目的:分析不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)基因?qū)m頸癌細(xì)胞的平板克隆形成、轉(zhuǎn)移、侵襲能力和增殖能力、細(xì)胞周期的影響;以及探討其改變宮頸癌細(xì)胞化療藥物敏感性及作用機(jī)制。方法:設(shè)計(jì)含有hnRNPA2/B1 shRNA(short hairpin RNA,shRNA)干擾序列4對(duì)、陰性對(duì)照1對(duì)。構(gòu)建含靶向hnRNPA2/B1 shRNA的重組慢病毒質(zhì)粒,并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Caski細(xì)胞、Hela細(xì)胞,qRT-PCR檢測hnRNPA2/B1 mRNA表達(dá)水平,Western blot檢測hnRNPA2/B1蛋白表達(dá)水平;分別用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的生物功能;MTT比色法檢測細(xì)胞的增殖能力、洛鉑(Lobaplatin)作用于細(xì)胞的IC50、伊立替康(Irinotecan Hydrochloride)作用于細(xì)胞的IC50;流式細(xì)胞術(shù)分析hnRNPA2/B1基因沉默后細(xì)胞周期以及洛鉑、伊立替康對(duì)細(xì)胞凋亡作用的改變;用qRT-PCR和Western blot檢測相關(guān)基因bax...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.pGMLV-SC1RNAi慢病毒載體圖譜

貴州醫(yī)科大學(xué)2016屆科學(xué)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文CaSki細(xì)胞,中文名稱人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞，形態(tài)上皮細(xì)胞，購自中院細(xì)胞庫。含有完整的HPV-16(每個(gè)細(xì)胞大約600個(gè)拷貝)和HPV-18相HeLa細(xì)胞，中文名稱人宮頸癌細(xì)胞，形態(tài)上皮細(xì)胞，購自中國科學(xué)庫。含有人乳....

圖2慢病毒干擾載體的序列對(duì)比圖譜

NC-ShNRA序列對(duì)比圖2慢病毒干擾載體的序列對(duì)比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對(duì)比ShNRA-2序列對(duì)比

圖3慢病毒干擾載體的序列對(duì)比圖譜

NC-ShNRA序列對(duì)比圖2慢病毒干擾載體的序列對(duì)比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對(duì)比ShNRA-2序列對(duì)比

圖4慢病毒shRNA感染細(xì)胞熒光照片

圖4慢病毒shRNA感染細(xì)胞熒光照片AhnRNPA2/B1-shRNA1一號(hào)孔，BhnRNPA2/B1-shRNA1六號(hào)孔，ChnRNPA2/B1-shR一號(hào)孔.DhnRNPA2/B1-shRNA2六號(hào)孔，EhnRNPA2/B1-shRNA3一號(hào)孔，F(xiàn)hnR....

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