發(fā)布時(shí)間：2020-12-07 09:52

　　目的:通過觀察Tribbles同源蛋白3（TRB3）過表達(dá)及表達(dá)下調(diào)與絲裂素活化蛋白激酶/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（MAPK/ERK）信號(hào)通路在腺病毒轉(zhuǎn)染小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞MLE-12上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化（EMT）的關(guān)系,探討TRB3及MAPK/ERK在肺纖維化中的相互作用。方法:1.實(shí)驗(yàn)分組:空白對(duì)照組（C組）,綠色熒光蛋白（GFP）示蹤基因Ad-GFP感染組（G組）,Ad-TRB3感染組（TRB3組）,Ad-TRB3-sh RNA感染組（TRB3-sh RNA組）,單純TGF-β1刺激組（T組）,TGF-β1+Ad-GFP組（T+GFP組）,TGF-β1+Ad-TRB3感染組（T+TRB3組）,TGF-β1+Ad-TRB3-sh RNA感染組（T+TRB3-sh RNA組）;2.Ad-GFP,Ad-TRB3,Ad-TRB3-sh RNA載體的構(gòu)建,鑒定及擴(kuò)增;3.以不同感染復(fù)數(shù)感染對(duì)數(shù)生長期的MLE-12,通過熒光顯微鏡和流式細(xì)胞技術(shù)了解最佳感染效率;4.CCK8法測(cè)定各組細(xì)胞DNA的合成;5.FACS法檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況;6.q PCR法檢測(cè)TRB3,膠原蛋白Ⅰ（CollaⅠ）,... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

干擾siRNA刺激后，TRB3蛋白的表達(dá)下降，以siRNA1最明顯B3

3.1.2 TGF-β1 適宜刺激濃度為 10ng/mLE-Cadherin蛋白含量在不同TGF-β 1 濃度結(jié)果分析：1ng/mL（t=32.909，P＜0.01）、5ng/mL（t=1.559，P＞0.05）、10ng/mL（t=-8.444，P＜0.05）、15ng/mL（t=2.078，P＞0.05），Vimentin 蛋白含量在不同TGF-β 1 濃度結(jié)果分析：1ng/mL（t=1.894，P＞0.05）、5ng/mL（t=3.343，P＞0.05）、10ng/mL（t=15.588，P＜0.01）、15ng/mL（t=2.392，P＞0.05）。由此可見在TGF-β 1 刺激濃度為 10ng/mL時(shí)E-Cadherin表達(dá)最低P＜0.05，Vimentin表達(dá)最高P＜0.01，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表 3.2 不同TGF-β 1 濃度刺激MLE-12 細(xì)胞中E-Cadherin、 Vimentin含量（n=3， x ±S）TGF-β 1濃度白含量cell 1ng/mL 5ng/mL 10ng/mL 15ng/mLE-Cadherin 1 1.57±0.03**1.09±0.10 0.61±0.08*1.24±0.Vimentin 1 1.35±0.32 1.83±0.43 2.98±0.22**1.29±0.

組TRB3 10.94±0.031.97±0.31*0.47±0.05**1.66±0.07**1.62±0.13*2.87±0.33*#&0.38±0.06**##Vimentin 11.00±0.011.59±0.03**0.74±0.03**1.31±0.02**1.39±0.09*1.94±0.08**##&0.81±0.02**##E-Cadherin 10.95±0.100.40±0.05**2.10±0.05**0.53±0.11*0.57±0.13*0.26±0.05**#&0.89±0.01**##Fibronectin 10.95±0.051.58±0.17*0.33±0.04**1.42±0.80**1.63±0.11*3.32±0.11**##&&0.46±0.04**##a-SAM 10.88±0.131.59±0.07**0.47±0.09**1.25±0.09*1.26±0.03**1.75±0.14*#&0.64±0.11**##ERK1/2 11.00±0.121.31±0.10*0.50±0.04**1.14±0.05*1.11±0.03*2.04±0.36*#&&0.61±0.03**##p-ERK1/2 11.00±0.011.34±0.07*0.53±0.03**1.14±0.04*1.11±0.04*2.04±0.11**##&&0.45±0.06**##p38MAPK 11.03±0.091.47±0.11*0.57±0.04**1.16±0.04*1.14±0.03*1.52±0.02**##&0.60±0.08*##p-p38MAPK 10.88±0.091.46±0.05**0.52±0.03**1.23±0.08*1.25±0.04**2.21±0.04**##&&0.61±0.05**##

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)信號(hào)通路在肺纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用[J]. 韓姣,曾凡軍,陳世雄.  山東醫(yī)藥. 2015(17)
[2]不同濃度TGF-β1對(duì)肺泡II型細(xì)胞系MLE-12表型及功能的影響[J]. 劉芳君,宋思思,鄧春,郭春寶,符州,劉恩梅,劉莎,譚利,龔財(cái)惠.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[3]SB203580對(duì)肝纖維化大鼠肝臟Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)的影響[J]. 楊新疆,齊翠花,鄭勇,曹玉文,李睿,宋麗秀,趙強(qiáng),陳衛(wèi)剛.  世界華人消化雜志. 2014(03)
[4]特發(fā)性肺纖維化的治療進(jìn)展[J]. 田莉瑩,于文成.  青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(03)
[5]肝纖維化大鼠肝臟中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子CHOP和TRB3的表達(dá)變化[J]. 杜錫潮,韓冰,謝汝佳,鄒河,楊勤.  中國病理生理雜志. 2013(05)
[6]JNK信號(hào)通路通過介導(dǎo)細(xì)胞凋亡對(duì)肺纖維化的調(diào)控作用[J]. 曹鳳菊,劉學(xué)軍,鐘劍克.  中國藥物與臨床. 2012(03)
[7]TRB3在腎纖維化中的表達(dá)及其與上皮-間葉轉(zhuǎn)化的關(guān)系[J]. 劉進(jìn)穩(wěn),辛冰牧,慕容,花芳.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2012(03)
[8]肺癌組織中E-cadherin和Vimentin的表達(dá)及其與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性[J]. 田茗源,王林輝,張雄,羅紅池,李昱.  中國生物制品學(xué)雜志. 2011(09)
[9]CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型肝纖維化逆轉(zhuǎn)與MAPK信號(hào)通路的研究[J]. 李政通,李俊,黃成,李浩,章圣鵬,黃艷,陶輝.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2011(06)
[10]Notch/Jagged信號(hào)通路在肝纖維化大鼠模型中的動(dòng)態(tài)表達(dá)及意義[J]. 葉超,陳永平,金曉芝,程瑗,戴志娟,林鐲.  中華傳染病雜志. 2011 (02)

博士論文
[1]Ⅰ型膠原蛋白和TGF-β1在食管鱗癌中生物學(xué)意義的研究[D]. 宋永明.山東大學(xué) 2014
[2]MAPK信號(hào)通道在TGF-β1誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的作用及沙利度胺的影響[D]. 陳海華.武漢大學(xué) 2013
[3]TRB3在腫瘤進(jìn)展中的作用及其機(jī)制探討[D]. 慕容.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2012
[4]上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變（EMT）在百草枯中毒大鼠肺纖維化中的作用及機(jī)制探討[D]. 易建華.浙江大學(xué) 2012

碩士論文
[1]TGF-β1/Smad3與JNK信號(hào)通路介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡在小鼠肺纖維化中的作用及相互關(guān)系的研究[D]. 白瓊.山西醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]核基因Tribble3調(diào)控MAPK信號(hào)通路在糖尿病腎病中的作用及機(jī)制[D]. 張錦航.山東大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2903050