發(fā)布時(shí)間：2021-03-12 13:35

  目的：探討卡介菌純蛋白衍生物玻璃體腔注射建立Eales病動(dòng)物模型。 方法：1、分組及致敏方法：將成年雄性SD大鼠(N=75)隨機(jī)分成五組。實(shí)驗(yàn)Ⅰ組(n=15)：用濃度為1mg/ml的HS-Agp35+等量FICA(弗式不完全佐劑)O.1ml大鼠一側(cè)后足墊皮內(nèi)注射,另一側(cè)注射0.1mlBCG-PPD5U+FICA,14天后玻璃體腔注射BCG-PPD5U;實(shí)驗(yàn)Ⅱ組(n=15)：用濃度為lmg/ml的HS-Agp35+等量FICA(弗式不完全佐劑)0.2ml大鼠一側(cè)后足墊皮內(nèi)注射,14天后玻璃體腔注射BCG-PPD5U;實(shí)驗(yàn)Ⅲ(n=15)、Ⅳ(n=15)及V組(n=15)致敏方法同實(shí)驗(yàn)Ⅰ組；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組14天后玻璃體腔注射HS-Agp3510Ug;實(shí)驗(yàn)Ⅳ組14天后玻璃體腔不打藥；實(shí)驗(yàn)V組(對(duì)照組)14天后玻璃體腔注入0.9%NS0.1ml。2、觀察指標(biāo)：大鼠眼部常規(guī)檢查、熒光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography,FFA)、視網(wǎng)膜鋪片、HE染色病理切片、免疫組化檢測(cè)視網(wǎng)膜VEGF、PDGF,監(jiān)測(cè)血液中輔助T淋巴因子(IFN-γ,TNF-α, IL-4),并作相關(guān)性分析。 結(jié)果：1、眼部常規(guī)檢查：(1).實(shí)驗(yàn)Ⅲ組的葡萄膜炎反應(yīng)明顯；(2).實(shí)驗(yàn)Ⅰ組、實(shí)驗(yàn)Ⅱ組3個(gè)月后個(gè)別大鼠虹膜表面發(fā)現(xiàn)新生血管；(3).實(shí)驗(yàn)Ⅳ組、V組(對(duì)照組)未能發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性體征。2、FFA：(1).實(shí)驗(yàn)Ⅰ組、實(shí)驗(yàn)Ⅱ組可產(chǎn)生以視網(wǎng)膜血管病變?yōu)橹鞯难蹆?nèi)炎癥反應(yīng)；(2).實(shí)驗(yàn)Ⅲ組可產(chǎn)生以脈絡(luò)膜病變?yōu)橹鞯难蹆?nèi)炎癥反應(yīng)；(3).實(shí)驗(yàn)Ⅳ組、Ⅴ組(對(duì)照組)未能發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性體征。3、視網(wǎng)膜鋪片：(1).實(shí)驗(yàn)Ⅰ組、實(shí)驗(yàn)Ⅱ組可產(chǎn)生以視網(wǎng)膜血管病變?yōu)橹鞯难蹆?nèi)炎癥反應(yīng),但形態(tài)上無(wú)法區(qū)分兩組別的血管炎程度；(2).實(shí)驗(yàn)Ⅲ組可產(chǎn)生以脈絡(luò)膜病變?yōu)橹鞯难蹆?nèi)炎癥反應(yīng),但炎癥可累及視網(wǎng)膜血管；(3).實(shí)驗(yàn)Ⅳ組、Ⅴ組(對(duì)照組)未能發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性體征。4、免疫組化：(1).VEGF抗體：陽(yáng)性面積實(shí)驗(yàn)Ⅰ組實(shí)驗(yàn)Ⅱ組實(shí)驗(yàn)Ⅲ組；(2).PDGF抗體：實(shí)驗(yàn)Ⅰ組有陽(yáng)性結(jié)果,實(shí)驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、均未得到陽(yáng)性結(jié)果。5、病理切片：見(jiàn)視網(wǎng)膜增厚、皺褶、結(jié)構(gòu)紊亂,視網(wǎng)膜血管擴(kuò)張、充血,Ⅰ、Ⅱ組鼠內(nèi)界膜不規(guī)整,有少量的血管內(nèi)皮細(xì)胞核突破內(nèi)界膜,并且內(nèi)界膜下的細(xì)胞增殖,排列紊亂,Ⅰ組偶見(jiàn)視網(wǎng)膜表面或視網(wǎng)膜前新生血管芽,Ⅲ組可見(jiàn)內(nèi)界膜下細(xì)胞排列稍不規(guī)則。6、血液中輔助T淋巴因子(IFN-γ,TNF-α,IL-4):(1).IFN-γ在模型鼠血清中的濃度含量和正常對(duì)照組鼠的濃度含量分別為(385.16±19.72)(200.38±15.84);TNF-α分別為(25.75±2.04)(12.14±1.16)；IL-4分別為(13.18±0.34)(11.56±0.36)；模型鼠組血清中IFN-γ, TNF-α, IL-4濃度高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(2).Thl和Th2代表因子的比值IFN-Y/IL-4在模型鼠組和正常對(duì)照組的比值分別為(29.20±1.29)(17.35±1.35),模型組高于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論：1.用單一HS-Agp35抗原、HS-Agp35抗原聯(lián)合BCG-PPD大鼠足墊皮內(nèi)致敏后,玻璃體腔注射BCG-PPD可產(chǎn)生視網(wǎng)膜血管炎癥；且聯(lián)合致敏組的視網(wǎng)膜血管炎的模型與人類Eales病更接近； 2.聯(lián)合致敏Eales病制模過(guò)程中BCG-PPD起主導(dǎo)作用； 3.通過(guò)向致敏大鼠玻璃體腔注射BCG-PPD誘導(dǎo)的Eales病模型,T淋巴細(xì)胞亞群的失平衡可能參與了Eales病的免疫機(jī)制；



本文編號(hào)：2387013