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去乙酰基化酶SIRT6在脂肪細胞和肝星狀細胞中的作用及機制研究

發(fā)布時間:2020-12-03 11:01
  背景在肥胖和2型糖尿病等代謝性疾病中,糖、脂代謝發(fā)生紊亂,在肝臟、脂肪和骨骼肌等組織中會出現(xiàn)糖酵解和脂質(zhì)合成異常。脂肪和肝臟是人重要的代謝器官,是機體代謝平衡的重要組成部分。代謝性疾病可以引起肝組織損傷,肝代償性修復異常調(diào)節(jié)后導致肝纖維化(liver fibrosis)。哺乳動物Sirtuin家族中的一個重要成員,Sirtuin6(SIRT6),參與調(diào)控了包括代謝,炎癥、衰老等許多重要生理功能。它在脂肪組織代謝平衡和肝臟疾病發(fā)生發(fā)展過程中的作用還不是很清楚。目的本研究擬使用廣泛應用于基因敲出的Cre-loxp系統(tǒng)建立兩種SIRT6基因在脂肪細胞中敲除的小鼠模型,研究SIRT6在脂肪細胞中的功能;利用肝星狀細胞的細胞系-LX2細胞以及SIRT6過表達(全身性)的轉(zhuǎn)基因小鼠(TgSIRT6)為研究對象,研究SIRT6在肝星狀細胞中的的作用。方法1.研究SIRT6在脂肪細胞中的作用(1)利用正常飼料和60%高脂飼料喂養(yǎng)野生型小鼠(wild-type,WT),建立肥胖小鼠模型,通過Western blot檢測SIRT6在脂肪組織中的表達。(2)利用SIRT6 floxed(Sirt6... 

【文章來源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

去乙酰基化酶SIRT6在脂肪細胞和肝星狀細胞中的作用及機制研究


SIRT6FKO小鼠和對照小鼠BAT組織中,UCP1,PGC1α和PPARγ熱基因的表達(n=3只/組)

細胞,腺病毒,數(shù)據(jù)表示,乙;


42理 LX2 細胞降低 SIRT6 的表達。(A)10ng/mL 的 TGFβ1 處理 LX2 mRNA 水平;(B)10ng/mL 的 TGFβ1 處理 LX2 細胞 24 h,Wester表達以及 H3K9,H3K56 的乙;健(shù)據(jù)表示均數(shù)±平均標準誤 Western blotting 檢測腺病毒 SIRT6 和腺病毒 shSIRT6 在 L(knockdown)SIRT6 的效率和 Western blotting 結(jié)果顯示(圖 2-1,A 和 B):腺病毒 SIRT

纖維化,腺病毒感染,不使用,細胞


SIRT6 的敲低都導致纖維化相關(guān)基因的表達上升(圖2-2,B)。圖 2-2:LX2 細胞中 SIRT6 對纖維化相關(guān)基因的調(diào)控。(A)SIRT6 和對照 GFP 的腺病毒感染 LX2細胞 24 h 后,不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再誘導 24 h,纖維化相關(guān)基因的表達;(B)shSIRT6 和對照 shGFP 的腺病毒感染 LX2 細胞 24 h 后,不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再誘導 24 h,纖維化相關(guān)基因的表達。數(shù)據(jù)表示均數(shù)±平均標準誤差(S.E.M)。*P< 0.05。AB

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Cellular and molecular mechanisms in the pathogenesis of liver fibrosis:An update[J]. Gülsüm ?zlem Elpek.  World Journal of Gastroenterology. 2014(23)



本文編號:2896304

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