SIVmac在細(xì)胞間的直接播散和重組vMIP對(duì)其影響的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2018-02-20 20:36
本文關(guān)鍵詞: SIV mac rvMIP CD4 CCR5 細(xì)胞間直接播散 出處:《暨南大學(xué)》2005年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:目前艾滋病毒新的感染機(jī)制已經(jīng)引起人們的廣泛關(guān)注。除了游離的感染性病毒顆粒進(jìn)入細(xì)胞外,HIV還可以通過(guò)細(xì)胞與細(xì)胞的直接接觸播散并誘導(dǎo)宿主細(xì)胞形成感染性突觸。猴免疫缺陷病毒(SIV)為猴艾滋病的病原體,在許多方面與HIV和人類艾滋病相似,是研究人類艾滋病的極好模型。本課題詣在建立觀察SIVmac在細(xì)胞間直接傳播的模型,探討SIV在細(xì)胞間連接處的直接傳播機(jī)制,并研究本室通過(guò)基因重組的方法克隆的vMIP-Ⅱ(病毒巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-Ⅱ)對(duì)病毒在細(xì)胞間直接傳播的影響。 方法:構(gòu)建包含效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞的SIV在細(xì)胞間直接傳播的觀察模型,采用CD4、CCR5、His6的單抗標(biāo)記細(xì)胞表面受體和rvMIP,并用熒光二抗分別染色,在激光共聚焦顯微鏡及透射電子顯微鏡下觀察病毒在細(xì)胞間直接傳播的情況;在共聚焦顯微鏡下計(jì)數(shù)由病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞連接的數(shù)量,并探討rvMIP對(duì)SIVmac在細(xì)胞間直接傳播的影響以及靶細(xì)胞表面分子的變化。 結(jié)果:透射電子顯微鏡結(jié)果發(fā)現(xiàn)SIVmac病毒顆粒存在于效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞之間的緊密連接處,激光共聚焦顯微鏡及可觀察到靶細(xì)胞表面CD4分子和CCR5分子募集于效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞相互連接面。rvMIP減少了對(duì)病毒誘導(dǎo)的連接反應(yīng)形成數(shù)量,用rvMIP預(yù)處理過(guò)的靶細(xì)胞在連接反應(yīng)形成后未觀察到CD4分子和CCR5分子的募集。 結(jié)論:SIVmac可以通過(guò)細(xì)胞間直接傳播進(jìn)行播散,能夠使靶細(xì)胞的CD4、CCR5分子募集到細(xì)胞接觸面;用CEMx174細(xì)胞可以較好的建立觀察SIV在細(xì)胞間直接傳播的觀察模型。rvMIP具有一定抑制病毒誘導(dǎo)的連接反應(yīng)形成和CD4和CCR5在靶細(xì)胞表面募集的作用,因而可能對(duì)病毒在細(xì)胞間直接播散具有抑制效應(yīng)。
[Abstract]:Objective: at present, the new mechanism of HIV infection has attracted widespread attention. In addition to the free infectious virus particles entering the cells, HIV can also spread through direct contact between cells and induce the host cell form. Infectious synapses. Simian immunodeficiency virus (Siv) is the pathogen of AIDS in monkeys. Similar to HIV and HIV / AIDS in many respects, it is an excellent model for the study of human AIDS. This topic is to establish a model to observe the direct transmission of SIVmac between cells, and to explore the mechanism of direct transmission of SIV at intercellular junctions. The effect of vMIP- 鈪,
本文編號(hào):1519971
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