發(fā)布時(shí)間：2020-12-05 05:02

　　目的:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2質(zhì)粒轉(zhuǎn)入人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞（OCM-1）,研究過氧化氫誘導(dǎo)其表達(dá)后對人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞凋亡的影響,探討pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2自由基誘導(dǎo)特性及其對人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞的殺傷作用。方法:用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤OCM-1細(xì)胞,將轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-Egr1-EGFP細(xì)胞設(shè)為對照組,轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2細(xì)胞設(shè)為實(shí)驗(yàn)組。予以過氧化氫刺激后,熒光顯微鏡觀察兩組細(xì)胞前后熒光表達(dá)變化,MTT法檢測兩組細(xì)胞的增殖狀況,Western免疫印跡法比較對照組和實(shí)驗(yàn)組Omi/HtrA2以及XIAP蛋白的表達(dá)情況,Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)后用流式細(xì)胞儀觀察兩組細(xì)胞凋亡的改變。結(jié)果:過氧化氫誘導(dǎo)后,實(shí)驗(yàn)組、對照組表達(dá)熒光細(xì)胞數(shù)均較誘導(dǎo)前增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖率較對照組下降,Omi/HtrA2基因表達(dá)在蛋白水平較對照組增高53.5%,XIAP蛋白與對照組比較下降31.9%,流式細(xì)胞儀分析顯示,... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
附圖
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：2898925