發(fā)布時間：2024-06-29 15:26

　　鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(diethylhexyl phthalate,DEHP)是一種應用非常廣泛的增塑劑。DEHP具有神經毒性,可以對神經細胞造成損傷并產生細胞毒性,長期接觸還會損害神經發(fā)育以及行為和認知。然而,DEHP誘導的神經毒性的分子機制仍有待研究。在此,我們對三種小鼠源神經細胞系的神經毒性進行比較,以建立適用于DEHP神經毒性作用研究的良好細胞模型。首先,我們通過MTT實驗檢測了不同濃度DEHP暴露后小鼠神經瘤母細胞系(N2a),分化和未分化的小鼠海馬神經元細胞系(HT22)以及小鼠神經干細胞(NE-4C)的細胞活力。結果顯示,經DEHP暴露后的細胞活力成劑量依賴式下調,NE-4C的細胞活力在12μM時明顯降低,N2a和分化HT22的細胞活力均在50μM的濃度出現(xiàn)下降,未分化HT22的細胞活力則在200μM的較高濃度才出現(xiàn)顯著下降。其次,采用Hoechst染色和western blotting檢測了不同濃度DEHP暴露后細胞的凋亡情況。結果表明,不同細胞發(fā)生顯著凋亡時DEHP的暴露濃度不同,NE-4C細胞被誘導發(fā)生凋亡的DEHP濃度為12μM,N2a細胞和分化的HT22...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1濃度梯度DEHP暴露后的細胞活力（A）N2a細胞，(B）NE-4C細胞，（C）未分化的HT22細胞，(D)分化的HT22細胞

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經細胞系的毒性比較研究

圖3-3濃度梯度DEHP暴露細胞凋亡蛋白的檢測（A-B）N2a細胞，（C-D）未分化HT22細胞，（E-F）分化HT22細胞，（G-H）NE-4C細胞

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經細胞系的毒性比較研究23圖3-3濃度梯度DEHP暴露細胞凋亡蛋白的檢測（A-B）N2a細胞，（C-D）未分化HT22細胞，（E-F）分化HT22細胞，（G-H）NE-4C細胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，westernblot檢測細胞中Bc....

圖3-4濃度梯度DEHP暴露細胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表達情況

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經細胞系的毒性比較研究25圖3-4濃度梯度DEHP暴露細胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表達情況（A-B）N2a細胞，（C-D）未分化HT22細胞，（E-F）分化HT22細胞，（G-H）NE-4C細胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，w....

圖3-5濃度梯度DEHP暴露細胞中BDNF蛋白水平的檢測

碩士學位論文26圖3-5濃度梯度DEHP暴露細胞中BDNF蛋白水平的檢測(A)N2a細胞，未分化的HT22細胞，分化的HT22細胞，(B)NE-4C細胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，采用ELISA檢測細胞中BDNF蛋白表達。與對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01....

本文編號：3997757