目的:探討芳香烴受體(Aryl hydrocarbon receptor,Ah R)在誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Induced pluripotent stem cells,i PSCs)成骨分化中的作用,為以Ah R為靶點篩選i PSCs成骨分化誘導(dǎo)劑提供理論基礎(chǔ)。同時探討補骨脂及其活性成分異補骨脂素在i PSCs成骨分化中的作用及對Ah R的影響,為采用以Ah R為靶點的中藥或其活性成分體外誘導(dǎo)i PSCs成骨分化提供實驗基礎(chǔ)。方法:通過添加腺苷、抗壞血酸、β-甘油磷酸鈉建立直接誘導(dǎo)i PSCs成骨分化的方法。檢測Ah R在i PSCs成骨分化不同時間點的表達(dá)趨勢,采用Ah R激動劑和拮抗劑進(jìn)行干預(yù),探討Ah R在i PSCs成骨分化中的作用,同時觀察Ah R激動劑對雌激素受體α(Estrogen receptorα,ERα)表達(dá)的影響。采用補骨脂及其活性成分異補骨脂素對i PSCs成骨分化進(jìn)行干預(yù),觀察它們在i PSCs成骨分化中的作用�；诰W(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測補骨脂促進(jìn)成骨分化的靶點并進(jìn)行實驗驗證。檢測異補骨脂素對Ah R及其靶基因表達(dá)的影響,并基于藥物親和性的靶點穩(wěn)定性實驗探討其與Ah R是否...

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
Abstract
引言
第一部分 iPSCs的培養(yǎng)與成骨誘導(dǎo)
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 i PSCs細(xì)胞生長狀態(tài)
        2.2 多能性基因的表達(dá)
        2.3 成骨相關(guān)基因的表達(dá)
        2.4 茜素紅染色
    3 小結(jié)
第二部分 AhR在i PSCs成骨向分化中的作用研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.結(jié)果
        2.1 Ah R在i PSCs成骨分化中的表達(dá)趨勢
        2.2 Ah R激動劑對i PSCs成骨分化的影響
        2.3 Ah R拮抗劑對i PSCs成骨分化的影響
        2.4 激活A(yù)h R對ERα 表達(dá)的影響
    3.小結(jié)
第三部分 補骨脂對i PSCs成骨分化的影響及機制研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.結(jié)果
        2.1 PCL對i PSCs增殖的影響
        2.2 PCL對i PSCs成骨分化的影響
        2.3 PCL活性成分與靶點分析
        2.4 藥物-靶蛋白-疾病相互作用網(wǎng)絡(luò)分析
        2.5 PCL對IC3I3-E1成骨分化的影響
        2.6 PCL對PPARγ、Ah R表達(dá)的影響
    3.小結(jié)
第四部分 異補骨脂素通過Ah R促進(jìn)i PSCs成骨分化的機制研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2.結(jié)果
        2.1 IPRN對i PSCs成骨分化的影響
        2.2 IPRN對IC3I3-E1成骨分化的影響
        2.3 IPRN對Ah R及靶基因表達(dá)的影響
        2.4 IPRN與Ah R的結(jié)合分析
        2.5 Ah R激動劑對IPRN促成骨作用的影響
    3.小結(jié)
討論
    1. 中藥與骨再生
    2. iPSCs成骨誘導(dǎo)
    3. Ah R簡介
    4. 補骨脂簡介
    5. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析中藥作用機制
參考文獻(xiàn)
附錄 人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(i PSC)質(zhì)檢報告
博士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
查新報告
論文論著



本文編號：4044788