發(fā)布時(shí)間：2020-11-12 01:43

　　 目的:研究泰山磐石散對流產(chǎn)模型大鼠母胎界面FAS、FASL表達(dá)的影響,從而探討泰山磐石散保胎的作用機(jī)制。方法:將雌性 SD 大鼠和雄性 SD 大鼠按1:1的比例合籠喂養(yǎng),然后第二天觀察是否有陰栓,若觀察到有陰栓則標(biāo)記為妊娠的第一天。將全部受孕大鼠陰栓隨機(jī)分3組,分別為正常組,模型組,治療組。正常組在懷孕后6～8d每天進(jìn)行皮下注射75%乙醇溶液(75%乙醇為溴隱亭的溶解劑),而在懷孕后的1～11d每天灌服蒸餾水;模型組在懷孕的6～8d則每天皮下注射溴隱亭溶液,在懷孕的1～11d灌服蒸餾水;治療組在懷孕后6～8d皮下注射溴隱亭溶液,在懷孕的1～11d灌服泰山磐石散。第12天取蛻膜組織利用免疫組化法檢測母胎界面子宮側(cè)蛻膜組織FAS、FASL表達(dá)情況。結(jié)果:與正常組相比,模型組母胎界面子宮側(cè)蛻膜組織FAS表達(dá)均上升,FASL表達(dá)均下降(P0.01);模型組相比,治療組蛻膜組織母胎界面子宮側(cè)FAS表達(dá)均下降,FASL表達(dá)均上升(P0.01)結(jié)論:泰山磐石散治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)一方面是通過下調(diào)蛻膜組織母胎界面中FAS表達(dá)水平,另一方面是上調(diào)FASL表達(dá)水平,從而來達(dá)到減少蛻膜組織中細(xì)胞凋亡的目的,最終達(dá)到其降低流產(chǎn)率的效果。
【部分圖文】：

復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)是一種常見的婦科病,嚴(yán)重危害著廣大婦女的身心健康,但其發(fā)病機(jī)制一直困擾著廣大的學(xué)者。近年來,大量的研究報(bào)道了母胎界面免疫耐受的建立是保證胚胎順利植入的一個(gè)重要環(huán)節(jié);當(dāng)母體免疫應(yīng)答發(fā)生異常、母胎界面免疫耐受無法建立時(shí),母體的免疫系統(tǒng)對胚胎產(chǎn)生排斥,進(jìn)而造成了流產(chǎn)的發(fā)生。Th1及Th2細(xì)胞亞群是調(diào)控母胎界面免疫應(yīng)答的兩個(gè)重要的細(xì)胞亞群[5],當(dāng)細(xì)胞亞群偏向Th1時(shí),則會(huì)出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng),從而引發(fā)流產(chǎn);當(dāng)細(xì)胞亞群偏向Th2時(shí),則會(huì)抑制這種免疫排斥反應(yīng),以保證妊娠可以順利的進(jìn)行。研究發(fā)現(xiàn),在妊娠期間Th1/Th2型細(xì)胞亞群比例的失衡與FAS/FASL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有著緊密的聯(lián)系[6]。FAS/ FASL系統(tǒng)是細(xì)胞和組織中主要的凋亡途徑之一,FAS是I型膜蛋白,是腫瘤壞死因子(TNF)受體家族的成員,大量表達(dá)于活化的T細(xì)胞表面[7]。其配體FASL是II型跨膜蛋白,通常只表達(dá)在活化的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞上[8]。而表達(dá)FASL的效應(yīng)殺傷細(xì)胞通過與自身表達(dá)的FAS相結(jié)合,從而誘導(dǎo)自身的凋亡過程[9],這個(gè)過程被稱為活化誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡(Activation Induced Cell Death,AICD)。Reinhard等[10]的研究發(fā)現(xiàn),FAS主要表達(dá)在Th1細(xì)胞的表面,通過與FASL結(jié)合后從而引發(fā)了自身的細(xì)胞凋亡,最終使得表達(dá)FAS的Th1細(xì)胞發(fā)生凋亡,減少了母胎界面上的免疫排斥反應(yīng),使得妊娠能夠順利進(jìn)行。而當(dāng)Th1細(xì)胞上的FASL表達(dá)下降時(shí),Th1細(xì)胞不能通FAS/FASL介導(dǎo)的AICD發(fā)生及時(shí)的凋亡,大量被激活的Th1細(xì)胞產(chǎn)生Th1型細(xì)胞因子,最終導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生。圖2 孕鼠母胎界面子宮側(cè)蛻膜組織FASL表達(dá)情況（200X)

圖1 各組孕鼠母胎界面子宮側(cè)蛻膜組織FAS表達(dá)情況（200X)介于FAS/FASL系統(tǒng)對妊娠免疫耐受的獨(dú)特作用,越來越多學(xué)者將FAS/FASL系統(tǒng)與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)之間的關(guān)系進(jìn)行了進(jìn)一步的研究。何育英等[11]研究發(fā)現(xiàn)RSA患者蛻膜與絨毛組織FASL低于正常早孕組,蛻膜組織中FAS表達(dá)較正常早孕組增強(qiáng),且張靜等[12]的研究亦發(fā)現(xiàn)了自然流產(chǎn)患者可能由于滋養(yǎng)細(xì)胞FASL表達(dá)的下降,導(dǎo)致了表達(dá)FAS的活化TH1淋巴細(xì)胞發(fā)生凋亡減少,從而增強(qiáng)母體對胎兒的排斥,最終導(dǎo)致了流產(chǎn)的發(fā)生。在本次實(shí)驗(yàn)中我們采用溴隱亭皮下注射來造成流產(chǎn)大鼠模型,結(jié)果顯示與正常妊娠組相比,流產(chǎn)模型大鼠組母胎界面蛻膜組織中FAS表達(dá)明顯上升,而FASL表達(dá)明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),這與前兩位學(xué)者的研究結(jié)果一致。因此我們認(rèn)為當(dāng)母胎界面中FAS表達(dá)升高而FASL表達(dá)下降時(shí),可能是導(dǎo)致流產(chǎn)發(fā)生的重要原因之一。而在經(jīng)過泰山磐石散灌胃治療后,流產(chǎn)模型大鼠組母胎界面蛻膜組織中FAS表達(dá)明顯下降,而FASL表達(dá)明顯上升,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明了泰山磐石散治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)一方面可能通過增加FASL的表達(dá),使表達(dá)FAS 陽性T淋巴細(xì)胞凋亡,減少淋巴細(xì)胞對蛻膜細(xì)胞的攻擊;一方面可能通過降低 FAS表達(dá),使 FAS/FASL介導(dǎo)的AICD機(jī)制恢復(fù)到平衡的狀態(tài),從而達(dá)到泰山磐石散降低流產(chǎn)率的目的。
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