發(fā)布時(shí)間：2024-06-07 04:15

　　研究背景與目的下腰痛(Low back pain,LBP)極其常見(jiàn),致殘率高,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。每年因LBP產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)花費(fèi)巨大,給家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。目前認(rèn)為,LBP的首要病因是椎間盤(pán)退變(Intervertebral disc degeneration,IDD)。IDD主要表現(xiàn)為椎間盤(pán)含水量的降低及椎間隙狹窄。椎間盤(pán)的含水量主要由聚蛋白多糖決定,而聚蛋白多糖分子的保水能力則主要依賴(lài)于其側(cè)鏈上的硫酸軟骨素(Chondroitin sulfate,CS)。CS主要由硫酸軟骨素合成酶(Chondroitin synthase,CHSY)催化合成,然而CHSY在IDD中的作用還未闡明。我們的前期結(jié)果顯示,人發(fā)生退變的椎間盤(pán)內(nèi)Chsy3的表達(dá)量顯著下降,并隨著Pfirrmann退變分級(jí)的遞增其表達(dá)量遞減。由于IDD的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,目前缺乏能有效緩解或逆轉(zhuǎn)IDD的治療方法。因此,動(dòng)物模型對(duì)深入研究IDD的機(jī)制及探索新的治療方法極其重要。然而,國(guó)際上缺乏公認(rèn)有效,且能夠可控,并模擬正常退變進(jìn)程的IDD動(dòng)物模型。隨著CRISPR-Cas9技術(shù)和半克隆技術(shù)的出現(xiàn)及優(yōu)化,基因敲除小鼠的構(gòu)建變得...

【文章頁(yè)數(shù)】：122 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1人椎間盤(pán)退變時(shí)，CHSY3的表達(dá)降低（A）椎間盤(pán)退變的Pfirrmann分級(jí)。（B）椎間盤(pán)退變時(shí)硫酸軟骨素相關(guān)酶的表達(dá)變化。（C）CHSY3的表達(dá)量隨Pfirrmann分級(jí)的遞增而遞減。（t檢驗(yàn)，P值＜0.05，*；P值＜0.01，**）。Figure....

圖1-2Chsy3基因sgRNA的設(shè)計(jì)的3個(gè)堿基代表PAM序列（5'-AGG-3'），而藍(lán)色的20個(gè)堿基則代表ChsyRNA序列。Figure1-2DesignofChsy3sgRNAeredbasesrepresentPAMsequ....

圖1-1Chsy3基因結(jié)構(gòu)示意圖Figure1-1SchematicdiagramofgeneticstructureofChsy3hsy3基因的CRISPR-Cas9敲除質(zhì)粒的構(gòu)建為了達(dá)到最佳的基因敲除效果，我們選擇小鼠Chsy3基因的1號(hào)外....

圖1-3pX330-mCherry-Chsy3-sgRNA質(zhì)粒示意圖Figure1-3SchematicdiagramofpX330-mCherry-Chsy3-sgRNAplasmid

本文編號(hào)：3990765