發(fā)布時(shí)間：2020-12-03 17:03

　　研究背景:外泌體（exosomes）是由細(xì)胞內(nèi)的多囊泡體與細(xì)胞膜相融合,從而釋放到細(xì)胞外的雙層膜性納米小囊泡。exosomes能夠在細(xì)胞間傳遞生物活性物質(zhì),發(fā)揮重要的細(xì)胞間信息交流的作用。目前已有相關(guān)研究報(bào)道,原蟲(chóng)可以分泌exosomes,且在宿主與寄生蟲(chóng)間的信息交流方面發(fā)揮著重要作用。迄今,一些寄生蟲(chóng),如日本血吸蟲(chóng)、布氏錐蟲(chóng)、克氏錐蟲(chóng)和新孢子蟲(chóng),均被證實(shí)可以分泌exosomes。弓形蟲(chóng)是一種專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生的機(jī)會(huì)性致病原蟲(chóng),具有生活史復(fù)雜且感染率高等特點(diǎn),嚴(yán)重危害著人們的健康與畜牧業(yè)的發(fā)展。因此,探索有效預(yù)防或治療手段來(lái)抵抗弓形蟲(chóng)感染刻不容緩。目前關(guān)于弓形蟲(chóng)來(lái)源的exosomes的相關(guān)研究仍較為有限。研究目的:分離、純化和鑒定弓形蟲(chóng)ME49蟲(chóng)株來(lái)源的exosomes,并對(duì)弓形蟲(chóng)exosomes中非編碼RNA進(jìn)行分析,預(yù)測(cè)相關(guān)miRNA的宿主靶基因和靶定信號(hào)通路。進(jìn)一步探究MAPK信號(hào)通路在弓形蟲(chóng)exosomes對(duì)宿主免疫應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制中的作用。研究方法:首先利用差速離心、超濾濃縮以及試劑盒提取相結(jié)合的方法,對(duì)弓形蟲(chóng)exosomes進(jìn)行分離提取。并通過(guò)電子顯微鏡、納米粒徑分析儀（NTA）... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１弓形蟲(chóng)生活史７??Ｆｉｇ．ｌ?Ｔｈｅ?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?Ｔ．?ｇｏｎｄｉｉ??

應(yīng)激活化蛋白激酶／ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ＳＡＰＫ／ＪＮＫ）和ｐ３８ＭＡＰＫ，這類(lèi)蛋白??激酶與細(xì)胞功能的許多改變具有一定功能相關(guān)性，包括細(xì)胞因子表達(dá)、增殖和凋??亡。ＪＮＫｓ和ｐ３８ＭＡＰＫｓ?（如圖３）作為應(yīng)激活化蛋白激酶通路，在促炎性反應(yīng)??及維持組織穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。它們通過(guò)環(huán)境因素和遺傳因素來(lái)調(diào)控增殖、??分化以及細(xì)胞的存活４１。因此，作為免疫及促炎反應(yīng)的活化調(diào)控關(guān)鍵因子，ＭＡＰＫｓ??在促炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生中具有重要調(diào)控作用４２。?＇??在我們前期的研究中，我們發(fā)現(xiàn)弓形蟲(chóng)可以通過(guò)分泌ｅｘｏｓｏｍｅｓ調(diào)節(jié)宿主的??免疫應(yīng)答４３。因此，在本研究中，我們將進(jìn)一步在體外實(shí)驗(yàn)中研究弓形蟲(chóng)ｅｘｏｓｏｍｅｓ??對(duì)巨噬細(xì)胞ＲＡＷ２６４．７的作用。我們的研究結(jié)果表明，弓形蟲(chóng)來(lái)源的ｅｘｏｓｏｍｅｓ??可通過(guò)激活ＪＮＫ信號(hào)通路引起固有免疫應(yīng)答，從而為宿主－寄生蟲(chóng)的信息交流提??供重要調(diào)節(jié)因子。??１１??

弓形蟲(chóng)速殖子形態(tài)結(jié)構(gòu)顯微觀察??我們通過(guò)光學(xué)顯微鏡對(duì)弓形蟲(chóng)ＭＥ４９蟲(chóng)株速殖子進(jìn)行形態(tài)觀察。結(jié)果如圖５??示，可見(jiàn)弓形蟲(chóng)形態(tài)成經(jīng)典的月牙形，形態(tài)飽滿，有利于后期弓形蟲(chóng)ｅｘｏｓｏｍｅｓ??提取。??


本文編號(hào)：2896442