目的觀察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)對(duì)大鼠垂體泌乳素腺瘤細(xì)胞系MMQ增殖、凋亡、侵襲的影響,并探討其作用機(jī)制。方法將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期MMQ細(xì)胞分為A、B、C、D組。A組加入常規(guī)培養(yǎng)基,B組加入miR-374-5p類似物,C組加入miR-374-5p抑制劑,D組加入miR-374-5p類似物和miR-374-5p抑制劑。各組培養(yǎng)0、24、48、72 h時(shí),酶標(biāo)儀在490 nm波長(zhǎng)處檢測(cè)各組細(xì)胞光密度值(OD值,以O(shè)D值表示細(xì)胞增殖能力)。各組細(xì)胞培養(yǎng)72 h時(shí),離心收集細(xì)胞,加入Annexin V-FITC和PI染色,流式細(xì)胞儀檢測(cè)Annexin V染色陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和PI染色陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(以Annexin V染色陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和PI染色陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)表示細(xì)胞凋亡能力)。各組細(xì)胞培養(yǎng)72 h時(shí),采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞侵襲相關(guān)基因[E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、N-鈣黏蛋白(N-cadherin)、蝸牛家族轉(zhuǎn)錄阻遏物1(Snail)、波形蛋白(Vimentin),以侵襲相關(guān)基因mRNA的相...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及試劑
    1.2 細(xì)胞分組及處理
    1.3 各組細(xì)胞增殖能力觀察
    1.3 各組細(xì)胞凋亡能力觀察
    1.4 各組細(xì)胞侵襲相關(guān)基因及垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因(PTTG)mRNA檢測(cè)
    1.5 miR-374-5p靶基因驗(yàn)證
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組細(xì)胞增殖能力比較
    2.2 各組細(xì)胞凋亡能力比較
    2.3 各組細(xì)胞侵襲相關(guān)基因mRNA及PTTG mR-NA相對(duì)表達(dá)量比較
    2.4 miR-374-5p靶基因驗(yàn)證結(jié)果
3 討論



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