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泌尿生殖道沙眼衣原體感染的分子流行病學(xué)研究及實驗室診斷

發(fā)布時間:2024-06-24 20:13
  泌尿生殖道沙眼衣原體(Ct)感染的臨床癥狀輕微,但可引起嚴重的合并癥,如異位妊娠和不育癥等。因而,敏感、快速的實驗室診斷方法,對于早期診斷和及早治療衣原體感染是至關(guān)重要的。Ct的血清分型方法費時、昂貴,現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)為敏感、快速地分型鑒定Ct,研究其基因變異情況提供了有力工具。本論文應(yīng)用細胞培養(yǎng)法、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)和基因克隆等技術(shù),對泌尿生殖道Ct感染的檢測和基因分型做了一系列研究。 1.為了適用于檢測大量標本,建立了微量細胞培養(yǎng)法。用96孔平底細胞培養(yǎng)板代替?zhèn)鹘y(tǒng)的玻璃瓶,具有敏感、快速、方便、經(jīng)濟的特點。用微量細胞培養(yǎng)法對南京地區(qū)683例性病門診病人,107例非淋菌性尿道炎患者和176名性罪錯婦女進行了Ct的檢測。這三組人群的Ct感染率分別為7.9%、24.3%和21.6%。并對部分衣原體培養(yǎng)陽性病人做了臨床分析。 2.為了簡化PCR操作中的標本處理程序,摸索出一種用稀堿溶液快速處理尿道、宮頸拭子標本的方法。只需加入低濃度NaOH溶液于標本中,離心、加熱兩個步驟,15分鐘處理1份標本,獲得了與非離子去污劑和蛋白酶K相似的處理...

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1.FXX/TA質(zhì)粒的圖譜

圖1.FXX/TA質(zhì)粒的圖譜

用PCR擴增pSI得到的片段與用EocRI酶切重組質(zhì)粒得到的片11)。將此重組質(zhì)粒pSI用BamHI酶切線性化后,回收純0.22,0D280=0.125,DNA含量為0.55卜gm/1,分子數(shù)約為1.稀釋擴增試驗結(jié)果為,PCR可檢出5個拷貝的IS(見照片12)


圖4.B組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖

圖4.B組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖


圖5.C組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖

圖5.C組血清型Ahil、Mspl酶切帶型的模式圖



本文編號:3995715

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