基于金屬氧化物納米材料富集水中諾如病毒的檢測方法研究
發(fā)布時(shí)間：2020-12-07 16:53
諾如病毒是一種致病性較強(qiáng)的食源性及水源性病毒,該病毒常通過污染水源引起人群的急性胃腸炎的暴發(fā)。對于諾如病毒的鑒定主要是通過實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR的方法,因?yàn)橹Z如病毒無法通過細(xì)胞和組織培養(yǎng)法在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)水中諾如病毒量較低的時(shí)就無法檢測到。為了克服水體中諾如病毒的富集難題,本論文擬建立以納米金屬氧化物（納米氧化鈦、納米氧化鋯）修飾纖維素濾紙富集水中病毒的方法,通過優(yōu)化有關(guān)具體構(gòu)筑及檢測的參數(shù),最終建立一套能夠快速、高效、簡便、便宜富集檢測的方法,解決水中諾如病毒檢測技術(shù)的問題。1、建立了實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測諾如病毒的方法,對方法的靈敏度、特異性、穩(wěn)定性進(jìn)行了驗(yàn)證,利用臨床標(biāo)本對方法的實(shí)際檢測效果進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。將GII型諾如病毒標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒繪制細(xì)針絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為Y=-3.3661x+46.441,相關(guān)系數(shù)R2值為0.9993,方法的最低檢測濃度為9.1×102copies/μL,三個(gè)濃度批內(nèi)和批間重復(fù)試驗(yàn)CT值的變異系數(shù)均小于2%,該方法具有較高靈敏度,準(zhǔn)確性和重復(fù)性好,可以應(yīng)用于水中諾如病毒富集的檢測。2、通過比較納米二...
【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】：47 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
諾如病毒電鏡圖
圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL） Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕對，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性相結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時(shí)，有明顯的準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃opies/ μL，具有較高的靈敏度。
圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL）過 Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕線，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲為：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性量結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時(shí)，有明顯標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃copies/ μL，具有較高的靈敏度。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2017年天津市環(huán)城某區(qū)食源性疾病病原檢測結(jié)果分析[J]. 孟慶賀,王淑惠,石明英. 河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[2]環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在腦膜炎奈瑟菌檢測中的應(yīng)用[J]. 閆永飛,黃亮,趙麗萍,劉曉娟,丁國濤,胡朝輝. 醫(yī)學(xué)動物防制. 2018(11)
[3]化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法應(yīng)用于乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的效果[J]. 金哲龍,張念軍,王奇. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2018(83)
[4]專家在抗諾如病毒藥物研發(fā)方面取得新進(jìn)展[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2018(85)
[5]諾如病毒的病原特點(diǎn)和感染機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 欒明春,王越,周林. 微量元素與健康研究. 2019(01)
[6]環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速可視化檢測B族鏈球菌的應(yīng)用研究[J]. 王行,汪驊,張立. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(19)
[7]2017年安慶市急性胃腸炎暴發(fā)疫情病原體諾如病毒的鑒定及基因特征分析[J]. 劉敏鴻,金愛武,曹孟嬋,史永林,李賢相,徐四清. 中國病原生物學(xué)雜志. 2018(09)
[8]廣西養(yǎng)殖牡蠣中諾如病毒的污染狀況及風(fēng)險(xiǎn)評估[J]. 呂素玲,譚冬梅,姚雪婷,李秀桂. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(05)
[9]2017年北京市朝陽區(qū)嬰幼兒腹瀉病毒多病原監(jiān)測結(jié)果分析[J]. 焦洋,高艷,齊嘯,張士堯,張玉松,顧琳,張?jiān)?孫靈利. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(18)
[10]聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)系統(tǒng)[J]. 余松林,王喆,沈文杰,張濤,蔣靜,田昀. 計(jì)量學(xué)報(bào). 2018(05)
碩士論文
[1]腹瀉相關(guān)病毒多重檢測技術(shù)的研究[D]. 劉艷.中國疾病預(yù)防控制中心 2011
[2]三種食源性病毒RT-PCR-反向斑點(diǎn)雜交檢測方法的建立[D]. 田甜.江蘇大學(xué) 2010
本文編號：2903585
【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】：47 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
諾如病毒電鏡圖
圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL） Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕對，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性相結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時(shí)，有明顯的準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃opies/ μL，具有較高的靈敏度。
圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL）過 Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕線，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲為：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性量結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時(shí)，有明顯標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃copies/ μL，具有較高的靈敏度。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2017年天津市環(huán)城某區(qū)食源性疾病病原檢測結(jié)果分析[J]. 孟慶賀,王淑惠,石明英. 河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[2]環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在腦膜炎奈瑟菌檢測中的應(yīng)用[J]. 閆永飛,黃亮,趙麗萍,劉曉娟,丁國濤,胡朝輝. 醫(yī)學(xué)動物防制. 2018(11)
[3]化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法應(yīng)用于乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的效果[J]. 金哲龍,張念軍,王奇. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2018(83)
[4]專家在抗諾如病毒藥物研發(fā)方面取得新進(jìn)展[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2018(85)
[5]諾如病毒的病原特點(diǎn)和感染機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 欒明春,王越,周林. 微量元素與健康研究. 2019(01)
[6]環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速可視化檢測B族鏈球菌的應(yīng)用研究[J]. 王行,汪驊,張立. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(19)
[7]2017年安慶市急性胃腸炎暴發(fā)疫情病原體諾如病毒的鑒定及基因特征分析[J]. 劉敏鴻,金愛武,曹孟嬋,史永林,李賢相,徐四清. 中國病原生物學(xué)雜志. 2018(09)
[8]廣西養(yǎng)殖牡蠣中諾如病毒的污染狀況及風(fēng)險(xiǎn)評估[J]. 呂素玲,譚冬梅,姚雪婷,李秀桂. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(05)
[9]2017年北京市朝陽區(qū)嬰幼兒腹瀉病毒多病原監(jiān)測結(jié)果分析[J]. 焦洋,高艷,齊嘯,張士堯,張玉松,顧琳,張?jiān)?孫靈利. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(18)
[10]聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)系統(tǒng)[J]. 余松林,王喆,沈文杰,張濤,蔣靜,田昀. 計(jì)量學(xué)報(bào). 2018(05)
碩士論文
[1]腹瀉相關(guān)病毒多重檢測技術(shù)的研究[D]. 劉艷.中國疾病預(yù)防控制中心 2011
[2]三種食源性病毒RT-PCR-反向斑點(diǎn)雜交檢測方法的建立[D]. 田甜.江蘇大學(xué) 2010
本文編號：2903585
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