高乳脂率是牦牛乳的顯著特征。乳腺組織中,乳脂合成所需脂肪酸既可從血液中直接攝取,也可由乳腺組織從頭合成。為了了解牦牛乳腺組織中乳脂合成的主要途徑、機(jī)制及其特點(diǎn),采集靜止期、發(fā)育期、泌乳旺期、泌乳后期的牦牛乳腺組織以及采集泌乳期的奶牛乳腺組織樣品(以上樣品各3頭)作為泌乳期的對照。在形態(tài)學(xué)觀測的基礎(chǔ)上,采用實(shí)時熒光定量PCR、免疫蛋白印跡以及免疫組織化學(xué)方法,檢測了乳腺不同發(fā)育階段脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸移位酶(CD36)、乙酰輔酶A羧化酶α(Acetyl-CoA carboxylase alpha,ACCα)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FASN)、硬脂酰輔酶A去飽和酶1(Stearoyl-CoA dehydrogenase1,SCD1)等脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和合成相關(guān)蛋白及其mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):1.靜止期的牦牛乳腺組織腺泡簇?fù)沓蕡F(tuán)狀,大量的脂肪細(xì)胞及結(jié)締組織存在于小葉間,到妊娠期乳腺開始發(fā)育直到泌乳旺期、泌乳后期。發(fā)育過程伴隨著脂肪細(xì)胞以及結(jié)締組織減少,腺泡從團(tuán)狀拉成網(wǎng)狀。在泌乳過程中腺泡可能存在交替泌乳的模式。同時泌...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮略詞
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1.乳脂合成
        1.1 乳的組成
        1.2 乳脂的組成及其來源
        1.3 乳脂的合成
            1.3.1 LPL對血液中甘油三酯水解的催化作用
            1.3.2 CD36以及其他轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對長鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)
            1.3.3 FASN、ACCα在乳腺從頭合成脂肪酸過程中的重要作用
            1.3.4 SCD1對脂肪酸的去飽和作用
            1.3.5 甘油三酯的形成
    2 乳脂的分泌
    3 乳脂合成的調(diào)控
        3.1 日糧因素
        3.2 遺傳因素
        3.3 mTOR信號通路
        3.4 其他因子的調(diào)控
    4.乳脂合成在牦牛中的研究
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究 牦牛乳腺組織中乳脂合成相關(guān)蛋白及其mRNA的表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 樣品采集
        1.2 儀器與試劑
        1.3 HE染色
        1.4 免疫組織化學(xué)方法檢測乳脂合成相關(guān)蛋白在各乳腺組織中的定位
        1.5 PCR擴(kuò)增引物設(shè)計
        1.6 總RNA的提取及cDNA的合成
        1.7 基因表達(dá)的RT-qPCR檢測
        1.8 蛋白的提取與變性
        1.9 蛋白表達(dá)水平的Western-blot檢測
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 不同時期牦牛乳腺組織的形態(tài)學(xué)觀察
        2.2 LPL在各乳腺組織中的定位分布
        2.3 CD36蛋白在各乳腺組織中的定位分布
        2.4 FASN蛋白在各乳腺組織中的定位分布
        2.5 ACCα蛋白在各乳腺組織中的定位分布
        2.6 SCD1蛋白在各乳腺組織中的定位分布
        2.7 總RNA提取效果與質(zhì)量分析
        2.8 乳脂合成相關(guān)基因的表達(dá)
        2.9 乳脂合成相關(guān)蛋白的表達(dá)
    3.討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
發(fā)表論文
導(dǎo)師簡介



本文編號：4053332