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大鼠紅核脊髓束損傷模型的建立及雌激素對紅核神經(jīng)元保護作用的實驗研究

發(fā)布時間:2018-02-09 15:46

  本文關鍵詞: 紅核脊髓束 Fluoro-Ruby 生物素化葡聚糖胺(BDA) 紅核脊髓束 損傷 生物素化葡聚糖胺 Fluoro-Ruby NADPH 紅核脊髓束 紅核 雌激素 損傷 GFAP NADPH 出處:《南通大學》2007年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】: 第一部分神經(jīng)示蹤技術觀察大鼠紅核脊髓束的定位 目的:觀察紅核脊髓束的起源及在脊髓中的定位。方法:采用生物素化葡聚糖胺(biotinylated dextran amine, BDA)順行示蹤和Fluoro-Ruby(FR)逆行示蹤法。結果:BDA陽性棕黃色的紅核脊髓束主要起于紅核的大細胞,離開紅核后立即經(jīng)中腦中縫的腹側被蓋交叉至對側,形成紅核脊髓束,行于脊髓白質(zhì)外側索的背側、脊髓灰質(zhì)后角的外側,密集排列成獨立的纖維束,下行可達頸、腰部的膨大。FR陽性反應產(chǎn)物在頸段脊髓外側索的背側定位,逆行至中腦紅核中,紅核中可見到大量紅色陽性標記細胞。結論:運用BDA順行神經(jīng)示蹤劑和FR逆行熒光示蹤劑可以清晰對正常大鼠紅核脊髓束進行精確解剖定位,為進一步研究紅核脊髓束的損傷和功能重建提供形態(tài)學基礎。 第二部分大鼠紅核脊髓束損傷模型的建立與評價 目的:成功制作大鼠單側紅核脊髓束損傷模型。方法:選擇性切割大鼠頸段紅核脊髓束,建立大鼠單側紅核脊髓束損傷模型,采用前肢支撐探測實驗進行行為學檢測,運用生物素化葡聚糖胺(BDA)順行神經(jīng)示蹤法,Fluoro-Ruby逆行熒光標記神經(jīng)示蹤法和NADPH-d組織化學法對模型進行形態(tài)學評判。結果:紅核脊髓束損傷組大鼠術后左側前肢伸肌癱瘓,前肢選擇支撐實驗顯示其伸肌功能受限; BDA神經(jīng)示蹤法結果顯示在頸段平面,僅見一束BDA陽性反應產(chǎn)物在右側走行,在脊髓側索的背側半下行至腰段,而在損傷平面以下,損傷側未見BDA陽性反應產(chǎn)物在脊髓外側索中走行。Fluoro-Ruby逆行熒光標記神經(jīng)法結果發(fā)現(xiàn)術后4w右側中腦紅核標記神經(jīng)元內(nèi)的神經(jīng)元細胞數(shù)量和形態(tài)未見有改變,而在8w出現(xiàn)數(shù)量明顯減少,并可見到紅核內(nèi)細胞出現(xiàn)變性、萎縮。NADPH組織化學染色可見到紅核脊髓束損傷側的脊髓外側索出現(xiàn)較多深藍色的陽性標記細胞,并有較多深染陽性突起。結論:選擇在頸髓切斷一側紅核脊髓束,損傷區(qū)和紅核內(nèi)NOS含量增高,紅核神經(jīng)元顯著減少,表明紅核神經(jīng)元發(fā)生了逆行性損傷,是研究紅核脊髓束的可塑性和神經(jīng)軸突再生的理想動物模型。BDA神經(jīng)束路示蹤法和FR逆行熒光示蹤法可作為紅核脊髓束損傷模型的形態(tài)學指標。 第三部分雌激素對去卵巢大鼠脊髓損傷后紅核神經(jīng)元保護作用的實驗研究 目的:研究雌激素E2對去卵巢雌性大鼠脊髓損傷后逆行性紅核神經(jīng)損傷的保護作用和促進肢體功能恢復的作用。方法:將大鼠分為紅核脊髓束損傷組、E2治療組、雌激素受體拮抗劑(ICI 182,780)組、E2+ICI組、正常組。切斷SD大鼠脊髓C3-C4背外側索制作紅核脊髓束半橫斷損傷模型,并在損傷區(qū)分別放置吸附有E2、E2+ICI、ICI的明膠海綿;術后應用前肢支撐探測實驗,BDA順行示蹤法, FR逆行神經(jīng)示蹤技術,NADPH組織化學與GFAP免疫蛋白印跡法,觀察雌激素對去卵巢雌性大鼠脊髓損傷后對紅核神經(jīng)元的影響。結果:E2組行為功能評分與紅核脊髓束損傷組及E2+ICI、ICI組沒有明顯差異。FR標記的損傷側紅核神經(jīng)元數(shù),E2組明顯多于損傷組(p 0.05)。E2組脊髓損傷側產(chǎn)生的反應性NOS少于紅核脊髓束損傷組及E2+ICI、ICI組(p 0.05),中腦紅核部位反應性NOS與損傷組沒有明顯的區(qū)別。脊髓內(nèi)GFAP表達量,E2組顯著低于紅核脊髓束損傷組及E2+ICI、ICI組(p 0.05)。結論:雌激素可減輕紅核脊髓束損傷后的繼發(fā)損傷,而對運動神經(jīng)元發(fā)揮保護作用,從而對肢體功能的恢復起到促進作用。
[Abstract]:Observation of the localization of the red nucleus of the red nucleus in rats by the first part of nerve tracer technique Objective : To observe the origin and localization of red nucleus in the spinal cord . Establishment and evaluation of the damage model of the second part of the rat red nucleus spinal cord injury model Objective : To study the damage model of unilateral red nucleus in rats . Experimental study on the protective effect of the third partial estrogen on the protective effect of red nucleus neurons after spinal cord injury in ovariectomized rats Objective : To study the protective effect of estrogen E2 on retrograde erythroid nerve injury after spinal cord injury in ovariectomized female rats and to promote the restoration of limb function . Methods : The rats were divided into three groups : red nucleus spinal cord injury group , E2 treatment group , estrogen receptor antagonist ( ICI 182,780 ) , E2 + ICI group and normal group . There was no significant difference between the response NOS in the spinal cord injury group and the group of E2 + ICI and ICI ( p 0.05 ) . The expression of GFAP in the spinal cord was significantly lower than that of the red nucleus and the group of E2 + ICI and ICI ( p 0.05 ) . Conclusion : The estrogen can reduce secondary injury after spinal cord injury , and play a role in protecting the motor neuron , thus promoting the restoration of limb function .

【學位授予單位】:南通大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2007
【分類號】:R651.2;R-332;R96

【參考文獻】

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本文編號:1498281

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