發(fā)布時(shí)間：2024-05-25 06:53

　　目的:巨噬細(xì)胞是機(jī)體固有免疫反應(yīng)系統(tǒng)中的重要組成成分之一,而細(xì)胞自噬可能會(huì)影響巨噬細(xì)胞的正常吞噬功能和細(xì)胞因子分泌。本研究以J774A.1小鼠巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象,通過(guò)體外亞砷酸鈉染毒,觀察和探究無(wú)機(jī)砷對(duì)巨噬細(xì)胞自噬—溶酶體途徑及其上游調(diào)控因子TFEB的可能影響。研究方法:1、采用MTS法測(cè)定不同濃度無(wú)機(jī)砷暴露時(shí)J774A.1巨噬細(xì)胞的增殖活力。2、Western blot免疫印跡法檢測(cè)無(wú)機(jī)砷處理組LC3、p62、LAMP1、LAMP2、Cathepsin B、Cathepsin D、Cathepsin S、Cathepsin L和TFEB的蛋白表達(dá)水平。3、J774A.1巨噬細(xì)胞進(jìn)行TFEB免疫熒光染色。4、Real-time PCR法分析Cd80、Cd86、Map1lc3a/b、p62、Lamp1、Lamp2和Tfeb mRNA的表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1、低濃度0.25μM As~Ⅲ對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞有輕微促增殖作用,0.5-2μM As~Ⅲ對(duì)細(xì)胞增殖活力無(wú)毒性效應(yīng),2.5-10μM As~Ⅲ明顯降低細(xì)胞的增殖能力(P<0.05)。2...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 主要儀器和試劑
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
    2.2 主要試劑的配置
    2.3 J774A.1巨噬細(xì)胞系的培養(yǎng)
    2.4 檢測(cè)指標(biāo)及測(cè)定方法
    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞增殖活力的影響
    3.2 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞形態(tài)的影響
    3.3 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞協(xié)同刺激因子的影響
    3.4 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞自噬小體形成的影響
        3.4.1 不同濃度無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞LC3蛋白表達(dá)的影響·
        3.4.2 無(wú)機(jī)砷暴露不同時(shí)間對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞LC3蛋白表達(dá)的影響·
        3.4.3 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞Map1lc3a/b m RNA表達(dá)的影響
    3.5 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞p62/SQSTM1 的影響
        3.5.1 不同濃度無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞p62/SQSTM1 蛋白表達(dá)的影響
        3.5.2 無(wú)機(jī)砷暴露不同時(shí)間對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞p62/SQSTM1 蛋白表達(dá)的影響
        3.5.3 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞Sqstm1 m RNA表達(dá)的影響
    3.6 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞溶酶體的影響
        3.6.1 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞溶酶體相關(guān)膜蛋白LAMP1 和LAMP2蛋白表達(dá)的影響
        3.6.2 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞溶酶體相關(guān)膜蛋白Lamp1 和Lamp2b m RNA表達(dá)的影響
        3.6.3 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1巨噬細(xì)胞溶酶體組織蛋白酶蛋白表達(dá)的影響
    3.7 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞TFEB的影響
        3.7.1 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞TFEB蛋白表達(dá)的影響
        3.7.2 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞Tfeb m RNA表達(dá)的影響
        3.7.3 無(wú)機(jī)砷暴露對(duì)J774A.1 巨噬細(xì)胞TFEB核定位的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
實(shí)踐報(bào)告
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3981867