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pEGFP/Ang-1轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs視網(wǎng)膜下移植對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管滲漏的影響

發(fā)布時(shí)間:2024-07-05 00:19
  目的 利用畢氏酵母血管生成素1重組質(zhì)粒(pEGFP/Ang-1)轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,將轉(zhuǎn)染后的BMSCs行視網(wǎng)膜下移植,從而確認(rèn)血管緊張素1(Ang-1)轉(zhuǎn)染BMSCs對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用。 方法 選取雄性SD大鼠46只,無菌條件下取出股骨和脛骨,剪去骨骺端,用培養(yǎng)基反復(fù)沖洗骨髓腔分離BMSCs,并結(jié)合反復(fù)貼壁法使其進(jìn)一步純化鑒定。利用畢氏酵母血管生成素1重組質(zhì)粒(pEGFP/Ang-1)轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,將轉(zhuǎn)染后的Ang-1/BMSC視網(wǎng)膜下移植。另選SD大鼠96只,隨機(jī)分為正常大鼠組(CON)、空白對(duì)照糖尿病組(DM1)、糖尿病大鼠+視網(wǎng)膜下移植BMSCs組(DM2)、糖尿病大鼠+視網(wǎng)膜下移植Ang-1/BMSCs組(ANG)。尾靜脈注射鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模后DM2組視網(wǎng)膜下移植BMSCs,ANG組視網(wǎng)膜下移植Ang-1/BMSCs,分別4w、8w、12w處死動(dòng)物。用伊凡思藍(lán)方法檢測(cè)視網(wǎng)膜的滲透量;用免疫組化觀察移植細(xì)胞在視網(wǎng)膜中的分布融合情況,Western blot方法檢測(cè)各組大鼠視網(wǎng)膜Ang-1的表達(dá)情況。 結(jié)果 DM1、D...

【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖13兩組細(xì)胞的Ang-1蛋白Westernb注:1、轉(zhuǎn)染組2、未轉(zhuǎn)染

圖13兩組細(xì)胞的Ang-1蛋白Westernb注:1、轉(zhuǎn)染組2、未轉(zhuǎn)染

1512圖13兩組細(xì)胞的Ang-1蛋白Westernblot表達(dá)注:1、轉(zhuǎn)染組2、未轉(zhuǎn)染二、大鼠一般情況、血糖和體重變化隨著時(shí)間的延長(zhǎng),糖尿病大鼠皮毛稀疏發(fā)黃,伴有不同程度的精神萎靡,飲水量和尿量明顯增加,但體重增長(zhǎng)緩慢,甚至消瘦。視網(wǎng)膜移植Ang-1/BMSCs、BMS....


圖14各組大鼠體重比較

圖14各組大鼠體重比較

二、大鼠一般情況、血糖和體重變化隨著時(shí)間的延長(zhǎng),糖尿病大鼠皮毛稀疏發(fā)黃,伴有不同程度的精神萎靡,飲水量和尿量明顯增加,但體重增長(zhǎng)緩慢,甚至消瘦。視網(wǎng)膜移植Ang-1/BMSCs、BMSCs后體重?zé)o明顯改善(表4,圖14),血糖無變化(表5,圖15)。表4各組大鼠體重....


圖15各組大鼠血糖比較

圖15各組大鼠血糖比較

表5各組大鼠血糖的變化(x±s,mmol/L,n=8)組別4周組8周組12周組CON3.71±0.53.7±0.283.76±0.63DM123.7±3.77*24.80±5.19*25.7±2.36*DM223.3±5.19*△24.9±4....


圖16EB在甲酰胺溶液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖16EB在甲酰胺溶液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖16EB在甲酰胺溶液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線與CON組相比DM1、DM2大鼠視網(wǎng)膜滲透量明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)義(P<0.01)。隨著糖尿病時(shí)間的延長(zhǎng)DM1、DM2組EB滲透量明顯增加,48周、12周分別增加了1.7倍、1.9倍、2.2倍。而ANG較DM1組和DM2EB滲透降低了17.....



本文編號(hào):4000749

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