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醫(yī)學(xué)論文論改良嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液及應(yīng)用

發(fā)布時間:2014-07-24 10:25

  嗜酸性粒細胞計數(shù)臨床常見的是直接計數(shù)、涂片白細胞分類計數(shù)和血球計數(shù)儀分類計數(shù)3種方法。但是臨床上為了解疾病進展過程,需要動態(tài)觀察嗜酸性粒細胞的變化,往往采用嗜酸性粒細胞直接計數(shù)。文獻報道”。嗜酸性粒細胞直接計數(shù)的稀釋液較多,用等滲的生理鹽水配制嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液,與《全國臨床檢驗操作規(guī)程》推薦的稀釋液相比,各有優(yōu)缺點。

 

  我院探討使用血小板計數(shù)稀釋液來配制嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液,在臨床實踐了3年,計數(shù)結(jié)果準確可靠,報告如下。

 

  1 材料與方法

 

  1.1 試劑《全國臨床檢驗操作規(guī)程》推薦的稀釋液配制詳見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》。嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液。稱取草酸銨1.Og,EDTA.2Na 0.012g,伊紅0.2g,溶于50mL蒸餾水中,再加人0.6mL TritonX一100,加蒸餾水至lOOmL。

 

  1.2 方法于試管中加入稀釋液0.38mL,取患者末梢血(或EDTA.2K抗凝全血)0.02 mL,混勻,5min后沖入計數(shù)板的兩計數(shù)池內(nèi),靜置3~5min。用低倍鏡計數(shù),鏡下嗜酸性粒細胞被染成桔紅色,其它未被破壞的細胞幾乎不著色。計數(shù)兩個計數(shù)室10個大方格(中央和四角大方格)內(nèi)嗜酸性粒細胞數(shù)。計算嗜酸性粒細胞/L=10個大方格內(nèi)嗜酸性粒細胞數(shù)X20×10 /L。

 

  2 結(jié)果

 

  2.1 對比試驗取住院121例患者的EDTA.2K抗凝全血,分別用《全國臨床檢驗操作規(guī)程》推薦的稀釋液(Y)與本法稀釋液(X)進行嗜酸性粒細胞計數(shù),結(jié)果本法稀釋液(163.4±34.7)×106/L,推薦稀釋液(165.0±35.1)×10/L,2種稀釋液計數(shù)結(jié)果差異無顯著性(P>0.05),其相關(guān)系數(shù)r=0.991,相關(guān)方程Y=1.0216X +3.1247。

 

  2.2 著色時問比較 將稀釋液與抗凝全血混合后,分別在120、180、240、270、300s進行直接計數(shù),《全國臨床檢驗操作規(guī)程》推薦的稀釋液在300s后嗜酸性粒細胞被染成紅色,本法稀釋液在180s后嗜酸性粒細胞被染成紅色。

 

  2.3 重復(fù)性試驗用本法稀釋液進行嗜酸性粒細胞計數(shù)25次重復(fù)試驗,x±S=(226.1±6.9)X 10 /L,CV=3.1%。

 

  3 討論文獻報道,筆耕論文,嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液有很多種,主要是圍繞破壞紅細胞和部分白細胞,嗜酸性粒細胞不被破壞且著色進行改進的。根據(jù)草酸銨有破壞紅細胞的作用,巧妙地運用血小板計數(shù)稀釋液來配制嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液。我們在配制血小板計數(shù)稀釋液的同時,在每100 mL血小板計數(shù)稀釋液中加入伊紅0.2g、0.6mL TritonX一100即可成為嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液,這樣就可以簡化嗜酸性粒細胞計數(shù)稀釋液配制過程。ED—TA.2Na有抗凝和防止草酸鈣沉淀作用。表面活性劑TritonX一100能加速染料溶解,增強染料對細胞的滲透作用,從而使嗜酸性粒細胞著色加快。TritonX一100的濃度為0.6%時,只破壞除嗜酸性粒細胞以外的細胞,嗜酸性粒細胞幾乎不受影響。本稀釋液沒使用揮發(fā)性試劑,這樣稀釋液保質(zhì)期就相對較長,使用一年之久,仍效果很好。本法具有試劑配制簡單,著色時間短,試劑保質(zhì)期長,一種試劑2種用途等優(yōu)點。

 

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