肝細(xì)胞生長因子的激活對肝星狀細(xì)胞凋亡及Rho表達(dá)的調(diào)控
發(fā)布時間:2024-05-19 11:11
目的:研究肝細(xì)胞生長因子激活物(HGFA)激活肝細(xì)胞生長因子(HGF)后對肝星狀細(xì)胞(HSCs)凋亡的影響及對Rho表達(dá)的調(diào)控,探討HGF被激活后促進(jìn)肝星狀細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。 方法:將SD大鼠原代肝星狀細(xì)胞(HSCs)分為5組,①空白對照組:HSCs單獨(dú)培養(yǎng);②實(shí)驗(yàn)對照組:a.外源性HGF(50ng/ml)干預(yù)HSCsb.外源性HGFA(70ng/ml)干預(yù)HSCs;③實(shí)驗(yàn)組:外源性HGF、HGFA同時干預(yù)HSCs;④HGF抑制劑組:HSCs與c-met受體阻滯劑(500ng/ml)共同作用6小時,更換培養(yǎng)液后加入外源性HGF和HGFA同時干預(yù)HSCs;⑤Rho通路抑制劑組:Rho通路抑制劑Y-27632(10ng/ml)與外源性HGF.HGFA共同干預(yù)HSCs.各組分別培養(yǎng)24h、48h和72h,于倒置相差顯微鏡下動態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化;免疫組化法檢測HSCs中α-平滑肌蛋白(α-SMA)的表達(dá)量;四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測Y-27632對HSCs的最佳干預(yù)濃度;流式細(xì)胞儀Annexin-V-FITC/PI雙染法檢測HSCs凋亡情況;共聚焦顯微鏡細(xì)胞爬片免疫熒光組織化學(xué)染色法...
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中英文對照一覽表
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
本文編號:3978025
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