發(fā)布時(shí)間：2020-11-14 08:08

　　 本論文利用白來(lái)航純系雞作為模式動(dòng)物,通過(guò)長(zhǎng)期多代試驗(yàn),系統(tǒng)研究轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米的飼用安全性,重點(diǎn)分析轉(zhuǎn)基因生物材料對(duì)受試動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、腸道健康、器官功能、繁殖性能、免疫反應(yīng)、腸道微生態(tài)等方面的影響,旨在為完善轉(zhuǎn)基因作物飼用安全性評(píng)價(jià)體系提供方法依據(jù),為制定轉(zhuǎn)基因作物飼用安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)參考。第二章分析轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米(BT)、同源非轉(zhuǎn)基因玉米(CT)和商用非轉(zhuǎn)基因玉米(RF)以及飼糧的營(yíng)養(yǎng)成分組成,利用仿生法模擬玉米原料及飼糧干物質(zhì)和能量在各個(gè)消化道中消解規(guī)律,為轉(zhuǎn)基因玉米的營(yíng)養(yǎng)實(shí)質(zhì)等同性仿生評(píng)定方法的研究提供參考。試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),使用單胃動(dòng)物仿生消化系統(tǒng)模擬飼料原料和飼糧在胃腸道的消化過(guò)程,分析CT玉米、BT玉米和RF玉米以及對(duì)應(yīng)的飼糧在不同體外模擬消化階段的干物質(zhì)消化率、能量消化率和酶水解物能值的差異。結(jié)果表明：BT玉米和CT玉米以及飼糧常規(guī)概率成分含量和氨基酸組成是相似的。與CT玉米原料及飼糧相比,BT玉米原料及飼糧的干物質(zhì)和能量消化率在體外消化中沒(méi)有差異。BT玉米飼糧的酶水解物能值高于CT玉米飼糧(P=0.02, CV=1.12%),測(cè)值均處于仿生消化系統(tǒng)測(cè)試的誤差范圍內(nèi)(CV≤1.64%)。仿生消化評(píng)定方法為轉(zhuǎn)基因飼料營(yíng)養(yǎng)等同性評(píng)價(jià)提供新手段。第三章研究了長(zhǎng)期飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因(BT)玉米飼糧對(duì)親代蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道結(jié)構(gòu)和形態(tài)、組織病理學(xué)結(jié)構(gòu)、器官健康和血清生化指標(biāo)的影響。選取55周齡健康昀純系白來(lái)航產(chǎn)蛋雞72只隨機(jī)分為3個(gè)處理,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3只雞,分別飼喂含61.7%的同源非轉(zhuǎn)基因玉米、轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米和商品非轉(zhuǎn)基因玉米。預(yù)飼期2周,試驗(yàn)期12周。分析蛋雞的體重、產(chǎn)蛋性能(蛋重、產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋量、日采食量、料蛋比)和蛋品質(zhì)(蛋重、蛋清重、蛋黃重、蛋殼重、蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋白高度、哈夫單位、蛋黃顏色和蛋白顏色)。在12周飼喂結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)屠宰1只雞,每個(gè)處理共屠宰8只雞,測(cè)定屠宰性能和器官重量(心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃和卵巢),分析肝臟、脾臟、腎臟和小腸各段的組織結(jié)構(gòu)和形態(tài),并分析肝腎功能相關(guān)的血液生化指標(biāo)。研究表明：與同源非轉(zhuǎn)基因玉米相比,長(zhǎng)期飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米未對(duì)純系白來(lái)航產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、肝腎器官結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生不利影響；與同源非轉(zhuǎn)基因玉米相比,長(zhǎng)期飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米未對(duì)產(chǎn)蛋雞的腸道組織結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生不利影響,但發(fā)現(xiàn)的杯狀細(xì)胞數(shù)量的變化還需結(jié)合腸道微生態(tài)和長(zhǎng)期多代試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析。第四章研究了長(zhǎng)期飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因(BT)玉米飼糧對(duì)親代蛋雞盲腸食糜微生物區(qū)系的影響。選取55周齡昀健康純系白來(lái)航產(chǎn)蛋雞48只隨機(jī)分為2個(gè)處理,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3只雞,分別飼喂含61.7%的同源非轉(zhuǎn)基因玉米(CT)和轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米(BT)。預(yù)飼期2周,試驗(yàn)期12周,試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)屠宰1只雞,每個(gè)處理8只雞。使用16 S rRNA基因高通量測(cè)序技術(shù)分析盲腸食糜微生物的相對(duì)豐度,同時(shí)使用Real-time PCR分析微生物相關(guān)基因的表達(dá)量。與CT玉米組相比,BT玉米盲腸微生物Ace和Chao 1豐富度、Shannon指數(shù)與覆蓋度均沒(méi)有差異。飼喂BT玉米對(duì)盲腸幾乎所有微生物相對(duì)豐度沒(méi)有影響；但BT組盲腸微生物Ruminococcaceae unclassified的相對(duì)豐度低于CT組(P=0.02),但Real-time PCR定量進(jìn)一步揭示BT組的Bifidobacterium 和 Ruminococcaceae的表達(dá)量與CT組沒(méi)有顯著差異(P=0.33)；BT組Mucispirillum_schaedleri的相對(duì)豐度顯著下降(P=0.02)。第五章研究了長(zhǎng)期多代飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因(BT)玉米飼糧對(duì)子代母雞生長(zhǎng)和健康的影響。試驗(yàn)分成3個(gè)處理,親代同源非轉(zhuǎn)基因玉米——子代同源非轉(zhuǎn)基因玉米(CT-CT)、親代轉(zhuǎn)mCry1Ac基因玉米——子代轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米(BT-BT)和親代商品非轉(zhuǎn)基因玉米——子代商品非轉(zhuǎn)基因玉米(RF-RF)。親代選取55周齡健康純系白來(lái)航產(chǎn)蛋雞,子代母雞試驗(yàn)期從1日齡到36周齡。分析子代母雞的體重和蛋品質(zhì)(蛋重、蛋清重、蛋黃重、蛋殼重、蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋白高度、哈夫單位、蛋黃顏色和蛋白顏色)。在36周飼喂結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)屠宰1只雞,每個(gè)處理共屠宰8只雞,測(cè)定屠宰性能、器官重量(心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和卵巢),分析肝臟、脾臟、腎臟和小腸各段的組織結(jié)構(gòu)和形態(tài),并測(cè)定血液生化指標(biāo)、血常規(guī)和性激素水平。同時(shí)分離脾臟單核細(xì)胞,分析測(cè)定免疫細(xì)胞亞群。研究表明：與同源非轉(zhuǎn)基因玉米相比,長(zhǎng)期多代飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米未對(duì)子代母雞的體重、蛋品質(zhì)、雌性器官發(fā)育、結(jié)構(gòu)和功能、腸道組織結(jié)構(gòu)和功能、免疫指標(biāo)產(chǎn)生不利影響；長(zhǎng)期多代飼喂轉(zhuǎn)mCrylAc基因玉米未對(duì)子代母雞的肝腎器官結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生不利影響,但BT-BT組肺臟和腎臟相對(duì)重量顯著低于CT組(P0.05)；與CT-CT組相比,BT-BT組肺臟的絕對(duì)重量有降低的趨勢(shì)(P=0.098),但與RF-RF組肺臟的絕對(duì)重量沒(méi)有顯著差異(P0.10)；組織解剖時(shí)并未發(fā)現(xiàn)肺組織腫脹、充血、質(zhì)地變硬等現(xiàn)象。第六章研究了長(zhǎng)期飼喂轉(zhuǎn)mCry1Ac基因(BT)玉米飼糧對(duì)子代公雞生長(zhǎng)和健康的影響。試驗(yàn)分成3個(gè)處理,親代同源非轉(zhuǎn)基因玉米——子代同源非轉(zhuǎn)基因玉米(CT-CT)、親代轉(zhuǎn)mCry1Ac基因玉米——子代轉(zhuǎn)mCry1Ac基因玉米(BT-BT)和親代商品非轉(zhuǎn)基因玉米——子代商品非轉(zhuǎn)基因玉米(RF-RF)。親代選取55周齡健康白來(lái)航產(chǎn)蛋雞,子代公雞試驗(yàn)期從1日齡到32周齡。分析子代公雞的體重和精液品質(zhì)。在32周飼喂結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)屠宰1只雞,每個(gè)處理共屠宰6只雞,測(cè)定屠宰性能、器官重量(睪丸、雞冠、肉髯、心臟、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟),分析肝臟、脾臟、腎臟和小腸各段的組織結(jié)構(gòu)和形態(tài)。測(cè)定血液生化指標(biāo)、血常規(guī)和性激素水平。同時(shí)分離脾臟單核細(xì)胞,分析測(cè)定免疫細(xì)胞亞群。研究表明：與同源非轉(zhuǎn)基因玉米相比,長(zhǎng)期多代飼喂轉(zhuǎn)mCry1Ac基因玉米未對(duì)公雞的生產(chǎn)性能、雄性器官發(fā)育和功能、腸道組織結(jié)構(gòu)和功能、肝腎器官結(jié)構(gòu)和功能、免疫指標(biāo)產(chǎn)生影響。
【學(xué)位單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士后
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類(lèi)】：S816
【部分圖文】：

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博±后出站報(bào)告?第Ｈ章轉(zhuǎn)■基因玉米在親代蛋雞的飼用安全性評(píng)價(jià)研巧??在試驗(yàn)全期（１２周）ＢＴ組與ＣＴ姐蛋雞的十二指腸、空腸和回腸誠(chéng)毛高度、??隱窩深度和絨毛高度／隱窩深度沒(méi)有顯著差異（Ｐ＞０．１０，表３．５）。與ＣＴ姐相比，??ＢＴ組空腸和回腸每根絨毛的杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著増多（Ｐ＜?０．０５），但每毫米絨毛??上的杯狀細(xì)胞數(shù)量沒(méi)有顯著差異（Ｐ＞?０．１０）；?ＢＴ組十二指腸每根絨毛的杯狀細(xì)??胞數(shù)量有增多的趨勢(shì)（Ｐ?＝?０．０８），但每毫米絨毛上的杯狀細(xì)胞數(shù)量沒(méi)有顯著差異??（尸?＞０．１０）??３．３．６器官和腸道亞顯微結(jié)構(gòu)??３．３．６．１器官亞顯微結(jié)構(gòu)??

??輳慊?蠐衩自誶狀?凹Φ拇視冒踩?云蘭堊星桑崳?與對(duì)照沮（ＣＴ）相比，ＢＴ組產(chǎn)蛋雞的肝臟、脾臟和腎臟組織中均未見(jiàn)明顯??的病理學(xué)變他（圖３．１）。肝臟結(jié)構(gòu)完整，肝臟細(xì)胞的界限清晰可見(jiàn)，未見(jiàn)異常；??贓臟結(jié)構(gòu)完整、邊界清晰可見(jiàn)，脾小結(jié)數(shù)量和直徑未見(jiàn)異常；腎臟皮質(zhì)部和腎小??球體積適中，囊腔結(jié)構(gòu)清晰，腎小管的上皮細(xì)胞胞漿均質(zhì)紅染，髓質(zhì)小體集合管??上皮細(xì)胞胞漿均質(zhì)。??３．３．６．２腸道亞顯微結(jié)構(gòu)??．。寬�！�鸞．??ｂ！夢(mèng)瞧鮮陽(yáng)隹??—減養(yǎng)Ｉ．；．幽議??圖３．２轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)蛋雞的腸道結(jié)構(gòu)的影響（ＨＥ染色，４〇ｘ）?（Ａ）?ＣＴ組十二指??腸，（Ｂ）?ＢＴ姐十二指腸，（Ｃ）?ＲＦ組十二指腸；（Ｄ）?ＣＴ組空膩化）ＢＴ組空腸，（Ｆ）??ＲＦ組空腸；（Ｇ）?ＣＴ姐回腸，（Ｈ）?ＢＴ姐回腸，（Ｉ）?ＲＦ組回腸。??Ｆｉｇｕｒｅ?３．２?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｏｆ?ｆｅｅｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｃｏｍ?（ＢＴ?ｃｏｍ）?ｔｏ?ｌａｙｉｎｇ?ｈｅｎｓ?〇打?ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ??ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ?（ＨＥ?ｓｔａｉｎｉ円呂，ｏｒｉ呂ｉｎａｌ?ｍａ呂打ｉｆｉｃａｔｉｏｎ，?４〇ｘ）．?（Ａ）?Ｄｕｏｄｅｎｕｍ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ＣＴ?ｃｏｍ?ｇｒｏｕｐ，?（Ｂ）??Ｄｕｏｄｅｎｕｍ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ＢＴ?ｃｏｍ?ｇｒｏｕｐ，?（Ｃ）?Ｄｕｏｄｅｎｕｍ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ＲＦ?ｃｏｍ?ｇｒｏｕｐ；?（Ｄ）?Ｊｅｊｕｎｕｍ?ｆｒｏｍ??ｔｈｅ?ＣＴ?ｃｏｍ?呂ｒｏｕｐ

Ｆｉｇｕｉ＾ｅ?４．１?民ａｒｅｆａｃｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅｓ?化ｒ?ｃｅｃａｌ?ｂａＵｅｒｉａ?ｏｆ?ｈｅｎｓ?ｆｅｄ?出ｅ?ＢＴ?ｃｏｒｎ?ｄｉｅｔ??采用對(duì)序列進(jìn)行隨機(jī)抽樣的方法，Ｗ抽到的序列數(shù)與它們所能代表ＯＴＵ的數(shù)目??構(gòu)建稀釋曲線(xiàn)。稀釋曲線(xiàn)（圖４．１）顯示處理間的盲腸微生物豐富度的具有相似的水??平。曲線(xiàn)趨向平坦，說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)量合理，更多的數(shù)據(jù)量只會(huì)產(chǎn)生少量新的ＯＴＵ，說(shuō)??明樣本的測(cè)序數(shù)據(jù)量合理。??４．３．３?Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｉｅｎｅｒ?曲線(xiàn)??利用各盲腸食糜樣品的測(cè)序量在不同測(cè)序深度時(shí)的微生物多樣性指數(shù)構(gòu)建??Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｉｅｎｅｒ曲線(xiàn)（圖４．２）
【參考文獻(xiàn)】

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1 趙峰;米寶民;任立芹;王鈺明;張宏福;;基于單胃動(dòng)物仿生消化系統(tǒng)的雞仿生消化法測(cè)定飼料酶水解物能值變異程度的研究[J];動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2014年06期

本文編號(hào)：2883264