發(fā)布時(shí)間：2020-07-02 15:26

【摘要】：目的本文旨在從中醫(yī)“虛-瘀-痰”這一病機(jī)探討竹節(jié)參水煎液對(duì)Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及腦海馬突觸相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,初步探討其可能的作用機(jī)制。方法(1)理論研究:通過(guò)查閱文獻(xiàn)、回顧中醫(yī)經(jīng)典對(duì)AD致病機(jī)理的了解,結(jié)合課題組研究成果,深化對(duì)本病病機(jī)理論的認(rèn)識(shí)。(2)實(shí)驗(yàn)研究:將60只3月齡的SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、西藥組、竹節(jié)參低劑量組、竹節(jié)參中劑量組、竹節(jié)參高劑量組。運(yùn)用Aβ_(25-35)雙側(cè)海馬注射進(jìn)行造模,予以相應(yīng)劑量的竹節(jié)參水煎液、鹽酸多奈哌齊、ddH_2O灌胃28天。用Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)用藥前后AD模型大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化情況。用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各組AD模型大鼠腦海馬組織中β淀粉樣蛋白42(Aβ_(1-42))表達(dá)含量的變化情況。運(yùn)用western blot檢測(cè)各組AD模型大鼠腦海馬組織中β位點(diǎn)APP分泌酶1(BACE-1)、Synaptophysin、SynapsinⅠ及突觸后密度蛋白-95(PSD-95)的表達(dá)情況。用免疫組化法(IHC)檢測(cè)各組AD模型大鼠腦海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)的PSD-95蛋白表達(dá)情況。結(jié)果(1)空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠在目標(biāo)象限游泳的時(shí)間明顯縮短(P0.01),大鼠穿越原平臺(tái)放置區(qū)次數(shù)顯著減少(P0.01),第一次穿越平臺(tái)時(shí)間明顯較長(zhǎng)(P0.01);竹節(jié)參治療組與模型組比較,大鼠在目標(biāo)象限游泳的時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P0.05),大鼠穿越原平臺(tái)放置區(qū)次數(shù)顯著增加(P0.05),第一次穿越平臺(tái)時(shí)間明顯縮短(P0.05);各治療組與西藥組比較,差異不明顯;各組大鼠全程游速比較未見(jiàn)明顯差異(P0.05)。(2)ELISA法結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,模型組海馬組織Aβ_(1-42)升高(P0.01);竹節(jié)參治療組,與模型組相比,竹節(jié)參中、高組顯著下降(P0.05);竹節(jié)參各個(gè)劑量組與西藥組比較,差異不明顯(P0.05)。(3)Western blot法測(cè)BACE-1、Synaptophysin、SynapsinⅠ、PSD-95蛋白在海馬的表達(dá),結(jié)果顯示,模型組與假手術(shù)組比較,BACE-1升高(P0.01),Synaptophysin、SynapsinⅠ、PSD-95均顯著降低(P0.01)。竹節(jié)參治療組與模型組比較,竹節(jié)參中、高劑量組BACE-1明顯降低(P0.01),竹節(jié)參各劑量組的Synaptophysin含量顯著增多(P0.05),竹節(jié)參各劑量組SynapsinⅠ含量顯著升高(P0.01),竹節(jié)參中、高劑量組PSD-95含量顯著增加(P0.01)。竹節(jié)參各劑量組與西藥組比較差異不明顯(P0.05)。(4)IHC法檢測(cè)結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,模型組海馬CA1和CA3區(qū)PSD-95蛋白含量顯著下降(P0.01);竹節(jié)參治療組與模型組比較,竹節(jié)參中、高劑量組的CA1區(qū)和CA3區(qū)PSD-95表達(dá)顯著增加(P0.05);竹節(jié)參高治療組CA1區(qū)與西藥組比較差異不明顯(P0.05);竹節(jié)參中、高治療組CA3區(qū)與西藥組比較差異不明顯(P0.05)。結(jié)論(1)機(jī)體正氣虧虛,諸臟腑功能失調(diào),痰瘀痹阻腦竅,終致髓減腦消,神機(jī)失用,為老年性癡呆的重要致病機(jī)理。(2)竹節(jié)參可改善Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD模型大鼠學(xué)習(xí)與記憶功能。(3)竹節(jié)參可降低Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD模型大鼠腦海馬組織中BACE-1、Aβ_(1-42)的表達(dá),其可能原因?yàn)橥ㄟ^(guò)降低BACE-1的途徑使得Aβ_(1-42)的生成減少或加速其清除,起到神經(jīng)保護(hù)作用。(4)竹節(jié)參可上調(diào)Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD模型大鼠腦海馬組織中突觸蛋白SynapsinⅠ、Synaptophysin及PSD-95蛋白的表達(dá),增強(qiáng)其突觸功能,這可能是竹節(jié)參改善Aβ_(25-35)誘導(dǎo)的AD模型大鼠認(rèn)知功能障礙的機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：湖北民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

APP的切割途徑[39]

a：實(shí)驗(yàn)大鼠第五天的游泳軌跡Figure3-1a:Routemapofratswimmingtrajectoryinthefifthday

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本文編號(hào)：2738359