研究背景脂肪組織是人體內(nèi)胰島素作用的重要靶組織,在胰島素調(diào)節(jié)下,脂肪細(xì)胞通過甘油三酯的合成與分解,實現(xiàn)能量的存儲和釋放,維持體內(nèi)能量穩(wěn)態(tài)。肥胖癥的病理改變體現(xiàn)為脂肪細(xì)胞的膨大以及脂肪周圍間充質(zhì)干細(xì)胞分化導(dǎo)致的脂肪細(xì)胞數(shù)量增多。因此,探索間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成熟脂肪細(xì)胞的調(diào)控因子,對于完善脂肪代謝異常及肥胖的成因及分子機(jī)制,提供肥胖癥與脂肪發(fā)育不良的治療新靶點有著重大的意義。長鏈非編碼RNA通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控與轉(zhuǎn)錄后修飾等多種方式廣泛參與人體內(nèi)各種生理及病理過程。其中,在課題組前期研究中發(fā)現(xiàn),LncRNA-p3134與肥胖關(guān)系密切,但其具體效應(yīng)機(jī)制尚不明確。目的觀察比較過表達(dá)LncRNA-p3134的3T3-L1細(xì)胞系與對照組3T3-L1細(xì)胞分化功能及胰島素敏感性差異,探討LncRNA-p3134對脂肪細(xì)胞分化及功能的影響。探索LncRNA-p3134產(chǎn)生調(diào)控作用的潛在作用位點及機(jī)制。方法(1)利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)LncRNA-p3134的3T3-L1細(xì)胞系,隨后誘導(dǎo)脂肪前體細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化,采用油紅O染色及半定量法觀察LncRNA-p3134對脂肪細(xì)胞中脂滴大小及形態(tài)的影響,采用...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１轉(zhuǎn)染４８小時熒光顯微鏡下觀察慢病毒載體感染效率

分化過程中進(jìn)行檢測，我們采用慢病毒載體，將攜帶ＬｎｃＲＮＡ－Ｐ３１３４表達(dá)基因??的慢病毒載體和空載慢病毒載體分別轉(zhuǎn)染至３Ｔ３－Ｌ１細(xì)胞系中，在轉(zhuǎn)染后第３天??用熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)有綠色熒光蛋白表達(dá)，隨后開始使用嘌呤霉素（５Ｈｇ／ｍｌ）??篩選細(xì)胞，連續(xù)篩選７天，建立穩(wěn)定表達(dá)Ｌｎ....

圖１－２過表達(dá)ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對３Ｔ３－Ｌ１脂肪前體細(xì)胞分化的影響

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圖１－３?ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對脂肪細(xì)胞胰島素敏感性的影響

?響。??為了進(jìn)一步明確ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４引起的脂肪細(xì)胞分化功能障礙是否與胰島??素及胰島素信號通路有關(guān)，我們采用相同胰島素濃度刺激分化成熟的脂肪細(xì)胞，??通過顯色法定量檢測脂肪細(xì)胞攝取葡萄糖的能力。結(jié)果顯示，空白對照組（未??干預(yù)）與陰性對照組（感染空載慢病毒）的３Ｔ３－....

圖１－４?ＬｎｃＲＮＡ－ｐ３１３４對３Ｔ３－Ｌ１脂肪前體細(xì)胞成脂相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響

?博士學(xué)位論文???Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ?Ｒｅｌａｔｅｄ?Ｇｅｎｅ?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ＦＡＢＰ４?—??１＇５１?□?ｎｃ?＿＾ｒ：???〇?鬥?內(nèi)?ｒ＾ｊ?廣ｊ?Ｏ?□?ｌｎｃＲＮＡ－Ｐ３１３４?ＰＰＡＲｙ?讀??Ｓ?１．０－?Ａ?工?Ｉ?工工????Ｉ?ａ?ｃ／ＥＢＰ....

本文編號：4029644