發(fā)布時(shí)間：2020-03-22 13:11

【摘要】：目的:對(duì)擬水龜屬物種(黃喉擬水龜Mauremys mutica(Cantor)、烏龜M.reevesii(Gray)、黑頸烏龜M.nigricans(Gray)、花龜M.sinensis(Gray))及黃喉擬水龜M.mutica(Cantor)的地方種—廣西擬水龜M.guangxiensis(cen))進(jìn)行鑒別,為擬水龜屬物種鑒別提供科學(xué)依據(jù)。此外選擇烏龜龜甲和廣西擬水龜龜甲分別配以靈芝進(jìn)行有效部位提取工藝、處方工藝、顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等研究,為后期開發(fā)龜靈顆粒保健食品打下基礎(chǔ)。方法:1.對(duì)擬水龜屬物種及廣西擬水龜進(jìn)行鑒別,主要包括文獻(xiàn)考證、來源鑒別、性狀鑒別(觀察比較龜甲顏色、脊棱、盾片、色斑等特征)、顯微鑒別(觀察比較龜甲粉末顏色、骨碎片、角質(zhì)板等特征)以及采用2015年版《中國藥典》一部方法,測(cè)定比較龜甲粉末氨基酸含量。2.采用傳統(tǒng)提取工藝比較烏龜龜甲膠和廣西擬水龜龜甲膠得率;以龜甲膠得率為目標(biāo),采用水提工藝,以提取次數(shù)、提取時(shí)間、用水量為主要影響因素,設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),研究廣西擬水龜龜甲膠最佳提取工藝。優(yōu)化烏龜龜甲膠和廣西擬水龜龜甲膠提取工藝,并進(jìn)行重現(xiàn)性研究。3.以靈芝粗多糖為目標(biāo)提取物,采用水提醇沉工藝,以提取次數(shù)、廣時(shí)間、加水量為主要影響因素,設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),根據(jù)靈芝粗多糖得率,確定靈芝粗多糖最佳提取工藝,并進(jìn)行重現(xiàn)性研究。4.以溶化性為指標(biāo),通過工藝選擇、稀釋劑種類用量、粒度篩選,研究速溶龜甲顆粒處方工藝。在速溶龜甲顆粒處方工藝確定基礎(chǔ)上,通過預(yù)實(shí)驗(yàn),篩選處方稀釋劑和粘合劑,最后進(jìn)行DOE設(shè)計(jì),篩選出龜靈顆粒的處方工藝研究。5.根據(jù)設(shè)計(jì)的處方工藝,分別用烏龜龜甲和廣西擬水龜龜甲進(jìn)行龜靈顆粒保健食品的制備,根據(jù)2015年版《中國藥典》四部通則0104顆粒劑項(xiàng)下要求,進(jìn)行產(chǎn)品性狀、粒度、水分、溶解性檢查,初步建立龜靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:1.通過文獻(xiàn)考證,古書記載的龜甲原動(dòng)物并非僅指烏龜一種,而是以烏龜屬和擬水龜屬為主的多種龜。通過原動(dòng)物來源鑒別,經(jīng)廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院張益峰高級(jí)工程師鑒定,分別為:黃喉擬水龜Mauremys mutica(Cantor)、烏龜M.reevesii(Gray)、黑頸烏龜M.nigricans(Gray)、花龜M.sinensis(Gray)以及黃喉擬水龜M.mutica(Cantor)地方品種的廣西擬水龜M.guangxiensis(cen)的原動(dòng)物。通過性狀鑒別,發(fā)現(xiàn)擬水龜屬物種及廣西擬水龜在眼線、頸部條紋、身體四肢紋路、體色、背甲形狀、腹甲色斑等方面有明顯特征;通過對(duì)擬水龜屬物種及廣西擬水龜背甲、腹甲顏色、背脊數(shù)量、盾片大小、色斑有無等進(jìn)行性狀鑒別,發(fā)現(xiàn)擬水龜屬物種及廣西擬水龜有明顯鑒別特征;通過龜甲粉末顯微鑒別,發(fā)現(xiàn)擬水龜屬物種及廣西擬水龜在于骨碎片、角質(zhì)板、色素點(diǎn)的性狀、大小及顏色等方面有鑒別特征;按2015版中國藥典一部質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),對(duì)烏龜、黃喉擬水龜、花龜、廣西擬水龜?shù)凝敿追勰┻M(jìn)行氨基酸含量測(cè)定,結(jié)果藥典規(guī)定4種氨基酸含量均達(dá)到規(guī)定限度,符合規(guī)定。其中甘氨酸含量比較項(xiàng)下,烏龜廣西擬水龜黃喉擬水龜花龜;丙氨酸含量比較項(xiàng)下,烏龜廣西擬水龜花龜黃喉擬水龜;L-羥脯氨酸含量比較項(xiàng)下,烏龜黃喉擬水龜廣西擬水龜花龜;L-脯氨酸含量比較項(xiàng)下,黃喉擬水龜烏龜廣西擬水龜花龜。2.龜甲膠提取工藝研究結(jié)果表明,在設(shè)計(jì)的正交試驗(yàn)因素中,影響龜甲膠得率的最主要因素為提取時(shí)間,其次為提取次數(shù),最次為提取用水量。龜甲膠最佳提取工藝為:提取4次,每次5小時(shí),用水量為8倍。廣西擬水龜龜甲膠與烏龜龜甲膠得率相比(傳統(tǒng)提取工藝和正交實(shí)驗(yàn)確定工藝),烏龜龜甲膠得率均略高于廣西擬水龜龜甲膠得率。確定的提取工藝重現(xiàn)性好。正交實(shí)驗(yàn)確定工藝與傳統(tǒng)提取工藝相比,大大縮短提取時(shí)間,提高提取效率。3.靈芝粗多糖提取工藝研究結(jié)果表明,在設(shè)計(jì)的正交試驗(yàn)因素中,影響靈芝粗多糖提取得率的最主要因素為提取次數(shù),其次為提取時(shí)間,最次為提取用水量。靈芝粗多糖最優(yōu)提取工藝為:提取3次,每次1.5h,用水量18倍。確定的提取工藝重現(xiàn)性好。4.通過處方工藝研究,凍干工藝及稀釋劑分散制粒工藝均能解決龜甲膠不易溶、人體生物利用度低、服用不方便等問題。其中凍干工藝賦形劑采用5%甘露醇,凍干成型性好,溶解完全;稀釋劑分散制粒工藝,采用處方量龜甲膠的2倍量甘露醇和0.3倍量膠態(tài)二氧化硅分散制粒,顆粒磨粉過80目篩,龜甲顆粒在1分鐘左右溶化完全�？紤]到產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)成本及工藝簡單、可行性,選擇稀釋劑分散制粒工藝速溶龜甲顆粒。在龜甲顆粒溶化性問題解決基礎(chǔ)上,通過處方篩選研究,龜靈顆粒優(yōu)選甘露醇:蔗糖=1:1作為稀釋劑,10%PVP75%乙醇溶液作粘合劑。在預(yù)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,以龜靈顆粒的溶化性、流動(dòng)性、粒度為關(guān)鍵質(zhì)量屬性,進(jìn)行處方空間的DOE設(shè)計(jì),評(píng)估稀釋劑用量、粘合劑用量、硬脂酸鎂用量對(duì)龜靈顆粒關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響,結(jié)果在設(shè)計(jì)的處方空間范圍內(nèi),影響龜靈顆粒綜合質(zhì)量的最主要因素是硬脂酸鎂用量,其次依次是粘合劑用量、稀釋劑用量。稀釋劑用量為36%,粘合劑用量為28%,硬脂酸鎂用量為1%的處方組成最優(yōu)。對(duì)龜靈顆粒溶化性影響最大的因素為硬脂酸鎂用量,其次為粘合劑用量,最小為稀釋劑用量;對(duì)龜靈顆粒流動(dòng)性影響最大的因素為粘合劑用量,其次為硬脂酸鎂用量,最小為稀釋劑用量;對(duì)龜靈顆粒粒度影響最大的因素為粘合劑用量,其次為硬脂酸鎂用量,最小為稀釋劑用量。此外,矯味劑及用量的篩選以選用0.5%阿斯巴甜和0.3%甜橙香精組合物為佳,能較好地掩蓋本品的苦澀味道。5.根據(jù)設(shè)計(jì)的處方工藝,分別用烏龜龜甲膠和廣西擬水龜龜甲膠配以靈芝粗多糖進(jìn)行各3批龜靈顆粒保健食品制備,采用2015年版《中國藥典》四部通則0104顆粒劑項(xiàng)下要求,進(jìn)行性狀、粒度、水分、溶解性檢查,各批樣品質(zhì)量均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。結(jié)論:(1)本研究首次通過對(duì)擬水龜屬的黃喉擬水龜Mauremys mutica(Cantor)、烏龜M.reevesii(Gray)、黑頸烏龜M.nigricans(Gray)、花龜M.sinensis(Gray)以及黃喉擬水龜M.mutica(Cantor)地方品種—廣西擬水龜M.guangxiensis(cen)進(jìn)行文獻(xiàn)考證、來源鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別及理化鑒別研究,建立了擬水龜屬物種鑒別方法,為龜靈顆粒保健食品原料鑒別提供科學(xué)依據(jù);(2)通過廣西擬水龜、烏龜提取工藝及靈芝提取工藝進(jìn)行研究,確定藥材提取工藝,為龜靈顆粒保健食品原料提取提供最佳工藝;(3)通過對(duì)龜甲膠速溶處方工藝摸索、龜靈顆粒處方工藝研究,篩選出龜靈顆粒最優(yōu)化處方工藝;(4)用廣西擬水龜龜甲膠、烏龜龜甲膠分別配以靈芝粗多糖,各制備3批龜靈顆粒,對(duì)顆粒劑進(jìn)行外觀、粒度、水分、溶化性的檢測(cè),初步建立起本品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。本論文研究內(nèi)容經(jīng)科技查新證實(shí),目前尚未見與上述特點(diǎn)相同的文獻(xiàn)報(bào)道。
【圖文】：

烏龜Mauremysreevesii(Gray)

花龜Mauremyssinensis(Gray)
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TS218;R282.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2595086