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MicroRNA-218和MicroRNA-346在前列腺癌組織與血清中表達(dá)的相關(guān)性研究

發(fā)布時(shí)間:2024-07-04 23:28
  目的: 通過(guò)檢測(cè)前列腺癌患者組織與血清中microRNA-218與microRNA-346的表達(dá)情況,探討microRNA-218與microRNA-346在前列腺癌組織與血清中表達(dá)的相關(guān)性,在前列腺癌診斷、進(jìn)展與預(yù)后中作為生物標(biāo)志物的價(jià)值。 方法: 收集20例首次診斷為前列腺癌患者(Prostate cancer, PCa)的組織與相應(yīng)術(shù)前血清,20例前列腺增生患者(Henign prostatic hyperplasia, BPH)組織與相應(yīng)術(shù)前血清,20例激素依賴(lài)性前列腺癌患者(Androgen-dependent prostate cancer, ADPC,經(jīng)內(nèi)分泌治療效果明顯且無(wú)進(jìn)展)血清,20例激素難治性前列腺癌患者(Hormone-refractoryprostate cancer, HRPC)血清。臨床資料通過(guò)回顧分析病人住院期間病歷資料獲得。采用實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)組織與血清中microRNA-218與microRNA-346的表達(dá)情況,分析其在前列腺組織與血清中表達(dá)的相關(guān)性,與臨床、病理特性及前列腺癌進(jìn)展的相關(guān)性。 結(jié)果: 前列腺增生與前列腺癌患者比較,其前列腺組織、...

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1采血流程圖

圖1采血流程圖

1.2.2血清標(biāo)本的采集及儲(chǔ)存清晨空腹抽取靜脈全血3ml(不加抗凝劑),取血后,在37℃下使血液凝固不低于30min,不超過(guò)1h,當(dāng)血清自然析出后4h內(nèi)進(jìn)行兩部離心法獲取血清,如圖1所示。圖1采血流程圖1.3主要試劑及耗材1)Trizol試劑:invitrogen;TRI....


圖2microRNART原理圖

圖2microRNART原理圖

圖2microRNART原理圖2.4實(shí)時(shí)熒光定量PCR每個(gè)PCR反應(yīng)體系為20ul,反應(yīng)原理如圖3。加樣時(shí)各反應(yīng)體系多加12.5%以避免移液時(shí)的丟失。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果以Ct值形式得到,所有的樣本同時(shí)對(duì)microRNA-218、microRNA-346和U6進(jìn)行擴(kuò)增,....


圖3熒光染料嵌合法(SYBRGreenⅡ)方法機(jī)理示意圖

圖3熒光染料嵌合法(SYBRGreenⅡ)方法機(jī)理示意圖

圖2microRNART原理圖2.4實(shí)時(shí)熒光定量PCR每個(gè)PCR反應(yīng)體系為20ul,反應(yīng)原理如圖3。加樣時(shí)各反應(yīng)體系多加12.5%以避免移液時(shí)的丟失。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果以Ct值形式得到,所有的樣本同時(shí)對(duì)microRNA-218、microRNA-346和U6進(jìn)行擴(kuò)增,....


圖5組織microRNA-218的QRT-PCR檢測(cè)情況

圖5組織microRNA-218的QRT-PCR檢測(cè)情況

2>0.980;斜率(slope)反應(yīng)擴(kuò)增效率(Eff),Eff在90%-105%之間;溶解曲線(xiàn)均僅出現(xiàn)單峰;重復(fù)反應(yīng)一致性高。如圖5-8示。結(jié)果表明microRNAs在人體分離的血清中也同在組織中一樣穩(wěn)定并表達(dá)。圖5組織microRNA-218的QRT-PCR檢測(cè)情況a:m....



本文編號(hào):4000689

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