蔬菜中食源性病毒富集方法研究
發(fā)布時(shí)間:2024-06-04 20:25
蔬菜被諾如病毒和輪狀病毒污染后出現(xiàn)食物中毒的風(fēng)險(xiǎn)高,準(zhǔn)確地檢測蔬菜中兩種食源性病毒對保障食品安全具有重要意義。分離、富集蔬菜中病毒粒子能夠提高檢測的準(zhǔn)確度和靈敏度。該文采用甘氨酸緩沖液洗脫-PEG 6000沉淀富集蔬菜中的諾如病毒和輪狀病毒,對影響分離、富集效果的主要因素(甘氨酸緩沖液pH,PEG 6000的濃度和沉淀時(shí)間)進(jìn)行優(yōu)化,最后采用RT-qPCR檢測病毒。結(jié)果表明:采用pH5.0的甘氨酸緩沖液洗脫,15%PEG6000沉淀洗脫液中的病毒粒子2 h,樣品中病毒回收率最大,諾如病毒回收率為13.35%~20.30%,輪狀病毒回收率為18.08%~20.00%。該研究可為蔬菜中病毒的準(zhǔn)確檢測提供方法學(xué)參考。
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
本文編號:3989132
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圖1不同pH甘氨酸緩沖液洗脫蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果
甘氨酸緩沖液的pH是影響蔬菜中病毒洗脫效果的重要因素之一,本研究固定其他條件,分別考察了在不同pH條件下(pH5.0、pH7.0和pH9.0),甘氨酸緩沖液對蔬菜中NoV和RoV洗脫效果的影響。實(shí)驗(yàn)中,分別用pH5.0、pH7.0和pH9.0的甘氨酸緩沖液洗脫....
圖2不同濃度PEG6000沉淀蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果
PEG6000沉淀時(shí)間也會影響病毒的沉淀效率。為得到合適的沉淀時(shí)間,本研究考察了不同PEG6000沉淀時(shí)長(2h、6h和12h)對NoV和RoV回收率的影響。取不同污染程度(高、中、低3個水平)的蔬菜模擬樣品,利用pH5.0的甘氨酸洗脫緩沖液洗脫模擬樣品上的病毒粒子....
圖3不同沉淀時(shí)間對蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果
在優(yōu)化的前處理?xiàng)l件下,甘氨酸緩沖液洗脫-PEG6000沉淀濃縮法對人工污染的蔬菜樣品(萵苣)中NoV和RoV的平均回收率見表4。2.3重復(fù)性考察
圖1不同pH甘氨酸緩沖液洗脫蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果
甘氨酸緩沖液的pH是影響蔬菜中病毒洗脫效果的重要因素之一,本研究固定其他條件,分別考察了在不同pH條件下(pH5.0、pH7.0和pH9.0),甘氨酸緩沖液對蔬菜中NoV和RoV洗脫效果的影響。實(shí)驗(yàn)中,分別用pH5.0、pH7.0和pH9.0的甘氨酸緩沖液洗脫....
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