核衣殼(nucleocapsid, N)蛋白是病毒必不可少的結(jié)構(gòu)蛋白,具有保護(hù)病毒基因組和調(diào)控病毒復(fù)制進(jìn)程的重要作用。作為冠狀病毒的經(jīng)典模型,鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus, MHV) N蛋白的磷酸化調(diào)控病毒RNA復(fù)制轉(zhuǎn)錄和裝配已有報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)MHV-A59感染鼠neuro-2a細(xì)胞后期表達(dá)的N蛋白呈現(xiàn)明顯的電荷不均一性,其中只有小部分發(fā)生磷酸化并被裝配至病毒顆粒中;等電聚焦電泳顯示N蛋白的電荷呈連續(xù)分布。用蛋白脂�；种苿�2-溴棕櫚酸(2-BP)和蛋白酶體抑制劑MG-132處理后顯示病毒復(fù)制水平不但與N蛋白電負(fù)性相關(guān),而且與細(xì)胞的PKCαS657磷酸化和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白水平相關(guān)。結(jié)果提示磷酸化修飾與鼠冠狀病毒N蛋白電荷不均一性及穩(wěn)定性密切相關(guān)。

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【部分圖文】：

１０μｍｏｌ／ＬＭＧ－１３２和２５ｍｏｌ／Ｌ２－ＢＰ均獲得很好的作用效果（圖２～

蛋白譜存在較明顯差異（圖４）。如圖４所示，２－ＢＰ和ＭＧ－１３２兩者對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白β－ａｃｔｉｎ（黑圈）和α－ｅｎｏｌａｓｅ（紅箭頭）只有輕度的抑制。鼠冠狀病毒ＭＨＶ－Ａ５９感染后α－ｅｎｏｌａｓｅ明顯減少，但對(duì)β－ａｃｔｉｎ水平影響并不明顯，因此β－ａｃｔｉｎ可以作為其他細(xì)胞....

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