BMSCs經(jīng)腎動脈移植修復(fù)小鼠輸尿管損傷的方法學(xué)研究
發(fā)布時間:2024-06-05 00:45
輸尿管梗阻是泌尿外科常見病,對于輸尿管梗阻導(dǎo)致的腎損傷而言,首要的是解除輸尿管梗阻,其中最為關(guān)鍵的是解除梗阻后的輸尿管能否再通,即損傷的輸尿管能否達(dá)到良好的修復(fù)。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是目前廣泛關(guān)注的一種成體干細(xì)胞,現(xiàn)已應(yīng)用于多種疾病的治療研究中,MSCs組織來源多樣,其中最常見的為骨髓來源,即骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)。 目的:從方法學(xué)上研究BMSCs對輸尿管損傷的修復(fù)作用。 方法:首先利用顯微血管夾建立BALB/c小鼠的左側(cè)輸尿管梗阻模型,并于10天后取出顯微血管夾解除左側(cè)輸尿管梗阻,然后將這些實驗小鼠隨機分為實驗組及對照組;實驗組小鼠取出顯微血管夾后立即經(jīng)腎動脈移植綠色熒光蛋白(green fluorescent protein, GFP)與熒光素酶(luciferase, Luc)雙報告基因轉(zhuǎn)染的BALB/c小鼠BMSCs;對照組小鼠取出顯微血管夾后隨即關(guān)閉切口,不移植BMSCs。接著使用小動物活體成像系統(tǒng)(in vivo imaging system,...
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
英文縮略詞表
1 前言
2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代
2.1 引言
2.2 主要試劑與設(shè)備
2.2.1 主要實驗試劑
2.2.2 材料和儀器
2.2.3 相關(guān)實驗試劑配置
2.3 實驗方法
2.3.1 BALB/C小鼠BMSCS的復(fù)蘇
2.3.2 BALB/C小鼠BMSCS的傳代
2.3.3 生物發(fā)光成像
2.4 結(jié)果
2.5 討論
2.6 結(jié)論
3 小鼠單側(cè)輸尿管損傷模型制備及經(jīng)腎動脈移植BMSCS方法的建立
3.1 引言
3.2 實驗材料
3.2.1 實驗動物及飼養(yǎng)
3.2.2 主要實驗藥品與試劑
3.2.3 液體配置
3.3 實驗流程及分組
3.3.1 實驗流程
3.3.2 實驗分組
3.4 實驗方法
3.4.1 顯微血管夾法建立小鼠單側(cè)輸尿管梗阻的動物模型
3.4.2 取出顯微血管夾解除小鼠左側(cè)輸尿管梗阻
3.4.3 經(jīng)小鼠腎動脈移植BMSCS
3.4.4 活體成像評估及示蹤經(jīng)腎動脈移植的BMSCS
3.5 結(jié)果
3.5.1 手術(shù)步驟標(biāo)準(zhǔn)化
3.5.2 梗阻模型評估
3.5.3 動脈移植模型評估
3.5.4 單側(cè)輸尿管梗阻后解除的模型評估
3.6 討論
3.6.1 小鼠單側(cè)輸尿管梗阻后解除的模型建立
3.6.2 經(jīng)小鼠腎動脈移植BMSCS的模型建立
3.7 結(jié)論
4 MRI評估小鼠單側(cè)輸尿管梗阻解除后輸尿管的復(fù)通率
4.1 引言
4.2 實驗材料
4.2.1 實驗動物及飼養(yǎng)
4.2.2 主要實驗藥品與試劑
4.3 實驗方法
4.4 統(tǒng)計學(xué)分析
4.5 結(jié)果
4.5.1 MRI T2FSE序列上的圖像觀察及比較
4.5.2 小鼠輸尿管梗阻模型制備評估
4.5.3 實驗組與對照組小鼠輸尿管梗阻解除后輸尿管復(fù)通的比較
4.6 討論
4.7 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝
本文編號:3989406
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
英文縮略詞表
1 前言
2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代
2.1 引言
2.2 主要試劑與設(shè)備
2.2.1 主要實驗試劑
2.2.2 材料和儀器
2.2.3 相關(guān)實驗試劑配置
2.3 實驗方法
2.3.1 BALB/C小鼠BMSCS的復(fù)蘇
2.3.2 BALB/C小鼠BMSCS的傳代
2.3.3 生物發(fā)光成像
2.4 結(jié)果
2.5 討論
2.6 結(jié)論
3 小鼠單側(cè)輸尿管損傷模型制備及經(jīng)腎動脈移植BMSCS方法的建立
3.1 引言
3.2 實驗材料
3.2.1 實驗動物及飼養(yǎng)
3.2.2 主要實驗藥品與試劑
3.2.3 液體配置
3.3 實驗流程及分組
3.3.1 實驗流程
3.3.2 實驗分組
3.4 實驗方法
3.4.1 顯微血管夾法建立小鼠單側(cè)輸尿管梗阻的動物模型
3.4.2 取出顯微血管夾解除小鼠左側(cè)輸尿管梗阻
3.4.3 經(jīng)小鼠腎動脈移植BMSCS
3.4.4 活體成像評估及示蹤經(jīng)腎動脈移植的BMSCS
3.5 結(jié)果
3.5.1 手術(shù)步驟標(biāo)準(zhǔn)化
3.5.2 梗阻模型評估
3.5.3 動脈移植模型評估
3.5.4 單側(cè)輸尿管梗阻后解除的模型評估
3.6 討論
3.6.1 小鼠單側(cè)輸尿管梗阻后解除的模型建立
3.6.2 經(jīng)小鼠腎動脈移植BMSCS的模型建立
3.7 結(jié)論
4 MRI評估小鼠單側(cè)輸尿管梗阻解除后輸尿管的復(fù)通率
4.1 引言
4.2 實驗材料
4.2.1 實驗動物及飼養(yǎng)
4.2.2 主要實驗藥品與試劑
4.3 實驗方法
4.4 統(tǒng)計學(xué)分析
4.5 結(jié)果
4.5.1 MRI T2FSE序列上的圖像觀察及比較
4.5.2 小鼠輸尿管梗阻模型制備評估
4.5.3 實驗組與對照組小鼠輸尿管梗阻解除后輸尿管復(fù)通的比較
4.6 討論
4.7 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝
本文編號:3989406
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