奶牛臨床和亞臨床酮病的血漿代謝組學(xué)研究.pdf
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中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014,47 8 : 1588-1599
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.08.015 奶牛臨床和亞臨床酮病的血漿代謝組學(xué)研究 孫玲偉,包 凱,李 影,李 蘭,張洪友,夏 成,吳 凌 (黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,黑龍江大慶163319) 摘要:【目的】基于代謝組學(xué)的氣相色譜 GC /質(zhì)譜 MS 聯(lián)用技術(shù)分析臨床酮病、亞臨床酮病和健康的奶牛血 漿代謝譜,觀察奶牛體內(nèi)代謝產(chǎn)物的變化,尋找內(nèi)源性代謝分子標(biāo)記物,用于發(fā)現(xiàn)奶牛臨床和亞臨床酮病的早期 診斷及病情進(jìn)展的特征生物標(biāo)志物,并闡明該病發(fā)病機(jī)制!痉椒ā渴占R床酮病奶牛血樣24 例,亞臨床酮病奶 牛33例,健康對(duì)照組奶牛23 例,靜脈采集試驗(yàn)?zāi)膛Q,分離血漿,檢測(cè)其β-羥丁酸、血糖等生化指標(biāo)。將血 漿樣品預(yù)處理后,運(yùn)用GC/MS 聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)各組奶牛血漿代謝產(chǎn)物,利用質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)其進(jìn)行鑒定。采用主成分 分析(principal component analysis, PCA )和偏最小二乘判別分析法(partial least squares discriminant analysis, PLS-DA )等多元統(tǒng)計(jì)方法對(duì)臨床酮病組、亞臨床酮病組和健康對(duì)照組奶牛檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行模式識(shí)別分析。 通過(guò)PLS-DA 方法建立疾病診斷模型后,篩選潛在的疾病生物標(biāo)記物!窘Y(jié)果】以80 例奶牛血漿樣品為分析對(duì)象, 研究建立了內(nèi)源性代謝物譜的GC/MS 分析方法,并利用NIST (2008 )商業(yè)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)檢測(cè)到的代謝物進(jìn)行快速 鑒定,共檢測(cè)出267 個(gè)變量。將代謝組數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P 軟件進(jìn)行主成分分析和偏最小二乘法判別分析,代謝組數(shù) 據(jù)可將患病組與健康組分別聚類(lèi)區(qū)分,并且尋找到組間種類(lèi)無(wú)差別代謝物為40 種。結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,臨床 和亞臨床酮病的差異代謝物均為32 個(gè),臨床酮病與亞臨床酮病組相比有13 個(gè)差異代謝物。通
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