目的研究趨化因子受體4(CXCR4)信號通路在調(diào)控心肌細胞凋亡和損傷修復過程中作用及其機制。方法將細胞分成4組:正常組、模型組、r AAV9-CXCR4-NC組和r AAV9-CXCR4組。將濃度均為200 nmol·L^-1的r AAV9-CXCR4和r AAV9-CXCR4-NC通過脂質體介導法分別轉染至r AAV9-CX-CR4-NC組、r AAV9-CXCR4組細胞,48 h后模型組、r AAV9-CXCR4-NC組、r AAV9-CXCR4組細胞先在37℃、5%CO₂、95%N₂的缺氧培養(yǎng)箱中封閉培養(yǎng)12 h,后經(jīng)37℃、5%CO₂、95%空氣的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4 h構建缺氧富氧模型。正常組H9c2細胞常規(guī)培養(yǎng)。用乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒測定細胞上清液的LDH水平,彗星實驗測定各組細胞DNA損傷程度,免疫印跡測定各組細胞中CXCR4、基質細胞衍生因子-1α(SDF-1α)和熱休克蛋白70(HSP)蛋白的相對表達水平。結果正常組、模型組、r AAV9-CXCR4-NC組和r AAV9-CXC...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1材料
        細胞
        試劑
        儀器
    2實驗方法
        2.1細胞轉染與分組[3]
        2.2缺氧復氧損傷心肌細胞模型的建立[4]
        2.3主要檢測指標
            2.3.1用試劑盒法檢測各組心肌細胞上清液乳酸脫氫酶 (LDH) 水平[5]
            2.3.2以彗星實驗測定各組心肌細胞DNA損傷程度[6]
            2.3.3以免疫印跡法檢測各組心肌細胞中CXCR4、SDF-1α和熱休克蛋白70 (HSP) 的表達水平[7]
        2.4次要檢測指標———各組心肌細胞凋亡的測定[8]
    3統(tǒng)計學處理
結果
    1各組心肌細胞上清液LDH水平比較
    2各組心肌細胞DNA損傷程度比較
    3各組心肌細胞凋亡比較
    4各組心肌細胞中CXCR4、SDF-1α和HSP 70的表達比較
討論



本文編號：3994704