胃癌是全球死亡率位居第三的惡性腫瘤疾病。目前,對(duì)于胃癌的發(fā)生和發(fā)展分子機(jī)制尚不明晰。轉(zhuǎn)錄因子FOXS1是我們基于TCGA測(cè)序數(shù)據(jù)篩選到的新的胃癌組織與正常組織之間顯著差異表達(dá)的基因之一,位于chr20q11.21。TCGA胃癌數(shù)據(jù)和GEO數(shù)據(jù)庫(kù)分析結(jié)果均顯示FOXS1基因在胃癌中顯著高表達(dá);并且通過RT-PCR和免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)FOXS1在胃癌中也顯著高表達(dá),這一系列結(jié)果提示FOXS1基因可能促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展。Fox轉(zhuǎn)錄因子家族因含有保守的叉頭框的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域而被命名,其成員在腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有非常重要的作用。Fox家族已成為腫瘤研究中的熱點(diǎn)。然而,目前FOXS1作為Fox家族最新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)成員,其在胃癌中的生物學(xué)功能與分子機(jī)制研究至今未被報(bào)道,因此本論文重點(diǎn)研究FOXS1轉(zhuǎn)錄因子與胃癌臨床意義的關(guān)系以及其對(duì)細(xì)胞增殖、周期、侵襲與遷移等生物學(xué)功能的影響,并闡明其發(fā)揮生物學(xué)功能的分子機(jī)制。目的:探討轉(zhuǎn)錄因子FOXS1在胃癌中的表達(dá)及臨床價(jià)值。體外檢測(cè)FOXS1基因?qū)ξ赴┘?xì)胞生長(zhǎng)、周期和克隆形成能力的影響。體內(nèi)檢測(cè)FOXS1基因?qū)ξ赴┘?xì)胞裸鼠成瘤能力的影響。檢測(cè)FOXS1基因?qū)ξ赴┘?xì)胞...

【文章頁(yè)數(shù)】：114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 FOXS1基因在胃癌中的表達(dá)與臨床意義分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 FOXS1基因在胃癌中高表達(dá)
        2.2 FOXS1基因與胃癌臨床信息的關(guān)系
    3 討論
第二部分 FOXS1基因促進(jìn)了胃癌細(xì)胞增殖作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 FOXS1基因的敲降效率檢測(cè)
        2.2 FOXS1基因敲降對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響
        2.3 FOXS1基因敲降對(duì)細(xì)胞克隆形成的影響
        2.4 FOXS1基因敲降誘導(dǎo)G1期細(xì)胞周期停滯
        2.5 FOXS1基因過表達(dá)效果的檢測(cè)
        2.6 FOXS1基因過表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)
        2.7 FOXS1基因過表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞克隆形成能力
        2.8 FOXS1基因過表達(dá)激活了G1/S期細(xì)胞周期檢查點(diǎn)
        2.9 FOXS1基因過表達(dá)促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力
    3 討論
第三部分 FOXS1基因促進(jìn)了胃癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 FOXS1基因敲降抑制了胃癌細(xì)胞的侵襲與遷移
        2.2 FOXS1基因過表達(dá)促進(jìn)了胃癌細(xì)胞的侵襲與遷移
        2.3 FOXS1基因促進(jìn)了胃癌細(xì)胞EMT的發(fā)生
    3 討論
第四部分 FOXS1基因啟動(dòng)子區(qū)域的鑒定與分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 FOXS1基因啟動(dòng)子區(qū)域主要在-660⁺1bp之間
        2.2 FOXS1基因啟動(dòng)子區(qū)域轉(zhuǎn)錄因子的預(yù)測(cè)分析與鑒定
        2.3 外源性NFKB1對(duì)FOXS1基因調(diào)控作用的分析
        2.4 NFKB1對(duì)FOXS1基因啟動(dòng)子區(qū)域調(diào)控作用的分析
        2.5 NFKB1與FOXS1啟動(dòng)子區(qū)域的體內(nèi)結(jié)合分析
    3 討論
第五部分 FOXS1基因通過Hh信號(hào)通路促進(jìn)了胃癌細(xì)胞發(fā)展進(jìn)程
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 FOXS1基因參與的信號(hào)通路富集分析
        2.2 FOXS1基因與GLI1基因的相關(guān)性分析
        2.3 GLI1基因可以抑制FOXS1基因的表達(dá)
        2.4 GLI1基因可以抑制FOXS1啟動(dòng)子區(qū)域的啟動(dòng)子活性
        2.5 在體內(nèi)GLI1直接結(jié)合在FOXS1啟動(dòng)子區(qū)域
        2.6 FOXS1啟動(dòng)子區(qū)域GLI1結(jié)合位點(diǎn)的定點(diǎn)突變分析
    3 討論
第六部分 miR-125a-5p可結(jié)合到FOXS1基因的3'-UTR區(qū)域抑制其翻譯
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 調(diào)控FOXS1基因的miRNAs預(yù)測(cè)分析
        2.2 miRNAs過表達(dá)對(duì)FOXS1基因m RNA水平?jīng)]有調(diào)控作用
        2.3 miR-125a-5p過表達(dá)顯著抑制了FOXS1蛋白的表達(dá)
        2.4 miR-125a-5p抑制對(duì)FOXS1mRNA水平的表達(dá)無(wú)影響
        2.5 miR-125a-5p抑制促進(jìn)了FOXS1蛋白的表達(dá)
        2.6 miR-125a-5p可以結(jié)合在FOXS13'-UTR位點(diǎn)
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述:FOX家族轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
博士期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：4023333