發(fā)布時(shí)間：2018-12-12 16:49

【摘要】：目的探討腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)對(duì)小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(SMC)鈣離子濃度及α-平滑肌激動(dòng)蛋白(α-SMA)的影響及其相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制。方法 Western blotting法檢測(cè)BDNF基因敲除(BDNF~(+/-))小鼠與正常野生型(BDNF~(+/+))小鼠α-SMA表達(dá)水平的差異。培養(yǎng)原代小鼠結(jié)腸SMC,免疫熒光法檢測(cè)SMC中酪氨酸激酶B(Trk B)受體的表達(dá)。同時(shí)以BDNF、TrkB受體阻滯劑(K252a)干預(yù)SMC,Western blotting法檢測(cè)α-SMA和Trk BPLC-Ca~(2+)信號(hào)通路蛋白表達(dá)水平的變化,鈣離子成像法檢測(cè)SMC內(nèi)鈣離子濃度的變化。結(jié)果與BDNF+/+小鼠相比,BDNF~(+/-)小鼠結(jié)腸α-SMA表達(dá)水平明顯降低。SMC表達(dá)Trk B受體,在BDNF作用下,SMC中α-SMA、Trk B-PLC-Ca~(2+)信號(hào)通路蛋白表達(dá)量和細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度增加,且加入K252a可阻斷以上變化。結(jié)論 BDNF可能通過Trk B-PLC-Ca~(2+)信號(hào)通路作用于SMC,影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度及α-SMA的表達(dá)水平,進(jìn)而影響腸道動(dòng)力。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) on the calcium concentration of (SMC) and 偽 -smooth muscle activin (偽 -SMA) in colonic smooth muscle cells of mice and its related regulatory mechanisms. Methods the expression of 偽-SMA in BDNF knockout (BDNF~ (/ -) mice and normal wild type (BDNF~ (/) mice was detected by Western blotting method. The expression of tyrosine kinase B (Trk B) receptor in primary mouse colon was detected by SMC, immunofluorescence assay. At the same time, BDNF,TrkB receptor blocker (K252a) was used to detect the expression of 偽 SMA and Trk BPLC-Ca~ (2) signaling pathway protein by SMC,Western blotting method, and calcium imaging was used to detect the change of Ca 2 + concentration in SMC. Results compared with BDNF / mice, the expression of 偽-SMA in colon of BDNF~ (/ -) mice was significantly lower than that of BDNF / mice. SMC expressed Trk B receptor, and 偽-SMA, in SMC was induced by BDNF. Trk B-PLC-Ca2 signaling pathway protein expression and intracellular calcium concentration increased, and K252a could block these changes. Conclusion BDNF may affect the intracellular Ca ~ (2 +) concentration and 偽-SMA expression through Trk B-PLC-Ca2 signaling pathway, and then affect intestinal motility.
【作者單位】： 山東大學(xué)齊魯醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81170352)
【分類號(hào)】：R574

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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