發(fā)布時間：2020-11-17 13:11

　　 目的:探討針對大鼠RhoA基因的RNA干擾技術對HSC-T6 RhoA、Ⅰ型膠原(CollagenⅠ,ColⅠ)、Ⅲ型前膠原(Procollagen typeⅢ,PCⅢ)、透明質酸(Hyaluronic acid ,HA)及層粘連蛋白(Laminin,LN)的影響。 方法:將陰性質粒(HK-A質粒)及大鼠RhoA基因特異性siRNA表達質粒(Rat1質粒、Rat2質粒)轉染至大鼠肝星狀細胞HSC-T6。將細胞分組如下:A組(正常培養(yǎng))、B組(轉染HK-A質粒)、C組(轉染Rat1質粒)、D組(轉染Rat2質粒)。用RT-PCR技術檢測細胞RhoA、ColⅠ、PCⅢmRNA的表達。用ELISA方法檢測培養(yǎng)上清中HA及LN的含量。 結果:Rat1質粒所介導的RNAi技術能有效抑制大鼠肝星狀細胞HSC-T6 RhoA、PCⅢ、ColⅠmRNA表達量及培養(yǎng)上清中HA及LN生成量。與A組相比,C組RhoA、PCⅢmRNA表達量下降(p﹤0.05),ColⅠmRNA、HA及LN表達量也顯著下降(p﹤0.01),五者抑制率分別為43.77%、43.68%、71.00%、59.53%、93.08%。而B組、D組與A組相比,表達量均無統(tǒng)計學差異(p﹥0.05)。 結論:以RhoA為干預點,Rat1質粒所介導的RNAi技術能有效抑制大鼠肝星狀細胞HSC-T6細胞外基質的生成,為體內(nèi)的進一步研究提供了實驗基礎。
【學位單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2007
【中圖分類】：R575.2
【部分圖文】：

生長狀態(tài)差，質粒轉染效率約 30％（見圖 1、圖 2、圖 3、圖 4）。圖 1 普通光學顯微鏡下所見 A 組細胞（正常培養(yǎng)） ×200圖 2 熒光顯微鏡下所見 B 組細胞（轉染 HK-A 質粒） ×200

生長狀態(tài)差，質粒轉染效率約 30％（見圖 1、圖 2、圖 3、圖 4）。圖 1 普通光學顯微鏡下所見 A 組細胞（正常培養(yǎng)） ×200圖 2 熒光顯微鏡下所見 B 組細胞（轉染 HK-A 質粒） ×200

備注：從右至左泳道分Marker （ 從 上 到100bp 、 200bp 、 30400bp、500bp、600A 組、B 組、C 組、樣本。內(nèi)參Ⅰ片段為 17RhoA 片段為 347bp
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 葉寬萍;王少華;孫子林;黃艷;;大鼠PPARγ shRNA慢病毒載體的構建與鑒定[J];江蘇醫(yī)藥;2011年13期

2 李鈳;楊剛毅;李伶;李清明;孟凡萍;唐毅;Guenther Boden;;RNA干擾對脂聯(lián)素在3T3-L1脂肪細胞中表達的影響[J];中國糖尿病雜志;2007年10期

3 易韜;綦小蓉;;骨橋蛋白RNA干擾對人卵巢癌SKOV3細胞作用的研究[J];四川解剖學雜志;2011年02期

4 李莉;洪曉綠;李剛;;MicroRNAs與病毒性肝炎的研究進展[J];熱帶醫(yī)學雜志;2011年07期

5 甄誠;陳亮;穆蕊;鞏偉麗;柏兆方;王芊藝;滿江紅;;利用Oris技術觀察多種因素對人乳腺癌細胞遷移的影響[J];科學技術與工程;2011年17期

6 肖義濤;羅來敏;張睿;;慢病毒介導COX-2基因的shRNA對子宮內(nèi)膜癌侵襲力的影響[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2011年07期

7 李玉紅;宋文濤;廖漢林;畢勇毅;;CYP4F3基因RNA干擾重組慢病毒載體的構建[J];江蘇醫(yī)藥;2011年14期

8 杜寶順;程振國;;PTTG基因對人垂體瘤細胞侵襲能力的影響[J];科技信息;2011年15期

9 崔勇;陳靜;王君玉;王麒;胡國漢;駱純;盧亦成;;AKT2基因短發(fā)夾結構RNA慢病毒載體的構建及鑒定[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年08期

10 張娜;錢悅;馮愛平;;RNA干擾分子機制的研究進展及其在黑素瘤中的應用[J];醫(yī)學綜述;2011年10期

相關博士學位論文 前10條

1 李恭會;shRNA阻抑前列腺癌細胞雄激素受體和hTERT基因表達的研究[D];浙江大學;2005年

2 魏軍民;RNA干擾逆轉腫瘤多藥耐藥的實驗研究[D];山東大學;2005年

3 王曉龍;小鼠骨骼肌細胞SelW基因的RNA干擾研究[D];東北林業(yè)大學;2006年

4 王靜;轉化生長因子-β1基因沉默對人涎腺粘液表皮樣癌Ms細胞生物學行為的影響[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

5 張守峰;狂犬病病毒的RNA干擾研究[D];吉林大學;2007年

6 王鵬雁;口蹄疫病毒干擾RNA轉基因小鼠模型的構建[D];石河子大學;2008年

7 譚兵;RNA干擾在體外、體內(nèi)抑制TNF-α表達的實驗研究[D];廣州醫(yī)學院;2008年

8 倪勤;shRNA表達框的快速制備及其在抗HBV相關研究中的應用[D];浙江大學;2004年

9 楊捷琳;腺樣囊性癌高低轉移細胞株基因表達差異性及B7-1、XAGE-1b與轉移相關性研究[D];復旦大學;2005年

10 李朝陽;RNA干擾下調cyclin T1蛋白的表達及其對靶細胞和HIV-1的影響[D];武漢大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 黃偉素;水稻穗頸伸長基因EU12的功能驗證[D];浙江大學;2006年

2 賈勇圣;紅霉素抑制成神經(jīng)細胞瘤增殖機制的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2008年

3 姚津劍;針對P基因的siRNA對HBV表達影響的實驗研究[D];華中科技大學;2007年

4 李濤;抑制乳腺癌耐藥蛋白表達逆轉肝細胞癌多藥耐藥[D];重慶醫(yī)科大學;2009年

5 馬耀華;馬鈴薯PTOM1基因全長cDNA的克隆及其RNAi轉基因植株的構建[D];廣西大學;2004年

6 王維鋒;腺病毒介導的siRNA抑制hTERT增強肝癌化療敏感性的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2004年

7 呂青;RNA干擾抑制腫瘤細胞血管內(nèi)皮生長因子的表達[D];北京中醫(yī)藥大學;2005年

8 楊德華;端粒酶亞單位的siRNA對肝癌的作用[D];華南師范大學;2005年

9 張勇;CLC3基因siRNA表達載體構建及對轉染的胃癌細胞的增殖抑制作用[D];第四軍醫(yī)大學;2005年

10 涂宏鋼;應用RNA干擾技術對新生隱球菌CNLAC1基因功能的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學;2005年

本文編號：2887532