發(fā)布時間：2020-07-04 18:04

【摘要】：第一部分白楊素抑制炎癥狀態(tài)下內皮細胞粘附分子的表達目的目前發(fā)現(xiàn)血管內皮炎癥的發(fā)生與多種血管疾病如動脈粥樣硬化、血栓閉塞性脈管炎、糖尿病血管病變等等密切相關。黃酮類化合物被證明能有效預防動脈硬化、降低血脂和膽固醇、及減少冠心病發(fā)病率等。然而黃酮類化合物在內皮炎癥方面的研究較少被提及。本實驗旨在探究一種黃酮類化合物即白楊素(Chrysin)對內皮細胞炎癥的影響及對粘附分子的表達。方法將原代人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)與極低、低、中、高四種濃度的白楊素共同孵育6小時后,予以內皮細胞白細胞介素1β(IL-1β)刺激以模擬內皮細胞炎癥模型。通過細胞粘附實驗來檢測給藥與否及不同濃度對人臍靜脈內皮細胞與人單核細胞(THP-1)粘附率的影響,以及對細胞間粘附分子1(ICAM-1)、血管細胞粘附分子1(VCAM-1)和E-選擇素(E-selectin)的信使RNA水平及蛋白表達水平的影響,據(jù)此評價白楊素對內皮細胞炎癥的作用。結果白楊素可以有效地降低炎癥狀態(tài)下的HUVEC與THP-1的粘附率,并且呈濃度依賴性地抑制IL-lβ誘導的ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的mRNA水平和ICAM-1和VCAM-1蛋白水平的增加。結論在內皮細胞炎癥狀態(tài)下,白楊素可以有效地抑制原代人臍靜脈內皮細胞與單核細胞之間的粘附作用,且抑制內皮細胞粘附分子的轉錄和翻譯,以減輕內皮細胞炎癥的發(fā)生。第二部分白楊素通過NF-κB途徑影響粘附分子的表達目的前一部分的實驗證明了白楊素對內皮細胞的炎癥有明顯的呈濃度依賴性的抑制作用,據(jù)已有研究報道,核因子κB(NF-κB)在內皮細胞的炎癥反應中十分重要,尤其是在調節(jié)粘附分子的作用中,下面我們對白楊素抑制內皮細胞炎癥的分子機制進行了進一步的研究。方法不同濃度的白楊素孵育人臍靜脈內皮細胞后,再予以白細胞介素1β刺激,通過western-blot檢測NF-κB通路中核因子κB的亞基p65及核因子κB抑制因子A(IκBα的經(jīng)磷酸化修飾過的蛋白表達量變化及總蛋白表達量變化,通過p65免疫熒光染色檢測p65在細胞內的轉位,將處理后的HUVEC細胞核質分離后,通過western-blot檢測胞質胞核中p65及IκBα的表達量。不同濃度的白楊素孵育人腎上皮細胞系(HEK-293T)后,通過雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)檢測ICAM-1、VCAM-1以及E-selectin的啟動子活性的影響。結果HUVEC在不同濃度白楊素的處理下,p-65及p-IκBα均呈濃度依賴性的減少,總p65表達量保持不變,而總IκBα表達量首先因IL-1β的作用降低,而后呈白楊素濃度依賴性地增加。中、高濃度白楊素孵育后,通過免疫熒光檢測到HUVEC細胞質中的p65增加,而核內p65減少;對細胞進行核質分離后提取蛋白,檢測到細胞質中的p65中濃度時稍增加,于高濃度時減少,而胞核內p65明顯地呈濃度依賴性減少。白楊素孵育后的293T細胞中ICAM-1及VCAM-1的啟動子活性明顯被濃度依賴性地抑制,E-selectin僅有下降趨勢。結論在內皮細胞中,白楊素抑制了IL-1β誘導的NF-κB通路的激活,且同時抑制核因子κB入核,增加了IκBα的降解。白楊素能明顯降低ICAM-1和VCAM-1的啟動子轉錄活性,削弱E-selectin啟動子的轉錄活性。第三部分白楊素減輕小鼠全身性炎癥損傷模型中的炎癥反應目的探討白楊素在小鼠體內中對血管炎癥反應的影響。方法將白楊素配成低劑量及高劑量兩種濃度,給小鼠連續(xù)灌胃白楊素及陽性對照藥物7天后予以小鼠腹腔注射脂多糖(LPS),18小時后處死小鼠并獲取小鼠肺、肝臟及腎臟,進行組織切片及HE染色,觀察切片中血管管腔及管周的白細胞浸潤、紅細胞聚集及間質水腫等情況。結果經(jīng)白楊素預處理的小鼠血管損傷如白細胞浸潤,紅細胞聚集和間質水腫呈濃度依賴性地減輕。結論白楊素減輕了白細胞-內皮細胞粘附和炎癥,對內皮損傷的滲透性和炎癥反應具有抑制作用,并且需要進一步研究白楊素的潛在用途,例如在糖尿病性血管病或動脈粥樣硬化等疾病中的作用。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 羅yN敏;曹建國;張凱華;;5,7-二甲氧基白楊素對HepG2細胞凋亡的影響研究[J];長治醫(yī)學院學報;2015年02期

2 鄭興;羅星;郭玉;劉運美;王小平;尹松;代琴;劉國剛;廖端芳;;B環(huán)碘取代白楊素的合成及其抗癌活性研究[J];中國醫(yī)藥導刊;2011年01期

3 王葉葉;江羽;梁晨;石崢;譚睿;;白楊素對腦缺血-再灌注損傷的神經(jīng)保護機制研究[J];世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化;2019年04期

4 屈勇;張怡;熊騰;黎娟;鄭國華;;白楊素制劑的研究進展[J];中國藥師;2018年04期

5 郭蒙;王佳麗;李丹;李麗敏;;白楊素-鈷配合物的合成及生物活性[J];實驗室研究與探索;2018年10期

6 肖廣芬;姚晨姣;王成紅;唐雪元;;8-溴-7-甲氧基白楊素誘導K562細胞凋亡作用研究[J];中國實驗血液學雜志;2011年03期

7 彭德乾;白麗麗;陳訓;王穎;付艷;王燦紅;林連波;李娟;劉辰鵬;;鏈烷烴類白楊素衍生物的合成及其脂溶性[J];化學研究與應用;2019年03期

8 殷和美;張羽男;劉立新;張宇;沈宇;郭英雪;張大俊;孫博;;白楊素晶體的波譜特征與結構確定[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2016年02期

9 嚴玲;關紅菁;朱麗華;唐其柱;;白楊素對動脈損傷后新生內膜增生的影響及機制[J];醫(yī)學研究雜志;2019年02期

10 鄒曉青,鄭興,曹建國,卿鳳翎,彭波;6,8-二-三氟甲基-5-羥基-7-乙酰基白楊素的抗腫瘤作用[J];中國藥理學通報;2004年04期

相關會議論文 前10條

1 趙菲菲;姚旭;黃進;羅星;鄭自通;劉運美;郭玉;鄭興;廖端芳;;含碘白楊素衍生物的合成及其抗癌活性[A];藥學發(fā)展前沿論壇及藥理學博士論壇論文集[C];2008年

2 何春陽;李磊;藏偉;張秀娟;;白楊素的藥理活性與納米微粒的制備[A];中國商品學會第五屆全國中藥商品學術大會論文集[C];2017年

3 趙楠;張國文;;白楊素與人免疫球蛋白結合作用的熒光光譜法研究[A];第十屆中國化學會分析化學年會暨第十屆全國原子光譜學術會議論文摘要集[C];2009年

4 彭寶瑩;王劍寧;黃俊明;李欣;;白楊素提高順鉑抗腫瘤作用研究[A];2017環(huán)境與公共健康學術會議暨中國環(huán)境科學學會環(huán)境醫(yī)學與健康分會、中國毒理學會生化與分子毒理專業(yè)委員會2017年年會論文集[C];2017年

5 李欣;陳秀娟;陳美芬;熊習昆;黃俊明;;白楊素提高喜樹堿誘導鼻咽癌細胞(CNE2)凋亡能力的研究[A];中國毒理學會免疫毒理專業(yè)委員會2014年學術會議論文匯編[C];2014年

6 李欣;;白楊素增強TRAIL誘導腫瘤細胞凋亡作用研究[A];中國毒理學會第三屆中青年學者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學研討會論文集[C];2011年

7 肖金婷;翟輝;么陽;郝峻巍;;白楊素對實驗性自身免疫性神經(jīng)炎大鼠的治療作用及機制[A];山東省2013年神經(jīng)內科學學術會議暨中國神經(jīng)免疫大會2013論文匯編[C];2013年

8 喬棟娟;江金環(huán);姚述光;蔡繼業(yè);;基于原子力顯微鏡探測白楊素鍺配合物對BRL細胞的抗氧化作用[A];中國遺傳學會“第十一屆全國激光生物學學術會議”暨《激光生物學報》創(chuàng)刊廿周年慶祝會、第十屆粵港生物物理研討會暨2012年廣東生物物理學術年會會議資料[C];2012年

9 楊美玲;張紫虹;胡帥爾;李文立;古梅英;黃健康;李欣;;白楊素增強順鉑誘導胃癌細胞（BGC-823）凋亡的研究[A];中國毒理學會第九次全國毒理學大會論文集[C];2019年

10 趙曉坤;郭靈麗;;白楊素對矽肺大鼠氧化應激和纖維化的作用研究[A];中國毒理學會第九次全國毒理學大會論文集[C];2019年

相關博士學位論文 前6條

1 蔣炳麗;白楊素衍生物的設計合成及其在血漿中促凝/抗凝活性研究[D];廣西大學;2014年

2 董巍檑;NF-κB/Twist信號通路介導白楊素逆轉宮頸癌HeLa細胞EMT和CSCLC的作用研究[D];南方醫(yī)科大學;2017年

3 劉剛;白楊素抗血小板及抗血栓作用的研究[D];華中科技大學;2014年

4 彭圣明;白楊素偶聯(lián)一氧化氮供體衍生物的合成及α-葡萄糖苷酶抑制和促血管生成活性研究[D];湘潭大學;2009年

5 高恒毅;白楊素通過抑制自噬增強胰腺癌吉西他濱化療敏感性的實驗研究[D];華中科技大學;2016年

6 尚永輝;主—客體分子間相互作用的光電分析及人工神經(jīng)網(wǎng)絡預估研究[D];西北大學;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 趙勝男;白楊素通過抑制NF-κB信號通路緩解血管內皮炎癥[D];華中科技大學;2019年

2 石崢;益智仁乙酸乙酯部位的化學成分及白楊素的活性研究[D];西南交通大學;2019年

3 董季;白楊素通過抑制內質網(wǎng)應激減輕脂多糖誘導的內皮功能障礙[D];山西醫(yī)科大學;2019年

4 李強;白楊素經(jīng)ROS介導的信號通路抑制LPS誘導的細胞炎癥反應[D];皖南醫(yī)學院;2018年

5 劉鼎;新型卟啉—白楊素衍生物光敏體系的合成，性能及體外抗腫瘤活性研究[D];南華大學;2018年

6 梅杰;白楊素抗肥胖的作用靶點篩選及驗證[D];廣州中醫(yī)藥大學;2018年

7 高凱;白楊素與環(huán)糊精衍生物的包合行為研究及手性季擕鹽催化劑的合成[D];昆明理工大學;2015年

8 劉容芳;以烷�；�連接白楊素氨基酸衍生物的合成及其抗HepG2、MCF-7活性研究[D];南華大學;2017年

9 沈洪秀;己酸乙酯橋連白楊素氨基酸衍生物的合成及其抗MGC-803、MCF-7活性研究[D];南華大學;2017年

10 李昌;白楊素衍生物的合成及其活性研究[D];浙江海洋大學;2018年

本文編號：2741404