鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(diethylhexyl phthalate,DEHP)是一種應(yīng)用非常廣泛的增塑劑。DEHP具有神經(jīng)毒性,可以對神經(jīng)細(xì)胞造成損傷并產(chǎn)生細(xì)胞毒性,長期接觸還會損害神經(jīng)發(fā)育以及行為和認(rèn)知。然而,DEHP誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的分子機(jī)制仍有待研究。在此,我們對三種小鼠源神經(jīng)細(xì)胞系的神經(jīng)毒性進(jìn)行比較,以建立適用于DEHP神經(jīng)毒性作用研究的良好細(xì)胞模型。首先,我們通過MTT實(shí)驗(yàn)檢測了不同濃度DEHP暴露后小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞系(N2a),分化和未分化的小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系(HT22)以及小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(NE-4C)的細(xì)胞活力。結(jié)果顯示,經(jīng)DEHP暴露后的細(xì)胞活力成劑量依賴式下調(diào),NE-4C的細(xì)胞活力在12μM時明顯降低,N2a和分化HT22的細(xì)胞活力均在50μM的濃度出現(xiàn)下降,未分化HT22的細(xì)胞活力則在200μM的較高濃度才出現(xiàn)顯著下降。其次,采用Hoechst染色和western blotting檢測了不同濃度DEHP暴露后細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果表明,不同細(xì)胞發(fā)生顯著凋亡時DEHP的暴露濃度不同,NE-4C細(xì)胞被誘導(dǎo)發(fā)生凋亡的DEHP濃度為12μM,N2a細(xì)胞和分化的HT22...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖3-1濃度梯度DEHP暴露后的細(xì)胞活力（A）N2a細(xì)胞，(B）NE-4C細(xì)胞，（C）未分化的HT22細(xì)胞，(D)分化的HT22細(xì)胞

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經(jīng)細(xì)胞系的毒性比較研究

圖3-3濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞凋亡蛋白的檢測（A-B）N2a細(xì)胞，（C-D）未分化HT22細(xì)胞，（E-F）分化HT22細(xì)胞，（G-H）NE-4C細(xì)胞

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經(jīng)細(xì)胞系的毒性比較研究23圖3-3濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞凋亡蛋白的檢測（A-B）N2a細(xì)胞，（C-D）未分化HT22細(xì)胞，（E-F）分化HT22細(xì)胞，（G-H）NE-4C細(xì)胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，westernblot檢測細(xì)胞中Bc....

圖3-4濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表達(dá)情況

增塑劑DEHP對幾種小鼠源神經(jīng)細(xì)胞系的毒性比較研究25圖3-4濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞中PSD95，synapsin-1蛋白的表達(dá)情況（A-B）N2a細(xì)胞，（C-D）未分化HT22細(xì)胞，（E-F）分化HT22細(xì)胞，（G-H）NE-4C細(xì)胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，w....

圖3-5濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞中BDNF蛋白水平的檢測

碩士學(xué)位論文26圖3-5濃度梯度DEHP暴露細(xì)胞中BDNF蛋白水平的檢測(A)N2a細(xì)胞，未分化的HT22細(xì)胞，分化的HT22細(xì)胞，(B)NE-4C細(xì)胞。均在濃度梯度的DEHP中暴露24h后，采用ELISA檢測細(xì)胞中BDNF蛋白表達(dá)。與對照組相比，*p＜0.05，**p＜0.01....

本文編號：3997757