目的:巨噬細胞是機體固有免疫反應系統(tǒng)中的重要組成成分之一,而細胞自噬可能會影響巨噬細胞的正常吞噬功能和細胞因子分泌。本研究以J774A.1小鼠巨噬細胞為研究對象,通過體外亞砷酸鈉染毒,觀察和探究無機砷對巨噬細胞自噬—溶酶體途徑及其上游調(diào)控因子TFEB的可能影響。研究方法:1、采用MTS法測定不同濃度無機砷暴露時J774A.1巨噬細胞的增殖活力。2、Western blot免疫印跡法檢測無機砷處理組LC3、p62、LAMP1、LAMP2、Cathepsin B、Cathepsin D、Cathepsin S、Cathepsin L和TFEB的蛋白表達水平。3、J774A.1巨噬細胞進行TFEB免疫熒光染色。4、Real-time PCR法分析Cd80、Cd86、Map1lc3a/b、p62、Lamp1、Lamp2和Tfeb mRNA的表達水平。應用SPSS17.0軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。結果:1、低濃度0.25μM As~Ⅲ對J774A.1巨噬細胞有輕微促增殖作用,0.5-2μM As~Ⅲ對細胞增殖活力無毒性效應,2.5-10μM As~Ⅲ明顯降低細胞的增殖能力(P<0.05)。2...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 主要儀器和試劑
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
    2.2 主要試劑的配置
    2.3 J774A.1巨噬細胞系的培養(yǎng)
    2.4 檢測指標及測定方法
    2.5 統(tǒng)計學分析
3 結果
    3.1 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞增殖活力的影響
    3.2 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞形態(tài)的影響
    3.3 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞協(xié)同刺激因子的影響
    3.4 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞自噬小體形成的影響
        3.4.1 不同濃度無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞LC3蛋白表達的影響·
        3.4.2 無機砷暴露不同時間對J774A.1巨噬細胞LC3蛋白表達的影響·
        3.4.3 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞Map1lc3a/b m RNA表達的影響
    3.5 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞p62/SQSTM1 的影響
        3.5.1 不同濃度無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞p62/SQSTM1 蛋白表達的影響
        3.5.2 無機砷暴露不同時間對J774A.1 巨噬細胞p62/SQSTM1 蛋白表達的影響
        3.5.3 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞Sqstm1 m RNA表達的影響
    3.6 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞溶酶體的影響
        3.6.1 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞溶酶體相關膜蛋白LAMP1 和LAMP2蛋白表達的影響
        3.6.2 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞溶酶體相關膜蛋白Lamp1 和Lamp2b m RNA表達的影響
        3.6.3 無機砷暴露對J774A.1巨噬細胞溶酶體組織蛋白酶蛋白表達的影響
    3.7 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞TFEB的影響
        3.7.1 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞TFEB蛋白表達的影響
        3.7.2 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞Tfeb m RNA表達的影響
        3.7.3 無機砷暴露對J774A.1 巨噬細胞TFEB核定位的影響
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
實踐報告
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3981867