發(fā)布時間：2018-10-07 17:23

【摘要】：研究背景及意義:肺癌是全球最常見的惡性腫瘤,具有極高的致死率和發(fā)病率。肺癌患者往往在診斷時就已出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移,因而錯失了最佳的治療時機。肺癌的轉(zhuǎn)移是患者致死的主要因素,因此,探究轉(zhuǎn)移機制,揭示關(guān)鍵路徑,對癌癥治療有重要的意義。然而,由于傳統(tǒng)實驗手段的限制,對于癌癥轉(zhuǎn)移的研究一直難以深入。隨著微流控芯片技術(shù)的發(fā)展,越來越多的學(xué)者將其與生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合,實現(xiàn)了高通量、高靈敏度、多因素分析、真實模擬體內(nèi)環(huán)境的實驗要求,極大地促進了癌癥研究的發(fā)展。研究工作:1.針對肺癌的轉(zhuǎn)移開展了全面而深入的調(diào)研,一方面明確了轉(zhuǎn)移機制的研究進展,確定肺癌細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)為目前研究的熱點和重點;另一方面,整理和歸納當(dāng)前的實驗方法,明確了集成化的微流控芯片技術(shù)將是未來發(fā)展的方向。因此,本文選擇微流控芯片技術(shù)來研究肺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——EMT。2.根據(jù)調(diào)研結(jié)果,本文利用微流控技術(shù)設(shè)計和制作了 一種基于抗原抗體結(jié)合原理的微流控細(xì)胞捕捉芯片。該芯片的制作依托腫瘤微環(huán)境社會學(xué)研究實驗室,利用光刻工藝分別制備抗體通道SPR-220模板和細(xì)胞通道SU-8模板。在此基礎(chǔ)上,澆注液態(tài)聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS),然后固化脫膜與修飾好抗體的載玻片封接成微流控細(xì)胞捕捉芯片。研究結(jié)論:1.設(shè)計和制作了 一種針對肺癌EMT檢測的微流控捕捉芯片,用于肺癌患者樣本的分析。該芯片有望為臨床的檢測提供支持,并進一步應(yīng)用于癌細(xì)胞與微環(huán)境相互影響的機制研究。2.優(yōu)化了微流控芯片的制作流程,確定了前期加工失敗的原因,為后續(xù)肺癌EMT的體外分析創(chuàng)造了實驗條件。
[Abstract]:Background and significance: lung cancer is the most common malignant tumor in the world with high mortality and morbidity. Lung cancer patients often have distant metastasis at the time of diagnosis, thus missing the best treatment opportunity. Metastasis of lung cancer is the main cause of death. Therefore, it is important to explore the mechanism of metastasis and reveal the key pathway for cancer treatment. However, due to the limitations of traditional experimental means, the study of cancer metastasis has been difficult to deepen. With the development of microfluidic chip technology, more and more scholars combine it with biological technology to achieve high throughput, high sensitivity, multi-factor analysis, real simulation of the internal environment experimental requirements. It greatly promoted the development of cancer research. Research work: 1. A comprehensive and in-depth investigation was carried out on the metastasis of lung cancer. On the one hand, the research progress of metastasis mechanism was clarified, and the epithelial mesenchymal transformation (epithelial-mesenchymal transition,EMT) of lung cancer cells was identified as the hot spot and focus of current research; on the other hand, The current experimental methods are summarized and the integrated microfluidic chip technology will be the future development direction. Therefore, this paper chooses microfluidic chip technology to study the key link of lung cancer metastasis-EMT. 2. Based on the investigation results, a microfluidic cell capture chip based on antigen-antibody binding principle was designed and fabricated using microfluidic technology. The fabrication of the chip relies on the laboratory of sociology of tumor microenvironment. The antibody channel SPR-220 template and the cell channel SU-8 template are prepared by photolithography. On this basis, liquid poly (dimethylsiloxane) (polydimethylsiloxane,PDMS) was poured, and then solidified and demembranized with modified antibody slides sealed to form a microfluidic cell capture chip. Conclusion: 1. A microfluidic capture chip for EMT detection of lung cancer was designed and fabricated for the analysis of lung cancer patients. The chip is expected to provide support for clinical detection and be further applied to study the mechanism of the interaction between cancer cells and microenvironment. The fabrication process of microfluidic chip was optimized, and the reasons for the failure were determined, which created the experimental conditions for the in vitro analysis of lung cancer EMT.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：TN492;R734.2

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本文編號：2255032