發(fā)布時(shí)間：2024-07-05 03:54

　　目的:研究組成黃原膠的單糖組分對(duì)細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)體外擴(kuò)增的影響。方法:采用正交實(shí)驗(yàn)確定最優(yōu)的單糖組合和添加劑量,并在無血清培養(yǎng)體系中采用細(xì)胞培養(yǎng)袋靜態(tài)培養(yǎng)驗(yàn)證所獲得的最優(yōu)單糖組合對(duì)CIK細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)物中各類效應(yīng)細(xì)胞的比例以及效應(yīng)細(xì)胞中表達(dá)顆粒酶B和穿孔素的細(xì)胞比例;采用CCK-8法檢測(cè)CIK細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果:采用添加2.20 mmol/L甘露糖和0.10 mmol/L葡萄糖醛酸的無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)單個(gè)核細(xì)胞時(shí),第14天的總細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)為29.38±5.20,顯著高于對(duì)照組的18.36±4.03(P<0.05),且效應(yīng)細(xì)胞CD3⁺、CD3⁺CD56⁺、CD3⁺CD8⁺細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)以及CIK細(xì)胞中表達(dá)顆粒酶B和穿孔素的細(xì)胞比例均顯著增加(P<0.05),同時(shí)擴(kuò)增后CIK細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞的殺傷活性從(17.93±2.65)%增至(29.03±4.34)%(P<0.05)。結(jié)論:甘露糖和葡萄糖醛酸的組合應(yīng)...

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【部分圖文】：

圖1三因子四水平正交實(shí)驗(yàn)的均值主效應(yīng)圖(n=3)Fig．1Maineffectmapofmeanofthree-factorfour-level

軟件選取L16(45)安排實(shí)驗(yàn)，不考慮交互作用，總共設(shè)計(jì)16個(gè)正交實(shí)驗(yàn)組，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。對(duì)16組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行直觀分析，結(jié)果如表2和圖1所示。首先將表2中3次實(shí)驗(yàn)中第14天的總細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)X1～X3求和得到Y(jié)值，進(jìn)一步求出各因子對(duì)應(yīng)于不同水平的Y值的平均值，即K1～K4，從....

圖2三因子三水平正交實(shí)驗(yàn)的均值主效應(yīng)圖(n=3)Fig．2Maineffectmapofmeanofthree-factorthree-level

養(yǎng)14d后的總細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)的直觀分析Tab．5Visualanalysisofexpansionfoldoftotalcellsfor14dcellcultureinthree-factorthree-levelorthog-onaltestGroupsABCExpansionf....

圖3甘露糖和葡萄糖醛酸組合應(yīng)用對(duì)總細(xì)胞擴(kuò)增的影響Fig．3Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-

ectmapofmeanofthree-factorthree-levelorthogonaltest(n=3)無血清培養(yǎng)基作為空白對(duì)照組，將新鮮分離的PBMCs以1×106cells/ml的細(xì)胞密度接種于裝有20ml添加甘露糖和葡萄糖醛酸的無血清培養(yǎng)基的T75方瓶中，并按1.2....

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應(yīng)用對(duì)各類效應(yīng)細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)的影響(n=3)

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應(yīng)用對(duì)各類效應(yīng)細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)的影響(n=3)Fig．4Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-curonicacidonexpansionfoldofeffectorcells(n=3)Note:Compare....

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