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豬肝羧酸酯酶調(diào)控β-內(nèi)酰胺類藥物療效及炎癥反應(yīng)的機制研究

發(fā)布時間:2024-06-14 22:27
  哺乳動物羧酸酯酶屬于絲氨酸水解酶家族,廣泛分布于機體的組織器官與免疫細(xì)胞中,可高活力水解含有酯鍵、硫酯鍵、酰胺鍵的內(nèi)/外源性化合物,在體內(nèi)的藥物活化與代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、炎癥反應(yīng)、營養(yǎng)物質(zhì)吸收、膽固醇穩(wěn)態(tài)等過程中扮演重要角色。豬肝羧酸酯酶(PLE)是哺乳動物羧酸酯酶家族中最復(fù)雜的成員,包含多種同工酶,其水解具有高度的立體選擇性和手性選擇特性。受PLE高度水解活性及人和小鼠羧酸酯酶在藥物代謝及炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用的啟發(fā),推測PLE很可能憑借高度的水解活性,介入機體藥物代謝和炎癥反應(yīng)中,扮演藥物代謝酶及炎癥反應(yīng)調(diào)控者的角色。本論文結(jié)合體外模型和仔豬體內(nèi)炎癥模型進行了系列試驗,主要研究方法與結(jié)果如下:1. PLE高效水解AMO和AMP并降低其抑菌效果首先,LC-MS/MS檢測發(fā)現(xiàn)原核功能性表達PLE1和PLE6可高活力水解AMO、AMP,分別生成阿莫西林噻唑酸和氨芐西林噻唑酸。PLE1水解AMO和AMP活力高達25.94 U/mg、8.34 U/mg,PLE6水解AMO和AMP活力分別為25.32U/mg、10.44 U/mg。PLE1和PLE6水解AMO的Vmax相近,而PLE1水解AMP的...

【文章頁數(shù)】:124 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-1CES水解底物四面中間體形成機制(SatohandHosokawa2006)

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華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士研究生學(xué)位論文19系統(tǒng),該催化結(jié)構(gòu)域在不同亞型同工酶的序列中高度保守,決定CES水解底物具有選擇性,只能水解含有特定化學(xué)鍵的底物。另外,Bencharit等發(fā)現(xiàn)hCE1蛋白具有相當(dāng)大的催化活性腔(體積約13003),除了催化三聯(lián)體氨基酸殘基外,主要是疏水....


圖1-2內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔側(cè)CES-UGP互作與細(xì)胞內(nèi)CES-MRP2互作模式圖

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華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士研究生學(xué)位論文21圖1-2內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔側(cè)CES-UGP互作與細(xì)胞內(nèi)CES-MRP2互作模式圖(SatohandHosokawa2006)Fig.1-2Carboxylesterase-UGTinteractionintheluminalsidesofERme....


圖1-3羧酸酯酶參與體內(nèi)膽固醇酯代謝(RedinboandPotter2005)

圖1-3羧酸酯酶參與體內(nèi)膽固醇酯代謝(RedinboandPotter2005)

豬肝羧酸酯酶調(diào)控β-內(nèi)酰胺類藥物療效及炎癥反應(yīng)的機制研究22酯酶1(hCE1)能夠表現(xiàn)出膽固醇酯水解酶活性(CEH)和;o酶A-膽固醇;D(zhuǎn)移酶活性(ACTA),消除細(xì)胞內(nèi)多余的膽固醇酯,防止巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞,從而阻止動脈粥樣硬化疾病的發(fā)生(圖1-3),CES可....


圖1-5PLE1基因序列示意圖

圖1-5PLE1基因序列示意圖

因的間隔序列,黃色表示未知基因序列,橘色方框代表豬CH242部分基因序列,紅色和黑色箭頭表示PLE基因上游720bp反向互補序列(Zhouetal2016)。Fig.1-4SchematicdiagramofPLEsgenesequencesonpigchromosome6.Re....



本文編號:3994513

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