一、下調(diào)下丘腦弓狀核TLR4表達(dá)對(duì)肥胖相關(guān)性代謝紊亂的影響目的:探討下調(diào)下丘腦弓狀核TLR4表達(dá)是否能夠改善肥胖相關(guān)性代謝紊亂。方法:通過(guò)給予5周齡SD大鼠高脂喂養(yǎng)14周來(lái)建立食源性肥胖大鼠模型,然后在第15周,采用立體定位注射技術(shù),將TLR4 sh RNA慢病毒顆粒導(dǎo)入下丘腦弓狀核區(qū),限制性地下調(diào)弓狀核區(qū)TLR4的表達(dá)。注射慢病毒顆粒4周后,采用經(jīng)腹腔注射糖耐量試驗(yàn)檢測(cè)大鼠體內(nèi)葡萄糖穩(wěn)態(tài);采用經(jīng)腹腔注射胰島素耐量試驗(yàn)檢測(cè)大鼠的胰島素抵抗情況;經(jīng)腹腔注射丙酮酸試驗(yàn)用來(lái)檢測(cè)大鼠的糖異生情況。采用常規(guī)H&E染色方法檢測(cè)肝臟及脂肪組織的病理變化。下丘腦Tlr4,Tnf,Npy和Pomc基因的m RNA表達(dá)以及肝臟的Ccl2,Tnf以及幾種代謝酶基因(包括Pklr,G6pc,Fasn和Acaca)的m RNA均通過(guò)熒光定量RT-PCR進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:我們的研究證實(shí)下調(diào)下丘腦弓狀核TLR4的表達(dá)可以顯著地減少大鼠的體重增長(zhǎng)和進(jìn)食量,改善外周的葡萄糖穩(wěn)態(tài)、胰島素的敏感性以及減少糖異生,同時(shí)伴隨著下丘腦TNF-α,NPY表達(dá)下調(diào),以及POMC表達(dá)上調(diào)。另外,我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)特異性下調(diào)下丘腦...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1腦立體定位注射操作

圖1-1腦立體定位注射操作量試驗(yàn)（ipGTT）夜后，于第二天早上9:00-10:00之間，經(jīng)腹腔注射別于注射后0min、15min、30min、60min、90m羅氏活力型血糖儀檢測(cè)血糖水平（RocheDiag過(guò)計(jì)算糖耐量曲線下面積來(lái)定量評(píng)估血糖水平的量試驗(yàn)（ipIT....

圖1-2綠色熒光蛋白標(biāo)記的慢病毒顆粒在下丘腦弓狀核內(nèi)的表達(dá)

大連醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文結(jié)果GFP慢病毒顆粒被用來(lái)監(jiān)測(cè)本研究中TLR4shRNA慢病毒顆粒在率，如圖1-1所示，注射4周后，下丘腦弓狀核區(qū)域綠色熒光蛋白達(dá)，說(shuō)明本研究中的慢病毒顆粒在弓狀核的感染效率較高且持續(xù)時(shí)

圖1-3TLR4shRNA慢病毒對(duì)下丘腦TLR4mRNA表達(dá)的影響NCD：正常飲食組，HFD：高脂飲食組，白色柱為對(duì)照組，黑色柱為慢病毒干預(yù)組，*P<0.05

1-2綠色熒光蛋白標(biāo)記的慢病毒顆粒在下丘腦弓狀核內(nèi)的表shRNA慢病毒顆粒4周后，應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)大化。如圖1-3所示，慢病毒干預(yù)后，肥胖大鼠下丘腦降，降低約56%，正常大鼠的TLR4表達(dá)水平也明顯下

圖1-4抑制TLR4表達(dá)對(duì)下丘腦炎癥因子TNFα（A）及飲食調(diào)控因子NPY（B）和POMC

大連醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文3、抑制TLR4表達(dá)對(duì)丘腦炎癥因子TNFα及飲食調(diào)控因子NPY和POMC表達(dá)的影響。如圖1-4A所示，與對(duì)照相比，TLR4shRNA慢病毒干預(yù)明顯降低了肥胖大鼠下丘腦TNFα的表達(dá)，說(shuō)明抑制下丘腦TLR4的表達(dá)，減輕了下丘腦....

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