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肺炎克雷伯菌多粘菌素耐藥菌株的篩選及基因型的鑒定

發(fā)布時(shí)間:2024-10-26 21:51
  目的:1.通過統(tǒng)計(jì)江西省某三甲醫(yī)院2017年至2019年肺炎克雷伯菌臨床分離株對常見抗生素的敏感性,闡明近年來我省肺炎克雷伯菌的耐藥情況。2.篩選出對多粘菌素耐藥的肺炎克雷伯菌,并評估快速多粘菌素敏感實(shí)驗(yàn)的可操作性及實(shí)用性,為后續(xù)快速鑒定多粘菌素耐藥的肺炎克雷伯菌提供依據(jù)。3.通過分析該醫(yī)院多粘菌素耐藥肺炎克雷伯菌全基因組序列,探究其對多粘菌素耐藥的分子機(jī)制,為后續(xù)開展分子生物學(xué)檢測提供數(shù)據(jù)支撐。方法:1.使用世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的WHONET5.6分析軟件,對臨床肺炎克雷伯菌在該三甲醫(yī)院的分布、耐藥率等情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。2.依照臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)推薦方法,對肺炎克雷伯菌多粘菌素耐藥進(jìn)行測定。肉湯稀釋法確定最低抑菌濃度(MIC),折點(diǎn)參考?xì)W洲抗菌藥物敏感性試驗(yàn)委員會(EUCAST)。3.采用多位點(diǎn)序列分型技術(shù)(MLST),對肺炎克雷伯菌7個(gè)管家基因(gapA、infB、rpoB、mdh、tonB、pgi及phoE)進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測序,將測序結(jié)果提交至https://bigsdb....

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 主要設(shè)備和儀器
        2.1.5 引物設(shè)計(jì)合成
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 菌株的鑒定及藥物敏感實(shí)驗(yàn)
        2.2.2 多粘菌素耐藥基因擴(kuò)增
        2.2.3 測序基因組提取
        2.2.4 多位點(diǎn)序列分型技術(shù)(MLST)
        2.2.5 全基因組測序
        2.2.6 多粘菌素快速實(shí)驗(yàn)和改良多粘菌素快速實(shí)驗(yàn)
第3章 結(jié)果
    3.1 臨床肺炎克雷伯菌分布統(tǒng)計(jì)
    3.2 肺炎克雷伯菌耐藥率統(tǒng)計(jì)
    3.3 篩選耐多粘菌素的肺炎克雷伯菌
    3.4 多粘菌素耐藥的肺炎克雷伯菌對其他抗生素耐藥結(jié)果及ST分型
    3.5 快速多粘菌素耐藥實(shí)驗(yàn)和改良快速多粘菌素耐藥試驗(yàn)結(jié)果
    3.6 多粘菌素耐藥肺炎克雷伯菌的全基因組測序
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號:4008300

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