發(fā)布時(shí)間：2019-07-22 18:13

【摘要】：目的 腦白質(zhì)損傷(White matter damage, WMD)作為引起新生兒圍生期死亡和腦癱發(fā)生的重要原因,越來(lái)越引起人們的關(guān)注,對(duì)其的研究也日益增多。然而,目前早產(chǎn)兒WMD的病理生理機(jī)制仍不十分明朗,通過(guò)總結(jié)眾多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及流行病學(xué)研究成果我們發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)感染可能在其中起了重要作用。但對(duì)于腦白質(zhì)損傷的早期診斷,目前廣泛應(yīng)用的常規(guī)MRI以及頭顱超聲具有明顯的局限性。近年來(lái),隨著醫(yī)學(xué)影像技術(shù)的發(fā)展,彌散加權(quán)成像(Diffusion Weighted Imaging, DWI)對(duì)急性腦損傷,譬如急性腦梗、腦缺血的早期診斷價(jià)值得到了業(yè)界廣泛認(rèn)同。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)孕鼠宮內(nèi)感染脂多糖(LPS)建立早產(chǎn)胎鼠腦損傷模型,了解其對(duì)新生幼鼠腦內(nèi)髓鞘堿性蛋白(MBP)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)的影響,結(jié)合光鏡、電鏡下病理結(jié)果,探討早產(chǎn)兒宮內(nèi)感染致腦損傷的可能機(jī)制,并試圖通過(guò)提供的早期影像學(xué)證據(jù),闡明常規(guī)MRI及DWI在臨床早產(chǎn)兒腦損傷的早期診斷和治療中的價(jià)值。 材料與方法 20只受孕wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(n=6)和LPS實(shí)驗(yàn)組(n=14)。實(shí)驗(yàn)組孕鼠于孕后第18天起連續(xù)2天腹腔注射LPS450μ g·kg-1·d-1,對(duì)照組孕鼠于相同時(shí)間腹腔注射等量生理鹽水。觀察兩組大鼠分娩日期及新生仔鼠出生體重、狀態(tài)。孕第22天前分娩的仔鼠為早產(chǎn)鼠,并去除早產(chǎn)鼠。兩組仔鼠分別于生后6h、生后3d、生后7d及生后25d取新生大鼠腦組織。應(yīng)用蘇木素-伊紅染色及免疫組化法研究新生仔鼠各年齡段腦白質(zhì)病理變化和MBP、GFAP的表達(dá)特點(diǎn),以及電鏡、影像學(xué)DWI分析檢測(cè)。 另收集我院新生兒NICU病房收治的早產(chǎn)兒40例(2010.9-2012.2),正常足月兒10例。分別于生后4周或糾正胎齡、3個(gè)月、6個(gè)月及12個(gè)月對(duì)患兒進(jìn)行頭部常規(guī)MRI及DWI隨訪研究。此外對(duì)各患兒入院后進(jìn)行血常規(guī)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、血糖、血清膽紅素及血清中各種離子的測(cè)定。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組共獲得54只幼鼠,存活率約85%,對(duì)照組為71只,存活率100%。感染組子宮及胎盤病理檢測(cè)可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),血管充血水腫。對(duì)照組未見(jiàn)明顯炎癥改變。實(shí)驗(yàn)組仔鼠出生后顏色青紫、體重低。實(shí)驗(yàn)組孕鼠與對(duì)照組孕鼠每胎平均活產(chǎn)仔鼠只數(shù)、幼鼠出生平均體重有顯著性差異(P0.05)宮內(nèi)感染后實(shí)驗(yàn)組7d組仔鼠腦HE染色可見(jiàn)腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)疏松、染色淡等表現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)組生后6h及3d組仔鼠腦各層面腦白質(zhì)MBP及GFAP未見(jiàn)明確染色；實(shí)驗(yàn)組7d組及25d組仔鼠GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量在海馬區(qū)、腦室旁白質(zhì)及胼胝體區(qū)明顯多于對(duì)照組(P0.05)；實(shí)驗(yàn)組7d組海馬齒狀回、胼胝體及25d組仔鼠腦各層面腦白質(zhì)MBP免疫陽(yáng)性區(qū)域面積均較對(duì)照組明顯減少,統(tǒng)計(jì)分析后均有顯著性差異(P0.05),實(shí)驗(yàn)組7d組側(cè)腦室旁白質(zhì)區(qū)MBP染色差異不明顯,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。電鏡觀察可發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組早期(6h-3d)多數(shù)神經(jīng)元細(xì)胞器腫脹、溶解,可見(jiàn)線粒體腫脹明顯,呈空泡樣結(jié)構(gòu),粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒現(xiàn)象,可見(jiàn)到凋亡細(xì)胞。晚期(7d、25d)可見(jiàn)染色質(zhì)邊集、核仁固縮等征象。髓鞘情況：實(shí)驗(yàn)組中6h組及3d組未見(jiàn)髓鞘形成,7d組和25d組髓鞘厚度明顯變薄。而對(duì)照組均未見(jiàn)上述變化。因此,宮內(nèi)感染能導(dǎo)致新生仔鼠腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)稀疏、幼鼠髓鞘發(fā)育不完善、早期少突膠質(zhì)細(xì)胞及星形細(xì)胞溶解壞死。在對(duì)幼鼠進(jìn)行的影像學(xué)MRI檢查中,對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)MRI T2WI相上均未見(jiàn)明顯異常。實(shí)驗(yàn)組中6h組的DWI在側(cè)腦室旁白質(zhì)、海馬齒狀回及胼胝體區(qū)可見(jiàn)彌漫性片狀稍高信號(hào),較對(duì)照組彌散受限程度重、面積大。在實(shí)驗(yàn)組中3d組DWI圖像上異常信號(hào)不顯著,但通過(guò)進(jìn)行ADC值的測(cè)量發(fā)現(xiàn)兩組ADC值較對(duì)照組低(P(6h組)=0.001；P(3d組)=0.002),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。7d組及25d組較對(duì)照組ADC值差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(7d組)=0.080；P(25d組)=0.176)。 在對(duì)早產(chǎn)兒的影像學(xué)MRI檢查中,首次檢查40例早產(chǎn)兒中28例DWI未見(jiàn)高信號(hào)改變,27例常規(guī)MRI示雙側(cè)側(cè)腦室前后角旁可見(jiàn)斑點(diǎn)狀短T1稍短T2信號(hào),8例未見(jiàn)明顯異常信號(hào)；12例患兒DWI示雙側(cè)側(cè)腦室周圍白質(zhì)及額、頂葉白質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)簇狀高信號(hào),其中7例在常規(guī)MRI病灶處呈小片狀、點(diǎn)狀或條狀T1高信號(hào)T2低信號(hào)影,5例常規(guī)MRI未見(jiàn)明顯改變。其所顯示的腦白質(zhì)對(duì)稱彌漫性異常高信號(hào)可作為診斷早產(chǎn)兒腦損傷的證據(jù)。隨訪：DWI正常組(隨訪時(shí)間3個(gè)月-22個(gè)月)中22例(22/27)頭部MRI示病灶吸收消失。DWI異常組(隨訪時(shí)間1個(gè)月-22個(gè)月)中5例(5/12)常規(guī)MRI正常患兒2周后復(fù)查DWI示腦白質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)不規(guī)則高、低混雜信號(hào),而常規(guī)MRI則顯示相應(yīng)部位呈小片狀或點(diǎn)狀短T1稍短T2信號(hào)；4例(4/12)于糾正胎齡后復(fù)查MRI出現(xiàn)側(cè)腦室擴(kuò)張,中央?yún)^(qū)腦白質(zhì)變少等改變,8例于4個(gè)月后復(fù)查MRI可觀察到相應(yīng)病灶出現(xiàn)囊性腦室旁白質(zhì)軟化(Periventricular leukomalacia, PVL)改變,2例符合大腦發(fā)育不良診斷。 結(jié)論 1.孕鼠腹腔注射LPS后可出現(xiàn)宮內(nèi)感染相應(yīng)的病理改變,成功建立LPS致孕鼠宮內(nèi)感染的動(dòng)物模型。 2.宮內(nèi)感染可導(dǎo)致新生大鼠腦白質(zhì)損傷,DWI可實(shí)時(shí)反應(yīng)腦損傷后腦組織病理生理的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。其ADC值對(duì)顯示模型鼠各區(qū)域腦損傷后腦水腫情況有更高的敏感性。 3.DWI在診斷早期PVL具有比常規(guī)MRI更高的相關(guān)性,是早期診斷PVL的首選檢測(cè)方法。 4.具備腦白質(zhì)損傷高危因素的早產(chǎn)兒應(yīng)盡早進(jìn)行磁共振檢查,為早期臨床診療提供科學(xué)依據(jù),減少不良預(yù)后的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R722.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2517798