發(fā)布時間：2020-12-04 19:36

　　目的：建立非接觸式共培養(yǎng)誘導人羊膜間充質干細胞（human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs）分化為人肝樣細胞的培養(yǎng)體系,比較不同誘導體系與hAMSCs誘導前后基因及蛋白表達的差異。方法：采用機械分離和二酶消化法培養(yǎng)hAMSCs,流式細胞儀術和免疫細胞化學鑒定hAMSCs,非接觸式共培養(yǎng)和細胞因子誘導hAMSCs向肝樣細胞分化,細胞形態(tài)學觀察,糖原、油紅染色及免疫細胞化學染色鑒定肝樣細胞,ELISA法檢測白蛋白含量,基因芯片檢測各組細胞基因表達水平異同。結果：第3、4代hAMSCs表達CD44、CD2、CD73、CD166和CD49d,高純度表達波形蛋白,基本不表達CD34和CD45。第4代hAMSCs與正常肝細胞系HL-7702非接觸式共培養(yǎng),HGF和bFGF-2誘導培養(yǎng)hAMSCs,21d后,可見多角形細胞呈非典型的巢狀排列,糖原染色陽性,油紅染色可見較多脂滴存在,與未誘導hAMSCs比較,所誘導肝樣細胞表達HNF-3β明顯增高,而CK-18改變不明顯,共培養(yǎng)誘導組肝樣細胞表達甲胎蛋白增加。hAMSCs和誘導的肝樣細胞,胞漿均表達白蛋白... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略詞對照表
第一部分 共培養(yǎng)hAMSCs向肝樣細胞分化體系建立與基因表達譜分析
    中文摘要
    Abstract
    前言
    材料和方法
    結果
    討論
    結論
    參考文獻
第二部分 硫普羅寧聯(lián)合hAMSCs移植治療急性肝損傷實驗研究
    中文摘要
    Abstract
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
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【參考文獻】：
期刊論文
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[9]肝細胞核因子4α和3β在人主要器官中的表達[J]. 龍云,唐紅,劉聰,何芳,劉麗,趙連三,黃飛駿.  世界華人消化雜志. 2006(25)
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本文編號：2898135