈敏度最高,最低裸眼檢測限達(dá)0.05μg/mL,最終確定該納米纖維膜作為試劑盒反應(yīng)載體。此外,考察了試劑盒的選擇性和實用性。結(jié)果表明,該試劑盒具有良好的選擇性,可用于實際樣品檢測。
【學(xué)位單位】：東華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS252.7
【部分圖文】：