發(fā)布時間：2018-02-26 04:23

  本文關(guān)鍵詞： Raf激酶抑制蛋白(RKIP) 胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK) 絲裂原活化蛋白激酶(MAPK) 增殖 膠原蛋白 肝纖維化　出處：《細胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在LX-2人肝星狀細胞增殖中作用。方法將RKIP小干擾RNA(siRNA-RKIP)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至LX-2細胞,培養(yǎng)5 d,并篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞。MTT法檢測沉默RKIP后LX-2細胞的增殖情況;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡、細胞周期;實時定量PCR檢測α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和1型膠原蛋白(Col1)mRNA的表達。Western blot法檢測RKIP、α-SMA、Col1及胞外信號調(diào)節(jié)激酶/絲裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信號通路相關(guān)蛋白的表達水平。結(jié)果與空白對照組相比,RKIP低表達明顯誘導(dǎo)LX-2細胞增殖,抑制細胞凋亡,增加G2期細胞比例,提高Col1、α-SMA mRNA和蛋白表達。此外,RKIP的沉默明顯提高ERK/MAPK磷酸化水平。結(jié)論敲低RKIP的水平促進LX-2細胞的增殖,其機制與激活ERK/MAPK信號通路有關(guān)。
[Abstract]:Objective to study the role of Raf kinase inhibitor protein (RKIP) in the proliferation of LX-2 human hepatic stellate cells. Methods the recombinant plasmid of RKIP small interfering RNA-siRNA-RKIPs was transfected into LX-2 cells for 5 days, and the stable transfected cells were screened out to detect the proliferation of LX-2 cells after RKIP silencing. Apoptosis and cell cycle were detected by flow cytometry. Real-time quantitative PCR was used to detect the expression of 偽 -smooth muscle actin (偽 -SMA-1) and collagen type 1 (Collagen 1) mRNA. Western blot was used to detect the expression of RKIP, 偽 -SMA-Col1 and extracellular signal-regulated kinase / mitogen-activated protein kinase (ERK / MAPK) signal pathway related proteins. Compared with the control group, the low expression of RKIP induced the proliferation of LX-2 cells. Inhibition of apoptosis, increased proportion of G2 phase cells, increased expression of Col1, 偽 -SMA mRNA and protein. In addition, silencing of RKIP significantly increased the level of ERK/MAPK phosphorylation. Conclusion knockdown of RKIP can promote the proliferation of LX-2 cells, and its mechanism is related to the activation of ERK/MAPK signaling pathway.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81260505,81473431) 廣西自然科學(xué)基金(2014GXNSFAA118155,2014GXNSFAA118154)
【分類號】：R575.2

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本文編號：1536508