發(fā)布時(shí)間：2016-11-28 13:20

  本文關(guān)鍵詞：基于EST模型的全氟烷基化合物致心肌發(fā)育毒性作用及其定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《浙江大學(xué)》 2013年

基于EST模型的全氟烷基化合物致心肌發(fā)育毒性作用及其定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究

張瑩瑩  

【摘要】：胚胎干細(xì)胞測(cè)試(embryonic stem cell test. EST)體系以胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell, ES cell)分化為心肌細(xì)胞模型為基礎(chǔ),是歐洲代替方法驗(yàn)證中心(the European Center for the Validation of Alternative Methods, ECVAM)提出的作為體外篩選和評(píng)價(jià)受試物(包括藥物或環(huán)境中化合物等)可能具有的發(fā)育毒性手段。該體系能基本模擬乃至重現(xiàn)體內(nèi)心肌分化和發(fā)育復(fù)雜全程,富含大量心肌發(fā)育依賴性生物信息,與體內(nèi)毒性實(shí)驗(yàn)相比,具有對(duì)藥物作用反應(yīng)迅速、干擾因素少、敏感性高等優(yōu)點(diǎn)。 全氟烷基化合物(Polyfluorinated Alkyl Substances, PFAS)被廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)和人類(lèi)消費(fèi),包括全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane Sulfonate, PFOS),全氟辛酸(Perfluorooctanoic Acid, PFOA),全氟丁基磺酸(Perfluorobutane Sulfonate, PFBS)等。該類(lèi)化合物大量使用致使其以各種途徑進(jìn)入全球范圍內(nèi)各種環(huán)境介質(zhì)如水體、土壤、大氣中,并通過(guò)食物鏈傳遞放大生物效應(yīng),目前在人體以及許多動(dòng)物組織中均發(fā)現(xiàn)濃度較高PFOS和PFOA存在。這類(lèi)化合物在自然環(huán)境和生物體內(nèi)具不分解性和很高的生物積累能力,其所造成的全球性生態(tài)污染已成事實(shí),這是直接關(guān)系到人類(lèi)健康的重要問(wèn)題。已有文獻(xiàn)報(bào)道PFOS具有發(fā)育毒性、生殖毒性、心血管毒性、神經(jīng)毒性等多重毒性效應(yīng),被認(rèn)為是一類(lèi)具有全身多臟器毒性化合物。雖然研究者已經(jīng)掌握了一些關(guān)于PFOS發(fā)育毒理學(xué)研究資料,但還處于初始階段,且多限于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。PFOS引起的發(fā)育毒性作用機(jī)制和敏感指標(biāo)還遠(yuǎn)未完全清楚。氨基酸進(jìn)行穩(wěn)定同位素標(biāo)記(Stable Isotope Labeling with Amino Acidsin Cell Cultures, SILAC)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的比較蛋白組學(xué)新方法,可以對(duì)低豐度蛋白質(zhì)直接捕獲和快速定性、定量鑒定分析,快速找出重要功能蛋白質(zhì)。目前尚未見(jiàn)利用EST系統(tǒng)預(yù)測(cè)全氟烷基化合物對(duì)心肌發(fā)育毒性作用研究報(bào)道,也未見(jiàn)利用SILAC標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究該類(lèi)化合物毒性作用機(jī)制,亟待深入探索加以論證。 基于上述背景,本學(xué)位論文主要利用EST模型從細(xì)胞毒性、分化抑制、基因蛋白表達(dá)不同水平系統(tǒng)論證全氟烷基系列化合物PFOS、PFOA和PFBS心肌發(fā)育毒性作用強(qiáng)弱等級(jí)及構(gòu)效關(guān)系。為進(jìn)一步重點(diǎn)考察PFOS對(duì)心肌發(fā)育毒性作用的具體分子機(jī)制,我們采用SILAC標(biāo)記的蛋白組學(xué)方法定量研究PFOS干預(yù)ES細(xì)胞定向分化心肌細(xì)胞前后差異表達(dá)蛋白圖譜。采用GO分類(lèi)方法探討差異蛋白的細(xì)胞位置、基因參與的生物過(guò)程、發(fā)揮的分子功能,通過(guò)Pathway分析PFOS對(duì)不同通路的影響,通過(guò)Network分析差異基因的網(wǎng)絡(luò)互作關(guān)系,并采用Western Blot法對(duì)差異蛋白予以驗(yàn)證。研究結(jié)果將有利于揭示PFOS引起心肌發(fā)育毒性作用的早期分子事件和毒性敏感指標(biāo)。同時(shí)有利于將EST作為一種有效的毒性評(píng)價(jià)體系在化合物成藥性或環(huán)境毒物對(duì)心肌毒性預(yù)測(cè)性評(píng)估中的推廣應(yīng)用。 目的： 利用EST模型從細(xì)胞毒性、分化抑制、基因蛋白表達(dá)不同水平評(píng)價(jià)全氟烷基化合物PFOS、PFOA和PFBS對(duì)小鼠胚胎干(Mouse Embryonic Stem, mES)細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞的發(fā)育毒性作用,分析該類(lèi)化合物致心肌發(fā)育毒性的構(gòu)效關(guān)系。并利用SILAC標(biāo)記的定量蛋白質(zhì)組學(xué)探討PFOS致心肌發(fā)育毒性作用機(jī)制。 方法： 利用經(jīng)典的懸滴培養(yǎng)法建立EST模型,加入不同濃度的青霉素、DPH、5-FU以及全氟烷基化合物PFOS、PFOA和PFBS,檢測(cè)受試物對(duì)mES定向心肌分化能力的影響獲得產(chǎn)生50%mES細(xì)胞分化抑制作用的濃度ID50D3；采用MTT法檢測(cè)受試物對(duì)ES細(xì)胞和3T3細(xì)胞的細(xì)胞毒性獲得產(chǎn)生50%細(xì)胞毒性作用的濃度IC50D3和IC503T3,經(jīng)發(fā)育毒性計(jì)算公式計(jì)算,并依據(jù)發(fā)育毒性判定標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定受試物的發(fā)育毒性等級(jí),并分析全氟烷基化合物致心肌發(fā)育毒性構(gòu)效關(guān)系。 利用SILAC定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)考察PFOS干預(yù)ES細(xì)胞定向分化心肌細(xì)胞前后差異表達(dá)蛋白圖譜,分別用含輕型穩(wěn)定同位素(天然穩(wěn)定同位素)和重型穩(wěn)定同位素標(biāo)記必需氨基酸的培養(yǎng)基,對(duì)mES分別進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞標(biāo)記完全后(標(biāo)記率90%以上),將經(jīng)過(guò)輕、重型同位素標(biāo)記的兩組細(xì)胞進(jìn)行懸滴、懸浮、貼壁培養(yǎng),設(shè)定輕型同位素標(biāo)記細(xì)胞為溶劑對(duì)照組,重型同位素標(biāo)記細(xì)胞用PFOS處理。化合物處理10天后收集樣本,分別提取蛋白等比例混合后經(jīng)SDS-PAGE分離,酶解提取肽,進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè),通過(guò)質(zhì)譜圖上每對(duì)輕重穩(wěn)定同位素峰比例可反映對(duì)應(yīng)蛋白在PFOS作用后的表達(dá)變化。根據(jù)每個(gè)鑒定蛋白至少包含兩段鑒定多肽,且溶劑對(duì)照組(DMSO)和實(shí)驗(yàn)組(PFOS)差異1.5以上的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)篩選差異蛋白。用Gene Ontology annotations軟件對(duì)差異蛋白進(jìn)行功能分類(lèi),通過(guò)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)分析以及文獻(xiàn)查閱來(lái)確定差異蛋白的功能,揭示PFOS致心肌發(fā)育毒性部分作用靶標(biāo)。 基于蛋白組學(xué)的結(jié)果,選取了活性氧信號(hào)通路以及OCT4甲基化方面與PFOS心肌發(fā)育毒性作用的相關(guān)性進(jìn)行了探討。主要利用Western Blot方法和RT-PCR方法進(jìn)行重要蛋白的驗(yàn)證。通過(guò)DCF-DA檢測(cè)PFOS作用后擬胚體EBs內(nèi)ROS含量。 結(jié)果： 通過(guò)EST模型評(píng)價(jià)了青霉素(Penicillin G)、苯妥英(Phenytoin, DPH、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)心肌發(fā)育毒性,三者IC50D3依次為6981、246和0.36μM, IC503T3分別為6370、240和0.45μM, ID50D3分別為4626、99和0.31μM,心肌發(fā)育毒性等級(jí)分別為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí),結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致,該模型通過(guò)有效性驗(yàn)證,適用于全氟烷基化合物PFBS、PFOA和PFOS心肌發(fā)育毒性評(píng)價(jià)。受試化合物PFBS、PFOA和PFOS的IC50D3依次為4139、470和291μM, IC503T3分別為5980、484和435μM, ID50D3分別為808、223和40μM,心肌發(fā)育毒性等級(jí)分別為一級(jí)、二級(jí)、二級(jí)。三者心肌發(fā)育毒性強(qiáng)弱順序?yàn)镻FOSPFOAPFBS,且具有一定構(gòu)效關(guān)系,即碳鏈越長(zhǎng)心肌發(fā)育毒性越大,末端磺�；�心肌發(fā)育毒性大于未磺�；�。 從形態(tài)上觀察,PFOS作用ES細(xì)胞后,影響擬胚體(embryoid bodies, EBs)形態(tài),濃度越大,EBs半徑越小。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,隨著PFOS濃度增加,中胚層基因Brachury及心肌特異性基因a-MHC表達(dá)下降,且呈濃度依賴性。Western blot方法檢測(cè)結(jié)果顯示,PFOS使心肌特異性轉(zhuǎn)錄因子GATA4、MEF2C呈濃度依賴性表達(dá)下調(diào)。流式細(xì)胞術(shù)定量檢測(cè)PFOS使表達(dá)心肌特異性蛋白a-actinin的心肌細(xì)胞數(shù)量呈濃度依賴性下調(diào)。 SILAC標(biāo)記蛋白質(zhì)組學(xué)分析結(jié)果顯示,PFOS作用后與溶劑對(duì)照組比較,mES分化為心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)圖譜存在明顯差異。共篩選出176個(gè)差異蛋白,PFOS作用后67個(gè)蛋白上調(diào)和109個(gè)蛋白下調(diào)。對(duì)差異蛋白進(jìn)行GO分析顯示,在分子功能方面有13個(gè)分類(lèi),在細(xì)胞定位方面有12個(gè)分類(lèi),在細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程方面有10個(gè)分類(lèi)。將差異蛋白對(duì)應(yīng)基因進(jìn)行KEGG通路分析,共篩選到31個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義的信號(hào)通路,主要涉及參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、脂代謝、能量代謝及酶代謝相關(guān)通路。在網(wǎng)絡(luò)分析圖中,差異蛋白對(duì)應(yīng)基因與基因組中其他基因的相互作用共涉及到118個(gè)蛋白1296個(gè)相互作用,其中與發(fā)育相關(guān)差異基因與其他基因的相互作用涉及32個(gè)蛋白469個(gè)相互作用。 基于上述蛋白組學(xué)結(jié)果,選取了活性氧信號(hào)通路以及OCT4甲基化方面探討相關(guān)毒性作用機(jī)制。對(duì)差異蛋白Dnmt3b、Dnmt3a、SOD2、Hsp27、MYH10及其相關(guān)蛋白進(jìn)行驗(yàn)證,PFOS作用后Dnmt3b、Dnmt3a蛋白表達(dá)呈下調(diào)趨勢(shì),Dnmt3b在第3、5、6d均有明顯下調(diào),而Dnmt3a在第6d明顯下調(diào),而OCT4在第5、6d上調(diào)。PFOS使SOD2、Hsp27上調(diào),SOD在第3、5d上調(diào)明顯,Hsp27的磷酸化形式在全程均成上調(diào)趨勢(shì),致使在心肌分化過(guò)程中ROS減少,導(dǎo)致ERK1/2. p38MAPK磷酸化降低,進(jìn)而使下游GATA4、MEF2C. α-MHC, α-actinin、MYH10表達(dá)下調(diào)。 結(jié)論： 1.基于EST體系測(cè)得PFOS.PFOA. PFBS心肌發(fā)育毒性分別為二級(jí)、二級(jí)、一級(jí),心肌發(fā)育毒性強(qiáng)弱順序?yàn)镻FOSPFOAPFBS,構(gòu)效關(guān)系為碳鏈越長(zhǎng)心肌發(fā)育毒性越大,末端磺�；�心肌發(fā)育毒性大于未磺酰化。 2.通過(guò)SILAC標(biāo)記的定量蛋白組學(xué)構(gòu)建了PFOS對(duì)ES細(xì)胞定向分化為心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)差異表達(dá)圖譜,通過(guò)質(zhì)譜共鑒定出176個(gè)差異蛋白,其中67個(gè)蛋白上調(diào)和109個(gè)蛋白下調(diào)。差異蛋白涉及31個(gè)生化和信號(hào)通路,蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖中共包含118個(gè)蛋白1296個(gè)相互作用。 3. PFOS持續(xù)作用使清除活性氧相關(guān)蛋白SOD2、Hsp27表達(dá)增加,EBs中ROS含量降低,致使p38MAPK通路活化受阻,從而抑制心肌分化。另一方面,PFOS可使DNA甲基轉(zhuǎn)移酶下調(diào),致使OCT4沉默受阻,從而抑制了ES細(xì)胞的分化啟動(dòng)進(jìn)程。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R96
【目錄】：

下載全文 更多同類(lèi)文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購(gòu)買(mǎi)知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王法琦;劉薇;金一和;于文廣;劉曉暉;劉力;;大鼠胚胎期PFOS暴露致出生早期死亡及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育影響的基因組學(xué)分析[J];生態(tài)毒理學(xué)報(bào);2010年02期

2 王英超;黨源;李曉艷;王興龍;;蛋白質(zhì)組學(xué)及其技術(shù)發(fā)展[J];生物技術(shù)通訊;2010年01期

3 曾橋;安世民;潘乾;夏昆;夏家輝;張灼華;孫毅;范國(guó)平;;從人胚胎干細(xì)胞畸胎瘤中有效獲取間充質(zhì)干細(xì)胞和神經(jīng)前體細(xì)胞(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2008年12期

4 趙卿,徐金森;胚胎干細(xì)胞用于藥物及其他化合物篩選的研究進(jìn)展[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2005年01期

5 馮振明;;談環(huán)境毒物對(duì)生物體的危害[J];生物學(xué)教學(xué);2008年01期

6 李瑩,金一和;全氟辛磺酸對(duì)大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)谷氨酸含量的影響[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;2004年04期

7 劉冰,于麒麟,金一和,趙翠霞,王靜,王柯,翟成;全氟辛烷磺酸對(duì)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響[J];毒理學(xué)雜志;2005年S1期

8 于洲;嚴(yán)衛(wèi)星;張連峰;徐海濱;;應(yīng)用胚胎干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?duì)人參皂甙Rb1、Rg1發(fā)育毒性的初步研究[J];毒理學(xué)雜志;2008年03期

9 范軼歐,金一和,麻懿馨,張穎花,張曉芃,齊藤憲光;全氟辛烷磺酸對(duì)雄性大鼠生精功能的影響[J];衛(wèi)生研究;2005年01期

10 于洲;徐海濱;;體外胚胎干細(xì)胞神經(jīng)發(fā)育毒性評(píng)價(jià)模型的建立及有效性研究[J];衛(wèi)生研究;2010年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 章濤;王翠蘋(píng);孫紅文;;環(huán)境中全氟取代化合物的研究進(jìn)展[J];安全與環(huán)境學(xué)報(bào);2008年03期

2 張巍;劉悅萍;李陽(yáng);;蛋白質(zhì)組學(xué)在果實(shí)發(fā)育生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J];北方園藝;2011年19期

3 王芳潔;易豈建;郭鵬飛;;小鼠胚胎干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年09期

4 方雪梅;王建設(shè);戴家銀;;全氟類(lèi)有機(jī)污染物的污染狀況及其生態(tài)毒理研究進(jìn)展[J];地球科學(xué)進(jìn)展;2010年05期

5 田輝;田潔;王玉娥;付少華;楊文祥;孫凡中;樊柏林;盧笑叢;;人參皂甙與淫羊藿苷復(fù)方制劑安全性及抗氧化功能實(shí)驗(yàn)研究[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年03期

6 周慶;張滿成;盧宇飛;王聯(lián)紅;李?lèi)?ài)民;;全氟類(lèi)化合物的檢測(cè)與治理研究進(jìn)展[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2008年07期

7 王偉;楊文鵬;;蛋白質(zhì)組學(xué)及其在玉米遺傳研究中的應(yīng)用[J];貴州農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年08期

8 甄珍;郭英;邊育紅;張艷軍;;胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用研究[J];長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2013年02期

9 李玲;趙康峰;李毅民;白雪濤;;全氟辛烷磺酸和全氟辛酸神經(jīng)毒性機(jī)制研究進(jìn)展[J];環(huán)境衛(wèi)生學(xué)雜志;2013年02期

10 劉薇;金一和;全燮;董光輝;劉冰;王靜;王柯;于棋麟;齊藤憲光;;沈陽(yáng)市降雪中PFOS和PFOA污染現(xiàn)狀調(diào)查[J];環(huán)境科學(xué);2007年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 高昭輝;董書(shū)偉;荔霞;薛慧文;申小云;劉永明;王勝義;劉世祥;齊志明;;基因組學(xué)和蛋白組學(xué)在納米藥物毒理研究中的應(yīng)用[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)牛學(xué)分會(huì)2011年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

2 季宇彬;吳昊;郎朗;;全氟化合物的毒理學(xué)研究進(jìn)展[A];2010中國(guó)環(huán)境科學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集(第四卷)[C];2010年

3 王柯;金一和;于棋麟;劉利;;全氟辛烷磺酸對(duì)小鼠腦組織中谷氨酸含量和蛋白激酶活性的影響[A];持久性有機(jī)污染物論壇2007暨第二屆持久性有機(jī)污染物全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

4 郭文慧;;PFOS毒性研究進(jìn)展[A];2013中國(guó)環(huán)境科學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（第七卷）[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李文臣;髓母細(xì)胞瘤與室管膜瘤患者腦脊液比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2011年

2 陳田;發(fā)育期PFOS暴露的肺損傷效應(yīng)及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年

3 孟艷艷;一氧化氮對(duì)棉花葉片衰老過(guò)程中抗氧化物酶及葉片蛋白質(zhì)組的影響[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

4 鄔靜;大鼠卵巢顆粒細(xì)胞體外生殖毒性評(píng)價(jià)替代模型的建立與應(yīng)用[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 黃桂東;Lactobacillus brevis NCL912的耐酸特性及其酸脅迫下差異表達(dá)蛋白的研究[D];南昌大學(xué);2011年

6 劉薇;部分典型有機(jī)污染物及其主要降解產(chǎn)物的生態(tài)毒理效應(yīng)研究[D];大連理工大學(xué);2008年

7 陳虹;石油烴在土壤上的吸附行為及對(duì)其它有機(jī)污染物吸附的影響[D];大連理工大學(xué);2009年

8 董光輝;全氟辛烷磺酸（PFOS）對(duì)小鼠免疫毒性效應(yīng)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

9 呂剛;藥品包裝材料中全氟辛烷磺酸類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)與安全評(píng)價(jià)技術(shù)[D];天津大學(xué);2009年

10 趙冰海;全氟辛烷磺酸等環(huán)境污染物染毒哺乳期大鼠對(duì)成年期Leydig細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周偉輝;水稻耐熱性生理機(jī)理和耐熱資源的鑒定與篩選[D];浙江大學(xué);2011年

2 于艷艷;全氟十三酸（PFTriDA）對(duì)青鳉魚(yú)的慢性毒性效應(yīng)[D];山東師范大學(xué);2011年

3 郭斐斐;全氟有機(jī)化合物人體負(fù)荷表征技術(shù)與暴露水平研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 李笑;我國(guó)一般人群血清中PFOS和PFOA分布特征及基準(zhǔn)值[D];大連理工大學(xué);2011年

5 納菲沙·卡德?tīng)?維吾爾族婦女宮頸癌特異性早期預(yù)警指標(biāo)的血漿蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

6 付旋;三地人參對(duì)免疫抑制小鼠體液免疫影響的研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 劉建熙;雄黃對(duì)Bcl-2和Bax在原代培養(yǎng)的人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2011年

8 熊華偉;亞硒酸鈉脅迫下斑點(diǎn)叉尾鮰腦組織差異蛋白質(zhì)組研究[D];南昌大學(xué);2011年

9 李興彥;黃芩苷對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞分化成心肌樣細(xì)胞的影響的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

10 王玉;全氟辛烷磺酸（PFOS）和全氟辛酸（PFOA）對(duì)BALB/c小鼠免疫系統(tǒng)毒性效應(yīng)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 賀福初;蛋白質(zhì)組(proteome)研究——后基因組時(shí)代的生力軍[J];科學(xué)通報(bào);1999年02期

2 曾嶸,夏其昌;蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展與趨勢(shì)[J];中國(guó)科學(xué)院院刊;2002年03期

3 周英朋，季耀宗，蔣玉鳳;肺癌患者血清丙二醛及超氧化物歧化酶的研究[J];寧夏醫(yī)學(xué)雜志;1996年01期

4 李偉;;iTRAQ多重化學(xué)標(biāo)記串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在比較蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[J];生命的化學(xué);2006年05期

5 胡存麗;仲來(lái)福;;全氟辛烷磺酸和全氟辛酸毒理學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

6 劉利;金一和;王烈;于紅瑤;劉薇;于棋麟;王柯;劉冰;王靜;;出生前后全氟辛烷磺酸(PFOS)暴露對(duì)大鼠額葉皮質(zhì)中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2 mRNA水平的影響[J];生態(tài)毒理學(xué)報(bào);2009年02期

7 李少群,蔡琬冰,聶木海,梁曉蕓;乳酸脫氫酶同功酶活性測(cè)定應(yīng)用研究[J];職業(yè)醫(yī)學(xué);1996年06期

8 曾秋棠,曹林生,祝武強(qiáng);誘導(dǎo)體外培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞方法的研究[J];中國(guó)病理生理雜志;2001年07期

9 董紅燕,周中新,張中明;內(nèi)皮素-1促進(jìn)兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞[J];中國(guó)病理生理雜志;2004年12期

10 劉欣,楊凌,崔昱;人參皂甙的活性綜述[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2005年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王薛君,張玉敏,李海山,段志文,崔金山;雙酚A對(duì)小鼠生殖和發(fā)育毒性的研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2005年03期

2 歐陽(yáng)雁麗,王瑞淑;Chernoff-Kavlock試驗(yàn)——一種短期體內(nèi)發(fā)育毒性初篩試驗(yàn)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).衛(wèi)生學(xué)分冊(cè);1989年05期

3 張本忠,屈衛(wèi)東,吳德生;鋁鹽在水溶液中的水解和聚合反應(yīng)對(duì)鋁致大鼠發(fā)育毒性的影響[J];環(huán)境與健康雜志;2001年03期

4 裴新榮,李勇,龍鼎新,陳星,高麗芳,陳祥貴;雙酚A對(duì)小鼠早期胚胎發(fā)育毒性的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)生育健康雜志;2003年01期

5 傅娟玲,王越,周宗燦,周宗余;環(huán)磷酰胺、維生素A和珊瑚提取液發(fā)育毒性體內(nèi)篩選試驗(yàn)[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;1992年02期

6 張本忠,吳德生;應(yīng)用WEC技術(shù)通過(guò)時(shí)間效應(yīng)關(guān)系研究氟的發(fā)育毒性[J];中國(guó)地方病防治雜志;1999年03期

7 張本忠,高小玲,吳德生;鋁對(duì)大鼠胚胎生長(zhǎng)發(fā)育毒性的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2002年12期

8 劉珍;張?zhí)鞂?;一個(gè)發(fā)育毒性測(cè)試的高通量方法[J];毒理學(xué)雜志;2007年04期

9 于洲;嚴(yán)衛(wèi)星;張連峰;徐海濱;;胚胎干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ驮诎l(fā)育毒性評(píng)價(jià)中有效性的初步研究[J];衛(wèi)生研究;2008年05期

10 張?zhí)鞂?在發(fā)育毒性研究中母體毒性的意義和評(píng)價(jià)[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;1991年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉臻;施華宏;黃宏;;抗生素對(duì)熱帶爪蟾胚胎的發(fā)育毒性[A];第六屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)大會(huì)暨環(huán)境科學(xué)儀器與分析儀器展覽會(huì)摘要集[C];2011年

2 葉向鋒;劉芷含;張淑敏;王靈芝;王愛(ài)平;魏金鋒;;含銅宮內(nèi)節(jié)育器的發(fā)育毒性評(píng)價(jià)[A];經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式轉(zhuǎn)變與自主創(chuàng)新——第十二屆中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)年會(huì)（第三卷）[C];2010年

3 劉寒;林紅英;聶芳紅;馬驛;巨向紅;宋春雨;蔡吉榛;陳進(jìn)軍;;類(lèi)二噁英多氯聯(lián)苯(PCB126)對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的發(fā)育毒性研究[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國(guó)前列腺藥理毒理學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

4 儲(chǔ)佳華;陸姮磊;沈琳;丁曉蘭;王美瑛;宮麗崑;任進(jìn);;SM934對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性的評(píng)價(jià)[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國(guó)前列腺藥理毒理學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

5 趙磊;徐德祥;;二噁英及其對(duì)人類(lèi)生殖和發(fā)育的影響[A];食品安全的理論與實(shí)踐——安徽食品安全博士科技論壇論文集[C];2005年

6 吳源;李鴻程;凌麗;周群芳;江桂斌;;三種納米銀對(duì)Medaka胚胎與卵黃魚(yú)發(fā)育的毒理學(xué)效應(yīng)研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第26屆學(xué)術(shù)年會(huì)環(huán)境化學(xué)分會(huì)場(chǎng)論文集[C];2008年

7 于洲;徐海濱;;體外胚胎干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷耐晟萍捌鋵?duì)異硫氰酸鹽發(fā)育毒性評(píng)價(jià)應(yīng)用的研究[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第五次全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

8 于洲;徐海濱;;應(yīng)用胚胎干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ腕w系對(duì)異硫氰酸鹽發(fā)育毒性的研究[A];2010年全國(guó)藥物毒理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

9 劉珍;張?zhí)鞂?;一個(gè)發(fā)育毒性測(cè)試的高通量方法[A];2007年全國(guó)藥物毒理學(xué)會(huì)議論文集[C];2007年

10 田逸君;朱江波;畢潔;鄭怡文;馬璽里;朱玉平;張?zhí)鞂?;草苔蟲(chóng)內(nèi)酯對(duì)大鼠發(fā)育毒性的評(píng)價(jià)[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第五次全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 YMG記者 李仁　通訊員 曲華明 孫運(yùn)智;[N];煙臺(tái)日?qǐng)?bào);2010年

2 魏晶晶;[N];中國(guó)人口報(bào);2001年

3 江慧星;[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

4 劉春玲　張虹;[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

5 本報(bào)記者 徐風(fēng);[N];中國(guó)質(zhì)量報(bào);2001年

6 本報(bào)記者 宗建樹(shù);[N];中國(guó)環(huán)境報(bào);2003年

7 中國(guó)疾控中心中毒控制中心研究員 丁茂柏;[N];健康報(bào);2009年

8 劉彩霞;[N];中國(guó)食品報(bào);2010年

9 本報(bào)記者 陳錚;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

10 本報(bào)記者 慕海燕　趙琳;[N];哈爾濱日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張璟;兩種多溴聯(lián)苯醚對(duì)褶皺臂尾輪蟲(chóng)生殖與發(fā)育毒性效應(yīng)及其作用機(jī)制的初步研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

2 王津濤;環(huán)境甲狀腺素干擾物體外作用機(jī)制及發(fā)育毒性研究[D];四川大學(xué);2004年

3 李永進(jìn);PKC-MAPK信號(hào)通路及PARP在長(zhǎng)期接觸低劑量氯化甲基汞所致腦發(fā)育損傷中的作用[D];吉林大學(xué);2006年

4 徐超;幾種內(nèi)分泌干擾物的對(duì)映體選擇性毒性及其降解[D];浙江大學(xué);2008年

5 裴小靜;通乳丹對(duì)哺乳期大鼠子代發(fā)育影響的安全性研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2009年

6 解瑋;某市供水體系有機(jī)提取物內(nèi)分泌干擾活性與鄰苯二甲酸二乙基己酯性激素干擾效應(yīng)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

7 王志萍;二硫化碳對(duì)作業(yè)女工早期妊娠影響及其作用機(jī)理的研究[D];山東大學(xué);2005年

8 張?zhí)N暉;鄰苯二甲酸酯類(lèi)的雄性生殖發(fā)育毒性及健康危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

9 周勝利;沙蠶毒素類(lèi)殺蟲(chóng)劑對(duì)斑馬魚(yú)的發(fā)育和生殖毒性[D];浙江大學(xué);2010年

10 夏雅娟;三氧化二砷雌激素樣效應(yīng)及生殖發(fā)育毒性的研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 錢(qián)麗娟;運(yùn)用熱帶爪蟾（Xenopus tropicalis）胚胎檢測(cè)污染物的發(fā)育毒性[D];華東師范大學(xué);2010年

2 張瑩瑩;基于EST模型的全氟烷基化合物致心肌發(fā)育毒性作用及其定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2013年

3 趙玫;高溫聯(lián)合輻射對(duì)胚胎神經(jīng)發(fā)育毒性及腦熱應(yīng)激蛋白的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

4 何清;建立小鼠胚胎干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀糜赼FGF發(fā)育毒性的評(píng)價(jià)[D];暨南大學(xué);2011年

5 徐忠美;孕期補(bǔ)充鋅減輕鎘引起的小鼠發(fā)育毒性[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

6 朱健;二月桂酸二丁基錫對(duì)雌性大鼠生殖毒性研究[D];吉林大學(xué);2005年

7 朱新萍;氟嗎啉對(duì)非洲爪蟾（Xenopus.laevis）發(fā)育毒性的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

8 王卓;兔著床后全胚胎培養(yǎng)方法和三種納米材料對(duì)小鼠體外發(fā)育毒性的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

9 羅聰;抗癲癇藥妥泰對(duì)大鼠胚胎發(fā)育毒性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2004年

10 孔曉軍;阿司匹林丁香酚酯的致畸致突變研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

  本文關(guān)鍵詞：基于EST模型的全氟烷基化合物致心肌發(fā)育毒性作用及其定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：196803