目的探討骨質(zhì)疏松小鼠模型骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物學特性的改變。方法通過皮下注射地塞米松構建小鼠骨質(zhì)疏松動物模型(OP組),同時設立對照(NC組),分離OP組及NC組骨髓MSCs進行體外培養(yǎng);通過流式細胞術檢測細胞表面分化抗原;運用CKK-8實驗檢測細胞增殖活力;通過脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP缺口末端標記法(TUNEL)檢測細胞凋亡水平;運用堿性磷酸酶(ALP)活性檢測、油紅O染色及Western blot法檢測兩組細胞成骨分化及脂肪分化能力。結果經(jīng)過骨組織學檢測證明模型建立成功,體外培養(yǎng)OP組及NC組骨髓MSCs細胞形態(tài)無差異。OP-MSCs細胞表面分化抗原Scal1及CD44為陽性, CD34及CD11b為陰性,與NC-MSCs相似,但OP-MSCs增殖活力下降(P<0.05);此外兩組細胞凋亡水平類似(P>0.05)。成骨分化誘導7 d后OP-MSCs的ALP活性顯著低于對照組(P<0.01),21 d后礦化小結明顯減少(P<0.001);脂肪分化誘導8 d后OP-MSCs形成更多脂滴(P<...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 動物模型建立:
        1.2.2 骨組織學檢測:
        1.2.3 MSCs分離培養(yǎng):
        1.2.4 流式細胞術:
        1.2.5 細胞增殖測定:
        1.2.6 細胞凋亡測定:
        1.2.7 細胞分化誘導:
        1.2.8 Western blot:
        1.2.9 堿性磷酸酶(ALP)活性檢測:
        1.2.10 茜素紅染色:
        1.2.11 油紅O染色:
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 骨質(zhì)疏松小鼠模型建立及檢測
    2.2 OP-MSCs的干細胞表面分化抗原表達水平檢測
    2.3 OP-BMSCs的增殖能力檢測
    2.4 OP-MSCs的凋亡水平檢測
    2.5 OP-MSCs的多向分化能力檢測
    2.6 OP-MSCs中成骨細胞及脂肪細胞轉(zhuǎn)錄因子的表達水平
3 討論



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