發(fā)布時(shí)間：2020-12-20 15:10

　　第一部分WASp缺陷致致炎癥性腸病的腸道菌群和腸道內(nèi)胸腺來源調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的研究目的:明確WAS患兒及WASp缺陷小鼠模型腸道菌群組成,探索其與正常對照腸道菌群是否不同。探索WASp缺陷小鼠發(fā)生炎癥時(shí)腸道tTreg細(xì)胞相對比例變化。方法:采集WAS患兒和6月齡以上WASp缺陷小鼠大便標(biāo)本,提取大便菌群DNA,以16s rRNA基因序列為基礎(chǔ),針對V4、V5區(qū)進(jìn)行腸道菌群序列擴(kuò)增,篩選優(yōu)勢序列,并行腸道菌群多樣性及差異統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。提取WASp缺陷小鼠各層腸道淋巴結(jié)細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測腸道內(nèi)tTreg細(xì)胞。結(jié)果:WAS患兒的腸道菌群與正常兒童比較出現(xiàn)多樣性變化,WASp缺陷時(shí),除了與正常宿主共同擁有相同的OTU之外,還獨(dú)立擁有屬于自己的OTU。WAS患兒腸道菌群中變形菌門占優(yōu)勢,而擬桿菌門水平減低。而WKO小鼠厚壁菌門水平下降。WKO小鼠模型中結(jié)腸的t Treg相對比例比野生型多,而Foxp3的相對比例卻是下降的,在小腸中卻未觀察到此現(xiàn)象,表明tTreg主要受結(jié)腸微生物菌群影響。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群在炎癥情況下,或者宿主遺傳背景存在缺陷導(dǎo)致的炎癥性腸病的情況下,腸道菌群確實(shí)發(fā)生改變,而且... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

WAS蛋白結(jié)構(gòu)示意圖

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文細(xì)胞包括兩種發(fā)育不同的亞群：胸腺來源的 Treg（thymus-derived Treg，tTreg）細(xì)胞和外周衍生的 Treg（peripheric Treg，pTreg）細(xì)胞。pTreg 細(xì)胞來源于 na ve CD4+T 細(xì)胞[31]，腸微環(huán)境有利于 pTreg 細(xì)胞的生成。結(jié)腸 Treg 細(xì)胞 TCR 庫的測序顯示，結(jié)腸 FOXP3+Treg 細(xì)胞的 TCR 與其他器官的 TCR 有很大不同[32]。然而，據(jù)報(bào)道來自結(jié)腸 Treg 細(xì)胞的大部分 TCR 與胸腺中的 Treg 細(xì)胞共享，因此表明結(jié)腸 Treg細(xì)胞主要包含 tTreg 細(xì)胞而不是 pTreg 細(xì)胞[33]。因此推測在胸腺中 tTreg 細(xì)胞識(shí)別自身抗原，然后通過識(shí)別腸中交叉反應(yīng)性微生物抗原而擴(kuò)增（圖 2）。

腸道菌群OTU分類Rank-Abundance曲線.


本文編號(hào)：2928081